Page 137 - 《广西植物》2025年第2期

２ 期 范晶钰等: 西南手参醇提取物的体外抗氧化和体外抗肿瘤活性评价 ３ ３ ９

肿瘤细胞的增殖及转移与氧化应激有关(Ｊｉａｏ ｅｔ ａｌ.ꎬ 次以上操作ꎮ 将滤液旋转蒸发浓缩ꎬ经冷冻干燥
２０１６)ꎮ 手参醇提物(何侃亮等ꎬ２０１７) 及其成分天 得到西南手参醇提物干燥粉末ꎬ存放于 ４ ℃ 下备
麻素(Ａｈｍａｄ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１９) 均具有良好的抗氧化能 用(何侃亮等ꎬ２０１７)ꎮ
力ꎬ但是否能够通过其抗氧化功能抑制肿瘤细胞增 １.２.２ 西南手参醇提取物中天麻素含量的测定

殖还有待进一步考证ꎮ 精密称取西南手掌参醇提取物粉末 １ ｇꎬ加入
药用植物的活性成分受生长环境影响较大ꎬ ５０％的甲醇定容至 １０ ｍＬꎬ过 ０.４５ μｍ 滤膜ꎬ即得
不同产地的植物成分和药效均具有较大的差异 样品溶液ꎬ采用液相色谱测定天麻素含量ꎮ
(Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１８)ꎮ 四川省甘孜藏族自治州九龙 １.２.２.１ 色谱条件 色谱柱:Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ (４.６ ｍｍ ×
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县位于四川省西南部的横断山区ꎬ植物资源十分 ２５０ ｍｍꎬ５ μｍ)ꎻ流 动 相:甲 醇 ０. １％ 磷 酸 水 溶 液
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丰富(余有德等ꎬ１９８９)ꎬ过去由于地理位置偏僻ꎬ (５︰９５)ꎻ流速:０.８ ｍＬｍｉｎ ꎻ检测波长:２２０ ｎｍꎻ
加上交通十分不便ꎬ其植物资源尤其是药用植物 柱温:３０ ℃ ꎻ进样量:１０ μＬ( 吴燕等ꎬ２０１７ꎻ郑振兴

资源的研究基础较为薄弱ꎮ 本课题组调查发现ꎬ 等ꎬ２０２０)ꎮ
九龙县高寒草甸和灌丛西南手参分布广泛ꎬ当地 １.２.２.２ 线性关系考察 精密量取天麻素标品ꎬ用
居民常常将其块茎用于滋补药材ꎮ 然而ꎬ目前尚 甲醇 准 确 配 置 成 浓 度 为 ０. ０３０、 ０. ０７０、 ０. １４０、
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不清楚九龙产西南手参块茎天然产物中是否含有 ０.２１０、０.２８０、０.３５０、０.４２０ ｍｇｍＬ 的系列标品溶
天麻素ꎬ是否具有抗氧化活性物质和抗肿瘤活性 液ꎬ取各标品溶液进样 １０ μＬꎬ记录峰面积ꎮ 以进
物质ꎮ 基于此ꎬ本研究以九龙县产西南手参块茎 样量(μｇ)为横坐标( Ｘ)ꎬ峰面积为纵坐标( Ｙ)ꎬ得
为研究对象ꎬ在测定其块茎醇提物中天麻素含量 天麻素的回归方程ꎮ
的基础上ꎬ评估西南手参醇提物和天麻素的抗氧 １.２.３ 西南手参醇提取物体外抗氧化活性测定
化活性ꎬ并进一步采用 ＭＴＴ 法研究西南手参醇提 １.２.３.１ 羟基自由基清除能力的测定 精确配制浓
物对人肝癌细胞、人胃癌细胞、人乳腺癌细胞和人 度为 ０.５、１、２ ｍｇｍＬ 的西南手参醇提物溶液ꎬ将
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胶质瘤细胞增殖的抑制效应ꎬ以期筛选出对西南 ９ ｍｍｏｌＬ ＦｅＳＯ 溶液、９ ｍｍｏｌＬ 水杨酸－乙醇
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手参醇提物敏感的肿瘤细胞ꎬ为西南手参醇提物 溶液、１０ ｍｍｏｌＬ Ｈ Ｏ 溶液各 ２ ｍＬ 与各组待测
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抗肿瘤活性物质的分离、抗肿瘤机制的深入研究 西南 手 参 醇 提 物 溶 液 混 合ꎬ 在 ３７ ℃ 下 水 浴 ３０
奠定基础ꎬ进而为九龙县产西南手参资源的开发 ｍｉｎꎬ运用 ＭＤ / ＳｐｅｃｔｒａＭａｘＭ２ 多功能细胞分析仪在
利用提供科学依据ꎮ ５１０ ｎｍ 处分别测其吸光度ꎮ 以维生素 Ｃ 作为阳性
对照ꎮ 每个处理重复 ３ 次ꎮ 羟基自由基清除率计
１ 材料与方法 算公式(Ｈｕｓａｉｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ １９８７):

羟基自由基清除率(％) ＝ [１－( Ａ 样品 －Ａ 对照 ) /
１.１ 材料 Ａ 空白 ] ×１００ (１)
供试西南手参块茎购自四川省甘孜藏族自治 式中: Ａ 样品 为实验组吸光度ꎻＡ 对照 为用蒸馏水
州九龙县中药材市场ꎬ经四川师范大学马丹炜教 代替水杨酸的吸光度ꎬ按上述方法测定的吸光度ꎻ

授鉴定为西南手参(Ｇｙｍｎａｄｅｎｉａ ｏｒｄｎｉｄｉｓ)ꎮ Ａ 空白 为用蒸馏水代替待测样品溶液ꎬ按上述方法测
人肝癌 ＳＭＭＣ￣７７２１ 细 胞 和 ＨｅｐＧ￣２ 细 胞、人 定的吸光度ꎮ
胃癌 ＢＧＣ￣８２３ 细 胞 和 ＭＫＮ￣４５ 细 胞、 人 乳 腺 癌 １.２.３.２ ＤＰＰＨ 自由基清除能力的测定 分别取 ２
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ＭＤＡ￣ＭＢ￣２３１ 细胞均来自中国科学院上海生物化 ｍＬ 浓度为 ０.５、１、２ ｍｇｍＬ 的西南手参醇提物溶
学与细胞生物学研究所ꎮ 人胶质瘤 Ｕ２５１ 细胞购 液ꎬ加入 ０.０５ ｍｇｍＬ ＤＰＰＨ 乙醇溶液 ２ ｍＬꎬ充
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分混匀后ꎬ室温避光静置 ３０ ｍｉｎꎬ于 ５１７ ｎｍ 处分
自中国科学院昆明细胞库ꎮ
１.２ 方法 别测吸光度ꎮ 以维生素 Ｃ 作为阳性对照ꎮ 每个处
１.２.１ 西南手参醇提取物的制备 理 重 复 ３ 次ꎮ ＤＰＰＨ 自 由 基 清 除 率 计 算 公 式
先将 干 燥 的 西 南 手 参 块 茎 粉 碎 过 筛 后ꎬ 按 (Ｖｉｌｌａñｏ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００７):
１︰２０(Ｖ / Ｖ)料液比加入 ７５％乙醇溶液ꎬ３０ ℃ 振荡 ＤＰＰＨ 自由基清除率(％) ＝ [１－(Ａ 样品 －Ａ 对照 ) /
２ ｈꎬ再热回流提取 ２ ｈ 后ꎬ过滤得到滤液ꎬ重复 ２ Ａ 空白 ] ×１００ (２)