Page 7 - 《广西植物》2024年第2期
P. 7

２ 期                         张文娟等: 湿地松无性系松脂组分分析及评价                                           ２ ０ ９

                                                               ＳＰＳＳ 软件检验数据是否符合正态分布ꎬ符合正态
            １  材料与方法                                           分布的数据用皮尔逊相关系数进行相关性计算ꎮ
                                                               使用 ＳＰＳＳ 软件ꎬ采用 Ｋ￣ｍｅａｎｓ 聚类方法ꎬ以定量
            １.１ 材料                                             数据作为标准对样品进行聚类分析ꎮ 将聚类的各
                 江西省峡江县林木良种场湿地松一代种子园                           分组数据与总体平均值分别进行多重比较( ｔ 检
            建于 １９８０ 年ꎬ原有 ５５ 个无性系ꎬ现保存有 ４３ 个无                    验)ꎬＰ<０.０５ 时表示两组样本平均值之间差异性
            性系ꎬ选择其中长势好、干形通直的 ３６ 个无性系                           显著ꎮ
            作为研究材料(良种编号为 ＧＬＳ 赣湿 １ 号)ꎮ 种子
                                                               ２  结果与分析
            园位于江西省峡江县水边镇( １１５°２４′ Ｅ、２７°３３′
            Ｎ)ꎬ属于中亚热带季风气候ꎬ全年日照为 １ ７５２ ｈꎬ
            年平均气温为 １７.７ ℃ ꎬ１０ ℃ 以上有效积温持续                       ２.１ 松脂组分及相关性状差异分析
            ２５０ ｄꎬ年平均降雨量为 １ ５５７.９ ~ １ ７００.０ ｍｍꎬ年蒸                  利用 ＧＣ￣ＭＳ 技术共鉴定出了 ２１ 种松脂成分ꎬ

            发量为１ ４５８.８ ｍｍꎮ 该基地气候温和、雨量丰富、                       包括 ８ 种单萜成分、１３ 种二萜成分ꎮ 除了柠檬烯
            光照充分、四季分明ꎬ一年无霜期长达 ２７７ ｄꎬ十分                         和长叶松酸外ꎬ其他成分在绝大部分无性系中都
            适宜湿地松的生长ꎮ                                          能鉴别 出 来ꎮ 单 萜 类 物 质 的 含 量 为 １３. ８７％ ~
            １.２ 方法                                             ２１.２９％ꎬ平均值为 １７.３２％ꎮ 其中ꎬ主要成分为 α￣
            １.２.１ 松脂采集及胸径测量  选择种子园内生长                          蒎烯和 β￣蒎烯ꎬ约占单萜类组分的 ９０％ꎮ 双萜类
            较好、干形通直的 ３６ 个无性系ꎬ使用胸径尺测量                           物质占所有组分的含量为 ６８.１１％ ~ ８０.９６％ꎬ平均
            胸径ꎬ并在同一日通过松脂收集装置( 李彦杰等ꎬ                            值为 ７４.２０％ꎬ其中海松酸型树脂酸为 ８.２９％ꎬ枞酸
            ２０１２ｂ)采集松脂ꎬ在树干的胸径处(１.３ ｍ) 打 ３ 个                    型树脂酸为 ６４.３０％ꎮ 从表 １ 可以看出ꎬ含量相对
            斜向上的孔ꎬ固定 １ 个 １５ ｍＬ 离心管用于收集流                        较低的成分比含量高的变异系数普遍要高ꎮ 在含
            出的松脂ꎮ 在 ４ ｈ 后将离心管取下ꎬ立即盖上盖                          量超过 １％的成分中ꎬ变异系数最高的 ３ 个成分为
            子ꎬ为了避免因相关成分的挥发而造成影响ꎬ需尽                             水芹烯、β￣蒎烯、去氢枞酸ꎬ这说明它们有较高的选
            快对松脂进行称重ꎬ称重后置于 ４ ℃ 冰箱中ꎬ用于                          择潜力ꎮ 从树脂质量流速和胸径这 ２ 个性状可以
            松脂组分的测定ꎮ                                           看出ꎬ树脂质量流速( ＲＭＲ) 在不同无性系间的差
            １.２.２ 松脂组分分析  取大约 ０.０５ ｇ 松脂样品进                     异较大ꎬ是适合选择的指标ꎮ
            行甲酯化处理ꎬ加入无水乙醇和 ２５％ 四甲基氢氧                           ２.２ 松脂组分与相关性状的相关性分析
            化铵溶液ꎬ用酚酞作为指示剂直至液体变红ꎬ放入                                 将表 １ 中的所有性状进行相关性分析ꎬ结果如
            ＰＥ 气相色谱－质谱分析仪( Ｃｌａｉｒ ＧＣ ６８０￣ＭＳ ６００)                图 １ 所示ꎬ单萜中的主要成分 α￣蒎烯与蒈烯、水芹
            中ꎮ 色谱条件为 Ｅｌｉｔｅ￣５ＭＳ 石英毛细管柱(３０ ｍ ×                   烯呈负相关关系ꎬ而 β￣蒎烯与月桂烯、柠檬烯以及
            ０.２５ ｍｍ × ０.２５ μｍ)ꎮ 程序设定起始温度为 ６０                   单萜含量有明显的正相关关系ꎮ 在二萜类成分
            ℃ ꎬ持续 ２ ｍｉｎꎻ首先以 ５ ℃ ｍｉｎ 的速度升温至                   中ꎬ与二萜含量有关联的松脂成分为去氢枞醛、异
                                            ￣１
                                    ￣１                         海松酸、长叶松酸、左旋海松酸、去氢枞酸等ꎬ其中
            ８０ ℃ ꎬ然后以 ３０ ℃ ｍｉｎ 的速度升温到 ２３０ ℃ ꎬ
                              ￣１                               大部分属于枞酸型树脂酸ꎮ 这表明二萜含量与枞
            最后以 ５ ℃ ｍｉｎ 的速度升到 ２６０ ℃ ꎬ持续 １０
            ｍｉｎꎮ 进样条件:进样口温度为 ２５０ ℃ ꎬ进样量为 １                     酸型树脂酸的总含量具有很强的正相关性ꎬ相比
            μＬꎬ分流 比 为 ３０ ∶ １ꎬ载 气 为 高 纯 氦 气 ( １ ｍＬ            之下ꎬ与海松酸型树脂酸含量的相关性不明显ꎮ
                ￣１                                             二萜类成分总含量与单萜类物质含量之间无明显
            ｍｉｎ )ꎮ 电子电离质谱分析条件:溶剂延迟 ３ ｍｉｎꎬ
            电子能量为 ７０ ｅＶꎬ离子源温度为 ２３０ ℃ ꎬ传输线                      关联ꎮ 海松酸型树脂酸的总含量与大部分单萜成

            温度为 ２８０ ℃ ꎬ扫描质量范围为 ３５ ~ ６２０ ａｍｕꎮ                   分虽无显著的相关性ꎬ但枞酸型树脂酸的总含量
            １.２.３ 数据分析  使用气质联用仪自带的数据库                          不仅与 β￣蒎烯、柠檬烯呈显著负相关ꎬ还与水芹
            和相关文献进行松脂组分的定性分析ꎬ各组分的                              烯、草蒿脑显著正相关ꎮ
            相对含量通过峰面积归一法来计算ꎮ 用 ４ ｈ 内收                              ＲＭＲ 与单萜含量呈显著的正相关关系( 相关
            集的松脂的质量来表示树脂质量流速( ＲＭＲ)ꎮ 用                          系数为 ０.６３)ꎬ与二萜类物质的含量具有弱的负相
   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12