Page 51 - 《广西植物》2024年第12期

１２ 期 李小琴等: 单氰胺破除葡萄休眠生理生化响应及相关基因克隆与表达分析 ２ ２ ０ ９

方框表示 １ 个‘水晶’葡萄 ＣＢＦ 蛋白 (ＶｖＣＢＦ)ꎮ
Ｔｈｅ ｂｏｘ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｏｎｅ ＣＢＦ ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｆ Ｖｉｔｉｓ ｖｉｎｉｆｅｒａ × Ｖ. ｌａｂｒｕｓｃａ
‘Ｓｈｕｉｊｉｎｇ’ (ＶｖＣＢＦ).
图 ９ ＶｖＣＢＦ 蛋白系统进化分析
Ｆｉｇ. ９ Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＶｖＣＢＦ ｐｒｏｔｅｉｎ

一员(Ｍｉｚｏｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１２ꎻ Ｓｈｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１５)ꎮ 吴家
敏(２０１８)研究表明 ＡＰ２ / ＥＲＦ 超家族中的 ＥＲＦ 转
录因 子 参 与 单 氰 胺 打 破 葡 萄 休 眠 过 程ꎮ 然 而ꎬ
ＤＲＥＢ 亚家族转录因子是否也参与此过程却暂无
报道ꎮ 本研究证明了‘ 水晶’ 葡萄的 ＣＢＦ 转录因
子 ＶｖＣＢＦ 也参与单氰胺打破葡萄休眠的过程ꎬ但
目前ꎬＡＰ２ / ＥＲＦ 超家族的 ＡＰ２ 和 ＲＡＶ 等转录因
子是否也参与单氰胺打破葡萄休眠的过程ꎬ值得
进一步研究ꎮ 据报道 ＣＢＦ 是植物冷胁迫和休眠过
程中 ＤＡＭ(Ｄｏｒｍａｎｃｙ￣ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ＭＡＤＳ￣ｂｏｘ) 基因的
上游反式因子ꎬＤＡＭ 可以直接调控 ＦＴ 转录因子的
表达ꎬ说明 ＣＢＦ 与 ＦＴ 之间可以通过 ＤＡＭ 相互影
响且呈负相关关系( Ｈｏｒｖａｔｈ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００８ꎻＳａｉｔｏ ｅｔ
ａｌ.ꎬ ２０１５)ꎬ与本研究结果一致ꎬ在单氰胺打破‘ 水 不同小写字母表示同一处理下不同处理时间之间差异显著
晶’葡萄芽休眠的过程中ꎬＶｖＦＴ１ 和 ＶｖＦＴ２ 基因表 (Ｐ<０.０５)ꎮ
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｍａｌｌ ｌｅｔｔｅｒｓ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｂｅｔｗｅｅｎ
达均随着时间增加而上调ꎬ而 ＶｖＣＢＦ 基因表达随
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｔｉｍｅ ｉｎ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ (Ｐ<０.０５).
着时间增加而下调ꎬＶｖＦＴｓ 与 ＶｖＣＢＦ 基因的表达呈
图 １０ 单氰胺处理后‘水晶’葡萄芽 ＶｖＦＴ１、ＶｖＦＴ２
负相关ꎮ 和 ＶｖＣＢＦ 基因的相对表达量变化
本研究通过 ＢＬＡＳＴ 分别下载与 ＶｖＦＴ１、ＶｖＦＴ２ Ｆｉｇ. １０ Ｒｅｌａｔｉｖｅ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ＶｖＦＴ１ꎬ ＶｖＦＴ２
和 ＶｖＣＢＦ 蛋白的氨基酸同源性最高的 １０ 个相关 ａｎｄ ＶｖＣＢＦ ｉｎ ｂｕｄｓ ｏｆ Ｖｉｔｉｓ ｖｉｎｉｆｅｒａ × Ｖ. ｌａｂｒｕｓｃａ
‘Ｓｈｕｉｊｉｎｇ’ ａｆｔｅｒ ｃｙａｎａｍｉｄｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
蛋白ꎬ比对发现与 ＶｖＦＴ１ 氨基酸同源性大于 ９０％
的 仅 有 ２ 个 [ ＬｃＦＴ ( ＡＥＵ０８９６０. １ )、 ＤｌＦＴ２
(ＡＬＡ５５９９８. １)]ꎬ 与 ＶｖＦＴ２ 氨 基 酸 同 源 性 大 于 (ＡＨＦ２７４４４.１)]ꎬ这 ４ 个蛋白分属于荔枝和龙眼
９０％的也 仅 有 ２ 个 [ ＬｃＦＴ( ＡＥＵ０８９６１. １)、 ＤｌＦＴ２ 的 ＦＴ 基因且通过进化树分析发现 ＶｖＦＴ１、ＶｖＦＴ２、