Page 8 - 《广西植物》2024年第10期
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１ ８ １ ０ 广 西 植 物 ４４ 卷
发芽初期(第 ３ 天) 种子发芽数 透明ꎬ易挑起ꎮ
发芽势 ＝ ×１００％
供试种子数 基于菌株的 １６Ｓ ｒＤＮＡ 序列构建系统发育树ꎬ
发芽初期(第 ７ 天) 种子发芽数 确定菌株的分类学地位ꎮ 如图 ２ 所示ꎬ基于贝叶
发芽率 ＝ ×１００％
供试种子数
斯 推 断 树ꎬ ＨＹ１￣１、 ＨＹ１￣２、 ＨＹ１￣３ 和 ＨＹ１￣４ 与
１.２.８ 种子催芽 将糯高粱种子按照 １.２.１ 的方法进
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ｓｔｒａｉｎ ＤＳＭ １０ 聚成一类ꎬ置信度为
行表面消毒处理ꎬ将处理好的种子平铺于水琼脂平
９８％ꎬ表明这 ４ 株菌都属于枯草芽孢杆菌ꎮ 因此ꎬ
板上ꎬ将水琼脂平板倒置于 ２８ ℃培养箱中培养 ４８ ｈꎮ
分别 将 这 ４ 株 菌 命 名 为 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＨＹ１￣１、
１.２.９ 盆栽实验 将珍珠岩和蛭石按照 １ ∶ ２ 的比
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＨＹ１￣２、 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＨＹ１￣３ 和
例混合均匀ꎬ装在塑料花盆中ꎬ花盆规格:１７.５ ｃｍ
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＨＹ１￣４ꎮ
(高度) × １１.５ ｃｍ (底径) × １６.５ ｃｍ (口径)ꎮ 将 ２.２ 植物生长激素 ＩＡＡ 的产生能力
花盆用报纸封口后ꎬ１２１ ℃ 下灭菌 ３０ ｍｉｎꎮ 挑选发
称取 １７.５０ ｍｇ 分析纯 ＩＡＡ 标准品ꎬ用少量乙
芽的糯 高 粱 种 子 种 在 花 盆 中ꎬ每 个 花 盆 播 种 ２０
醇溶解后ꎬ加入约 ９０ ｍＬ 蒸馏水ꎬ将溶液转移到容
颗ꎬ每个处理 １０ 个花盆ꎮ ￣１
量瓶中ꎬ定容至 １００ ｍＬꎬ制备浓度为 １ ｍｍｏｌＬ
１.２.１０ 接菌 用 １.２.４ 的方法制备菌悬液ꎬ待糯高粱 的 ＩＡＡ 标准液ꎮ 以吸光值为横坐标ꎬ以 ＩＡＡ 浓度
幼苗露出土面ꎬ向每个花盆中加入 １０ ｍＬ 菌液ꎬ对照 为纵坐标ꎬ绘制 ＩＡＡ 浓度标准曲线ꎮ 根据标准曲
组加入等量的无菌水ꎮ 糯高粱生长过程中ꎬ根据需 线计算 上 清 液 中 ＩＡＡ 的 含 量ꎬ 并 计 算 菌 液 浓 度
要加入改良霍格兰营养液[海博生物ꎬ霍格兰营养
ＯＤ 为 １ 时单位浓度菌株 ＩＡＡ 的产生量ꎮ 如表
６００ ｎｍ
液(不含硝酸钙)ꎬ产品编号为 ＨＢ８８７０￣１ꎬ使用时加 １ 所示ꎬ单位浓度菌株 ＩＡＡ 产生量最高的菌株为
￣１ ￣１
入 ＮＨ ＮＯ ０.９２ ｇＬ 和 ＣａＣｌ ０.６４ ｇＬ ]ꎮ ＨＹ１￣１ꎬ为 ２.５６ ｍｏｌＬ ꎻ其次为 ＨＹ１￣３ꎬ单位浓度
￣１
４ ３ ２
１.２.１１ 取样及指标测定 接菌 ３０ ｄ 后ꎬ将糯高粱 菌株 ＩＡＡ 产生量为 ２.２９ ｍｏｌＬ ꎻ单位浓度菌株
￣１
幼苗从基质中取出ꎬ用流水将根冲洗干净ꎬ用吸水 ￣１
ＩＡＡ 产生量最低的是 ＨＹ１￣２ꎬ为 １.４３ ｍｏｌＬ ꎮ
纸将表面的水吸干ꎬ测量糯高粱的株高、鲜重等指 ２.３ 菌株对糯高粱种子萌发的影响
标ꎮ 将糯高粱植株用硫酸－双氧水消解ꎬ用凯氏定 如 图 ３: Ａ 所 示ꎬ 对 照 组 糯 高 粱 发 芽 势 为
氮法测定植物全氮含量( 马宗琪等ꎬ ２０１４)ꎬ用钼 １７.６７％ꎬ用 ＨＹ１￣１ 菌悬液对糯高粱种子进行处理
锑抗比色法测定植物全磷含量ꎮ 采用碱解扩散法 后ꎬ发芽 势 为 ３７. ３３％ꎬ 显 著 提 高 了 １１１. ２６％ꎻ 用
测定土壤碱解氮( 速效氮) 含量( 杨清华ꎬ ２０１８)ꎻ ＨＹ１￣２ 菌 悬 液 处 理 后ꎬ 糯 高 粱 种 子 发 芽 势 为
用碳酸氢钠溶液浸提ꎬ用钼锑抗比色法测定土壤 １８.３３％ꎬ没有显著变化ꎻ用 ＨＹ１￣３ 菌悬液处理后ꎬ
有效磷含量ꎮ 糯高粱种子发芽势为 ２１.３３％ꎬ显著增加了 ７.６４％ꎻ
１.３ 数据处理 用 ＨＹ１￣４ 菌 悬 液 处 理 后ꎬ 糯 高 粱 种 子 发 芽 势 为
利用 Ｏｒｉｇｉｎ ２０１９ 软件ꎬ对所得数据进行统计 １６.００％ꎬ显著降低了 ５.８８％ꎮ 如图 ３:Ｂ 所示ꎬ对照
分析和作图ꎮ 组的糯高粱种子发芽率为 １８.３３％ꎬ用 ＨＹ１￣１ 菌悬
液处理后ꎬ糯高粱种子的发芽率为 ４８.６７％ꎬ显著
２ 结果与分析 提高了 １６５.５２％ꎻ用 ＨＹ１￣２ 菌悬液处理后ꎬ糯高粱
种子发芽率为 ３７.６７％ꎬ显著提高了 １０５.５１％ꎻ用
２.１ 菌株的分离和鉴定 ＨＹ１￣３ 菌 悬 液 处 理 后ꎬ 糯 高 粱 种 子 的 发 芽 率 为
从糯高粱叶片中分离得到 ４ 株细菌ꎬ分别编号 ４１.３３％ꎬ显著提高了 １２５.４８％ꎻ用 ＨＹ１￣４ 菌悬液处
为 ＨＹ１￣１、ＨＹ１￣２、ＨＹ１￣３ 和 ＨＹ１￣４ꎮ 如图 １:Ａ 所 理后ꎬ糯高粱种子的发芽率为 ２５.６７％ꎬ显著提高
示ꎬＨＹ１￣１ 在 ＬＢ 平板上生长良好ꎬ菌落呈圆形ꎬ黄 了 ４０.０４％ꎮ 以上表明ꎬ４ 株细菌( ＨＹ１￣１、ＨＹ１￣２、
色ꎬ不透 明ꎬ 表 面 光 滑ꎬ 易 挑 起ꎻ 如 图 １: Ｂ 所 示ꎬ ＨＹ１￣３、ＨＹ１￣４)对糯高粱种子萌发都有促进作用ꎬ
ＨＹ１￣２ 在 ＬＢ 平板上生长旺盛ꎬ菌落较大ꎬ略带微 其中 ＨＹ１￣１ 的促进效果最显著ꎮ
红色ꎬ表面光滑ꎬ不透明ꎬ易挑起ꎻ如图 １:Ｃ 所示ꎬ ２.４ 菌株对糯高粱生长的影响
ＨＹ１￣３ 为淡黄色ꎬ表面光滑ꎬ不透明ꎬ易挑起ꎻ如图 综合上述结果ꎬ选取 ＨＹ１￣１ 做盆栽实验ꎮ 如
１:Ｄ 所示ꎬＨＹ１￣４ 为白色针状菌落ꎬ表明光滑ꎬ不 图 ４:Ａ 所示ꎬ与不接菌的对照组相比ꎬ 接种 ＨＹ１￣１
