Page 153 - 《广西植物》2023年第1期

１ 期 宋静静等: 广西夹竹桃内生真菌的多样性和抑制几种水产病原菌活性筛选 １ ４ ９

( １. Ｇｕａｎｇｘｉ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｂｅｉｂｕ Ｇｕｌｆ Ｍａｒｉｎｅ Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎꎬ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｍａｒｉｎｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｂｅｉｂｕ Ｇｕｌｆ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ
Ｑｉｎｚｈｏｕ ５３５０１１ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２. Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｅｒａｍｉｅｓ ａｎｄ Ｄｅｓｉｇｎꎬ Ｂｅｉｂｕ Ｇｕｌｆ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｑｉｎｚｈｏｕ ５３５０１１ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ３. Ｑｉｎｚｈｏｕ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅꎬ Ｑｉｎｚｈｏｕ ５３５０９９ꎬ Ｃｈｉｎａ )

Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ ｉｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔ. Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｆｒｏｍ
Ｎ. ｏｌｅａｎｄｅｒ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｉｔｓ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓꎬ ｔｈｅ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｏｆ Ｎ. ｏｌｅａｎｄｅｒ ｉｎ Ｇｕａｎｇｘｉ ｗｅｒｅ
ｉｓｏｌａｔｅｄ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｅｄꎬ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ａ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ＩＴＳ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ. Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ
ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｕｓ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｗｉｔｈ ｆｉｖｅ ｉｎｄｉｃａｔｏｒ ｂａｃｔｅｒｉａ (ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｔｈｒｅｅ Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐｅｃｉｅｓ). Ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ: (１) Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ １９ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｎ. ｏｌｅａｎｄｅｒ. Ｔｈｅ ＩＴＳ ｓｅｑｕｅｎｃｅ
ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｓｅ １９ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ａｌｌ ｂｅｌｏｎｇｅｄ ｔｏ ｔｈｅ Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａꎬ ａｎｄ ｃｏｖｅｒｅｄ ｆｉｖｅ ｏｒｄｅｒｓ ａｎｄ ｓｅｖｅｎ
ｇｅｎｅｒａꎬ ｗｈｉｃｈ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍꎬ Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａꎬ Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａꎬ Ｎｅｏｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍꎬ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓꎬ Ｎｏｔｈｏｐｈｏｍａ ａｎｄ
Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ. Ａｍｏｎｇ ｔｈｅｍꎬ ｔｈｅ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｇｅｎｅｒａ ｗｅｒｅ Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ (ｔｈｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ３６.８５％) ａｎｄ Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ
(ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ２１.０５％). Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｗａｓ ｍａｉｎｌｙ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ ｏｎ ｓｔｅｍｓꎬ ａｎｄ Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ ａｌｌ ｏｒｉｇｉｎａｔｅｄ ｆｒｏｍ
ｌｅａｖｅｓ. (２) Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｊｉｎｇ￣１１７ (Ｎｅｏｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ ｓｐ.) ａｎｄ ｙｅ￣１３０ (Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ ｓｐ.) ｈａｄ
ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ Ｖｉｂｒｉｏ ｃａｍｐｂｅｌｌｉｉꎬ ｙｅ￣１３６ (Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐ.) ｃｏｕｌｄ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ
ａｎｄ Ｖｉｂｒｉｏ ｃａｍｐｂｅｌｌｉｉ. ｙｅ￣１３５ (Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐ.) ａｎｄ ｊｉｎｇ￣１１６ (Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｓｐ.) ｃｏｕｌｄ ｏｎｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔ Ｂ. ｃｅｒｅｕｓꎬ ａｎｄ ｙｅ￣
１３４ (Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ ｓｐ.) ｈａｄ ａｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｔｏ Ｖｉｂｒｉｏ ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ. Ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｔｉｍｅ ｔｈａｔ
ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｏｆ Ｎ. ｏｌｅａｎｄｅｒ ｉｎ Ｇｕａｎｇｘｉ ｈａｓ ａ ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ ｒｉｃｈ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ＩＴＳ ｓｅｑｕｅｎｃｅ. Ｓｏｍｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ
ａｃｔｉｖｅ ｓｔｒａｉｎｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄꎬ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｃｏｕｌｄ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ａｑｕａｔｉｃ ｐａｔｈｏｇｅｎ Ｖｉｂｒｉｏꎬ ｗｈｉｃｈ ｗｉｌｌ ｈａｓ
ｇｏｏｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｖａｌｕｅ ｉｎ ｔｈｅ ｆｕｔｕｒｅ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒꎬ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉꎬ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＩＴＳ ｓｅｑｕｅｎｃｅꎬ Ｖｉｂｒｉｏꎬ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ

夹 竹 桃 ( Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅ ) 是 夹 竹 桃 科 ａｌ.ꎬ ２０２０)ꎬ并发现内生真菌可能在药用植物活性
(Ａｐｏｃｙｎａｃｅａｅ)夹竹桃属(Ｎｅｒｉｕｍ)中的一种传统药 物质的合成中有重要作用ꎮ 国内外研究表明ꎬ目
用植物ꎬ含有非常丰富的活性化合物ꎬ在世界各地 前有少量从夹竹桃中得到内生菌及其活性物质的
(特别是印度和中国) 被广泛应用ꎮ 在传统中医 报道 ( Ｖａｌｌａｂｈｂｈａｉꎬ ２００８ꎻ Ｒａｍｅｓｈａ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１３ꎻ
中ꎬ被用于治疗心脏疾病、糖尿病、哮喘、癌症和癫 Ｒｅｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１６ꎻ Ｍａ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１７ꎻ 郑浩等ꎬ ２０２０ꎻ
痫等疾病( Ｅｌｌｉｏｔｔꎬ ２００２)ꎮ 近代药理活性研究表 朱美林等ꎬ ２０２０)ꎬ但是ꎬ其对真菌的鉴定主要基
明ꎬ夹竹桃含有抗细菌( Ｈｕｓｓａｉｎ ＆ Ｇｏｒｓｉꎬ ２００４)、 于形态学特征ꎮ 植物内生真菌很多不产孢ꎬ仅依
抗真菌(Ｈａｄｉｚａｄｅｈ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００９)、抗病毒( Ｓｉｎｇｈ ｅｔ 靠形态学数据不能准确反应夹竹桃内生真菌种
ａｌ.ꎬ ２０１３)、 抗 氧 化 ( Ｄｅｙ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１２)、 抗 疟 疾 类ꎬ而采用分子系统的方法对夹竹桃内生真菌多
(Ｓｈａｒｍａ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００５)等多种活性成分ꎮ 样性进行研究还未有报道ꎮ 此外ꎬ目前研究发现
内生真菌是植物微生态 系 统 的 重 要 组 成 部 的夹竹桃内生真菌及其活性物质的类型主要包括
分ꎬ广泛存在于植物的健康组织中ꎮ 内生真菌及 抗肿瘤、抗氧化、杀虫、抗植物病原真菌、抗人体的
其次 生 代 谢 产 物 在 药 理 学 和 农 业 中 应 用 广 泛 病原菌等ꎬ而在抗水产病菌方面鲜有报道ꎮ
(Ａｌｕｒａｐｐａ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１４)ꎮ 从 在 紫 杉 的 内 生 真 菌 广西地处亚热带地区ꎬ良好的环境孕育了很多
Ｔａｘｏｍｙｃｅｓ ａｎｄｒｅａｎａｅ 中发现了抗癌化合物紫杉醇 药用价值高的道地药材ꎬ该区域药用植物内生菌多
(Ｓｔｉｅｒｌｅ ｅｔ ａｌ.ꎬ １９９５)开始ꎬ目前已从植物内生真菌 样性的研究可以为将来系统评估和确定药材药效
分离出多个抗病毒、抗肿瘤、抗微生物活性化合 的地域差异提供参考ꎮ 目前ꎬ水产养殖中抗生素的
物ꎬ 仅 就 抗 微 生 物 活 性 而 言ꎬ 就 已 发 现 了 使用受到了严格限制ꎬ导致新的水产病原菌及抗生
Ａｌｔｅｒｓｏｌａｎｏｌ Ａ、 Ｅｎｆｕｍａｆｕｎｇｉｎ、 Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃ ａｃｉｄ、 素多耐药菌不断出现ꎮ 夹竹桃内生真菌作为发掘
Ｊｅｓｔｅｒｏｎｅ、 Ｈｙｄｒｏｘｙ￣ｊｅｓｔｅｒｏｎｅ、 Ｇｕｉｇｎａｒｄｉｃ ａｃｉｄ、 天然活性化合物的重要资源ꎬ有希望从中获得抑制
Ｐｅｓｔａｃｉｎ、Ｉｓｏｐｅｓｔａｃｉｎ 等几十种活性化合物( Ｇｕｐｔａ ｅｔ 水产病原菌的新型抗菌活性菌株和化合物ꎮ 本研