Page 117 - 《广西植物》2025年第2期
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２ 期 梁胜焕等: 大叶桉家系精油组分及抗菌活性研究 ３ １ ９
含量比干叶提取物要高几十上百倍( Ｐｉｎｔｏ ｅｔ ａｌ.ꎬ 现选择较优且样品保存效果最好的 １ 号、２ 号、３
２０２２)ꎮ 因此ꎬ大叶桉更适合采用工业常用的水蒸 号和 ４ 号共 ４ 个大叶桉家系材料进行讨论ꎮ 不同
气蒸馏法提取鲜叶精油( Ｖｅｒｄｅｇｕｅｒ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００９ꎻ 家系在各地区各区组重复中选择长势良好的 ２ 株
Ｐｕｉｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１８)ꎮ 基于以上研究ꎬ为了探讨大叶 进行采样ꎬ将大叶桉整个侧枝的叶子收集并在 １ ｈ
桉家系精油组分及抗菌活性联系ꎬ本研究采用水 内完成ꎬ各家系按照地区进行 ６ 株样品混样ꎮ 样
蒸气蒸馏法提取大叶桉鲜叶精油ꎬ通过对种植在 品取 回 后 于 试 验 室 铺 开 晾 干 表 面 水 分 后 切 碎
南宁和武宣的 ４ 个不同大叶桉家系精油组分分 装瓶ꎮ
析ꎬ并以铜绿假单胞菌( Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ)、 １.２.２ 精油提取 称取剪碎鲜叶样品约 ５００ ｇꎬ放入
金黄色葡萄球菌( Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ)、伤寒杆菌 ２ ０００ ｍＬ 圆底烧瓶中ꎬ加水至与电热套大致齐平
(Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉ) 和 大 肠 杆 菌 ( Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ) 保证加热充分ꎬ回流提取 ４ ｈꎬ精油经提取器分离
(它们被认为是主要 ＥＳＫＡＰＥ 病原菌) 作为精油抗 油水混合物ꎬ分离出的精油用足量无水硫酸钠脱
菌试验研究对象ꎬ分析家系精油组分、家系精油组 水干燥ꎬ得到精油样品保存ꎮ
分与抗菌能力的联系ꎬ以期为桉树的选优选育及 １.２.３ 精油成分含量检测 精油含量计算采用气
在香料和医药应用方面提供理论依据ꎮ 相色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分比
含量ꎻ精油成分鉴定采用 Ｎ１ＳＴ 标准谱库检索及人
１ 材料与方法 工解析完成精油组分定性分析ꎬ试验方法及仪器
条件参考梁忠云等(２０１４)的精油组分鉴定ꎮ
１.１ 试验地概况 １.２. ３. １ 气 相 色 谱 － 质 谱 定 性 分 析 条 件 美 国
大叶桉家系试验林建于 ２０１９ 年 ６ 月ꎬ以海拔 Ｂｒｕｋｅｒ 公司 ＴＱ４５６ 气质联用仪ꎬ弹性石英毛细管
高度为影响因素布置随机区组试验ꎬ高度极差小 柱 ＢＲ￣５(３０ ｍ × ０.２５ ｍｍ × ０.２５ μｍ)ꎬ载气为高
于 １０ ｍꎬ试验设置 ３ 个区组ꎬ各区组包含 １８ 个大 纯氦气(９９.９９％)ꎬ进样量 １ μＬꎬ分流比 １︰１０ꎮ 质
叶桉家系ꎬ各家系小区内重复数 ４ꎬ造林密度为 谱条件:ＥＩ 离子源ꎬ电离电压 ７０ ｅＶꎬ扫描范围 ４５ ~
２ ｍ × ３ ｍꎮ 广西南宁市良凤江和广西武宣县六峰 ３５０ ａｍｕꎬ全扫描方式ꎮ 溶剂延迟 ２ ｍｉｎꎮ 进样量 １
山样地信息如表 １ 所示ꎮ μＬ(５％乙醇溶液)ꎮ 程序升温:７０ ℃ 保持 ５ ｍｉｎꎬ
￣１
以 ２ ℃ ｍｉｎ 升至 １５０ ℃ ꎬ停留 ５ ｍｉｎꎬ以 １０ ℃
表 １ 南宁和武宣样地气候信息概况 ｍｉｎ 升至 ２３０ ℃ ꎬ保持 ５ ｍｉｎꎮ
￣１
Ｔａｂｌｅ １ Ｃｌｉｍａｔｅ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｍｐｌｉｎｇ １.２.３.２ 气相色谱定量分析条件 Ａｇｉｌｅｎｔ ７８９０Ａ 气
ｓｉｔｅｓ ｉｎ Ｎａｎｎｉｎｇ ａｎｄ Ｗｕｘｕａｎ
相色谱仪ꎮ 弹性石英毛细管柱 Ｒｔｘ￣５(３０ ｍ × ０.２５
年均 ｍｍ × ０.２５ μｍ)ꎬ载气为氮气ꎬ程序升温:７０ ℃ 保持
年均气温
降水量
￣１
海拔 Ｍｅａｎ Ｍｅａｎ ５ ｍｉｎꎬ先以 ２ ℃ｍｉｎ 升至 １５０ ℃ꎬ停留 ５ ｍｉｎꎬ再
地点 纬度 经度 ａｎｎｕａｌ
Ａｌｔｉｔｕｄｅ ａｎｎｕａｌ ￣１
Ｌｏｃａｔｉｏｎ Ｌａｔｉｔｕｄｅ Ｌｏｎｇｉｔｕｄｅ ｔｅｍｐｅｒａ￣ 以 １０ ℃ｍｉｎ 升 ２３０ ℃ꎬ停留 １０ ｍｉｎꎬ进样口 ２５０
(ｍ) ｐｒｅｃｉｐｉ￣
ｔｕｒｅ
ｔａｔｉｏｎ
(℃) ℃ꎬ汽化室 ２５０ ℃ꎬ分流比 １︰５０ꎬ进样量 ０.３ μＬꎮ
(ｍｍ)
１.２.４ 抗菌活性测定 抗菌试验对象选择依据ꎬ如
南宁 ２２°３６′４９″ Ｎ １０８°１７′４６″ Ｅ １７６ ２１.７ １ ３０４.２
表 ２ 所示ꎮ 将不同试验菌菌液浓度调至 ０.５ 麦氏
Ｎａｎｎｉｎｇ
武宣 ２３°４５′２３″ Ｎ １０９°４２′１７″ Ｅ ２１７ ２１.２ １ ２９１.７ 标准浓度ꎬ用无菌棉签蘸取菌液ꎬ并在上端管壁旋
Ｗｕｘｕａｎ
转挤压几次ꎬ去掉过多的菌液ꎬ涂布整个琼脂平皿
表面ꎬ反复涂布几次ꎬ每次将平皿旋转 ６０ 度ꎬ保证
１.２ 试验设计 涂布均匀ꎮ 接种平板后ꎬ贴上每片滴加 ６ μＬ 样品
１.２.１ 样品采集 试验地广西南宁市、广西武宣县 溶液的药敏纸片ꎬ用镊子压纸片使其与培养基表
(以下分 别 简 称 南 宁、 武 宣) 的 采 样 时 间 分 别 为 面贴牢ꎬ并用浸泡于生理盐水的纸片做阴性对照ꎬ
２０２３ 年 ９ 月 １１ 日和 ２０２３ 年 ９ 月 ２０ 日ꎬ采样当天 金黄色葡萄球菌用青霉素药敏纸片做阳性对照ꎬ
南宁气温 ２６ ℃ ꎬ中雨ꎻ武宣气温 ３３ ℃ ꎬ天气晴朗ꎮ 大肠杆菌、铜绿假单胞杆菌、伤寒杆菌用链霉素药
为满足组分鉴定和抗菌试验需求ꎬ根据各生长表 敏纸片做阳性对照ꎮ 贴上纸片于 １５ ｍｉｎ 内ꎬ把平
