Page 73 - 《广西植物》2024年第7期

７ 期 周文才等: 浙江红花油茶 × 广宁红花油茶杂交子代的表型性状及其 ＳＳＲ 分子鉴定 １ ２ ７ ３

裂ꎻ苞片及萼片早期黄绿色被毛ꎬ后期淡褐色被
毛ꎬ９ ~ １０ 片ꎬ宿存ꎮ ３ 讨论与结论
２.２ 杂交子代鉴定的引物筛选
初步筛选出的 ３２ 对 ＳＳＲ 引物在双亲和 ６ 个 ３.１ 杂交子代表型分析

杂交子代( １０ 号、１２ 号、１３ 号、２８ 号、３３ 号和 ４０ 杂交育种的目的是通过杂交获得综合双亲优
号)中均可扩增ꎬ其中亲本间表现为多态性的引物 良性状的杂交子代ꎬ是当前培育油茶新品种的重
有 ２０ 对ꎬ多态性比例为 ６２.５％ꎮ 从中选择 ８ 对扩 要途径ꎮ 本研究中ꎬ我们选择浙江红花油茶 × 广
增条带清晰并呈现共显性的 ＳＳＲ 引物ꎬ用于 ４５ 株 宁红花油茶的杂交组合进行人工杂交ꎬ其中作为

杂交子代鉴定ꎬ详细引物信息见表 ２ꎮ 母本的浙江红花油茶( ＧＨＹ２６) 材料是我们团队
２.３ 杂交子代的 ＳＳＲ 分子鉴定 筛选出具有亚油酸含量高 (７.３１％)、果实产量高
￣２
通过 ８ 对 ＳＳＲ 引物对 ４５ 个 Ｆ 子代进行鉴定ꎬ (平均冠幅产量达 ２.１２ ｋｇｍ ) 等优良性状的植
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结果表明所有子代均为真子代ꎬ单对引物的杂种 株(董乐等ꎬ２０２１)ꎬ我们期望选育出具有双亲优良
鉴定效率为 ５５. ５６％ ~ １００％ ( 表 ３)ꎮ 引物 ＣＣ＿ 性状的高产油茶新品种ꎮ
ｅＳＳＲ１５２、ＣＣ＿ｅＳＳＲ１７４ 和 ＣＣ＿ｅＳＳＲ２９６ 在亲本扩 前人以浙江红花油茶作母本获得的杂交子代
增出 ２ 个等位基因ꎬ基因型为纯合互补型 ( ＡＡ × 在表型 性 状 上 更 偏 向 于 母 本 特 征ꎬ 如 王 湘 南 等
ＢＢ)ꎬ扩增出的 Ｆ 子代的基因型均为 ＡＢ 型ꎬ鉴定 (２０２０)对浙江红花油茶和滇山茶杂交得到的子代
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出 ４５ 个真杂种ꎬ鉴定效率为 １００％ꎬ对真假子代的 进行观测ꎬ发现在开花、枝叶及树体生长等表型性
鉴定 最 为 直 观 有 效ꎮ 引 物 ＣＣ ＿ ｅＳＳＲ１６２、 ＣＣ ＿ 状较大程度地遗传到母本的特征ꎮ 在花瓣数量及
ｅＳＳＲ１６５、 ＣＣ ＿ ｅＳＳＲ１７１、 ＣＣ ＿ ｅＳＳＲ２７０ 和 ＣＣ ＿ 花型上ꎬ高继银等(２０１６) 培育的浙江红花油茶与
ｅＳＳＲ２９２ 在亲本中的基因型表现为双亲互补型ꎬ其 杜鹃红山茶杂交子代同样偏向于母本ꎮ 本研究
中引 物 ＣＣ ＿ ｅＳＳＲ１６５ ( ＡＢ × ＣＣ)、 ＣＣ ＿ ｅＳＳＲ１７１ 中ꎬ我们得到的 Ｆ 杂交子代在花和叶片形态等表
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(ＡＡ × ＢＣ)、 ＣＣ ＿ ｅＳＳＲ２７０ ( ＣＣ × ＡＢ) 和 ＣＣ ＿ 型性状上与母本浙江红花油茶接近ꎬ叶片颜色、大
ｅＳＳＲ２９２ (ＡＡ × ＢＣ) 扩增出 ３ 个等位基因ꎬ引物 小等特征处于双亲特征之间ꎬ叶脉、萼片、柱头、生
ＣＣ＿ｅＳＳＲ１６２ ( ＡＢ × ＣＤ) 扩增出 ４ 个等位基因ꎮ 长势更接近父本广宁红花油茶ꎬ与前人的研究结
引物 ＣＣ＿ｅＳＳＲ１６２、ＣＣ＿ｅＳＳＲ１６５、ＣＣ＿ｅＳＳＲ１７１ 和 果有所不同ꎮ 本研究中 Ｆ 杂交子代较好地结合了
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ＣＣ＿ｅＳＳＲ２７０ 在 ４５ 个 Ｆ 子代中扩增出的带型均具 双亲的优点ꎬ并且父本广宁红花油茶对子代的表
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双亲特征带ꎬ真杂种的鉴定效率均为 １００％ꎮ 引物 型有较大影响ꎬ为今后利用父本广宁红花油茶的
ＣＣ＿ｅＳＳＲ２９２ 在 Ｆ 子代中有 ２５ 个子代扩增出基因 优点开展浙江红花油茶杂交品种选育提供了依
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型为 ＡＢ 或 ＡＣꎬ即继承了分别来自双亲(父本 ＡＡ、 据ꎮ 至于子代的果实产量和亚油酸含量等特征的
母本 ＢＣ)各 １ 个等位基因ꎬ鉴定为真杂种ꎬ其余 ２０ 倾向性还有待于后续进一步试验验证ꎮ
个样本的基因型(ＢＢ、ＣＣ) 仅继承了母本的等位基 ３.２ 杂交子代鉴定的 ＳＳＲ 引物筛选
因而未出现父本等位基因ꎬ鉴定为假子代ꎬ因此其 浙江红花油茶在表型上与同组内的广宁红花

鉴定效率为 ５５.５６％ (表 ３ꎬ图 ２)ꎮ 油茶、闪光红山茶(Ｃ. ｌｕｃｉｄｉｓｓｉｍａ)相近且在种内存
２.４ 杂交子代鉴定结果验证 在丰富的表型变异ꎬ尤其是叶片形态差异显著ꎬ仅
另外ꎬ选取 ３ 个非父本的广宁红花油茶个体 仅依据形态特征很难鉴定杂种的真实性( 温强等ꎬ
(Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３) 和 ３ 个非母本的浙江红花油茶个体 ２０１５)ꎮ 另外ꎬ由于浙江红花油茶自交不亲和ꎬ长
(Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３) 检测引物 ＣＣ＿ｅＳＳＲ２９２ 对真假子代的 期异交ꎬ遗传背景高度杂合ꎬ因此对其进行杂种鉴
鉴定结果ꎮ 由图 ３:Ａ 可知ꎬ引物 ＣＣ＿ｅＳＳＲ２９２ 扩增 定时ꎬ宜选择合适且有效的共显性标记才能避免
的真子代的基因型为杂合型ꎬ能够完美地继承父母 误判ꎮ 韩国辉等(２０１０) 认为ꎬ不同 ＳＳＲ 标记对杂

本各 １ 个等位基因ꎻ由图 ３:Ｂ 可知ꎬ引物 ＣＣ＿ｅＳＳＲ２９２ 交子代的鉴定能力不尽相同ꎬ相较于杂合型的 ＳＳＲ
扩增的非杂交子代的 ６ 个个体并未继承双亲的等位 标记ꎬ纯合型标记的鉴定效率更高ꎬ仅用一个标记
基因ꎬ而是扩增出新的等位基因ꎬ为假杂种ꎬ表明引物 就可以鉴定出所有的杂交后代ꎮ 周宁宁等(２０１７)
ＣＣ＿ｅＳＳＲ２９２ 对杂交子代的鉴定结果可靠ꎮ 根据 ＳＳＲ 标记在月季杂交子代中的鉴定能力划分