Page 148 - 《广西植物》2025年第2期
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3 5 0                                  广  西  植  物                                         45 卷
            用 25 μL 的 反 应 体 系:2X Master Mix 12. 5 μLꎬ          Hub 值均为 0.29ꎬ高于其他真菌的 Hub 值ꎬ说明它
            ddH O 9.9 μLꎬ上 游 引 物 0. 8 μLꎬ下 游 引 物 0. 8          们在网络中属于核心真菌( 图 4:B)ꎮ 共现网络
                2
            μLꎬ模 板 1 μLꎮ PCR 扩 增 体 系:95 ℃ 预 变 性 5              (图 4:C)由 40 个节点 151 条边组成ꎬ节点平均度
            minꎬ94 ℃ 变性 30 sꎬ54 ℃ 退火 30 sꎬ 72 ℃ 延伸             为 7.415ꎬ平均加权度为 22.20ꎬ网络直径为 6ꎬ图密
            60 sꎬ 重复 35 次ꎬ72 ℃ 延伸 10 minꎮ PCR 产物               度为 0.185ꎬ平均聚类系数为 0.883ꎬ平均路径长度
            使用 1.0% 琼脂糖凝胶电泳检测其质量ꎬ并送至                           为1.849ꎬ模块化指数为 0.466ꎬ具有模块化结构ꎬ
            生工生物工程( 上海) 股份有限公司进行测序ꎬ测                           正相关边数占比为 99.33%ꎮ 综上结果表明ꎬ网络

            序结果 进 行 BLAST 序 列 比 对ꎬ 利 用 软 件 MEGA                中的大多数真菌趋向于正向强化其相互间的合
            11.0 进行多重序列比对ꎬ利用最大似然法构建真                           作ꎬ并且具有较强的对抗外界干扰的能力ꎬ山药腐

            菌 ITS ̄rDNA 系统发育树ꎮ                                  烂块茎中真菌的生态功能类群很可能趋向于集中
                                                               和强化ꎮ
            2  结果与分析                                           2.2 腐烂山药块茎真菌 FUNGuild 功能类群预测
                                                                   为进一步明确腐烂块茎中真菌的生态功能类
            2.1 腐烂山药块茎中真菌群落结构分析                                群ꎬ利用 FUNGuild 数据库对山药腐烂块茎中的真
                 利用 Illumina 平台对样品进行真菌 ITS1 区进                 菌营养类群进行分析ꎮ 结果( 图 5:A) 表明ꎬ腐烂
            行扩增子测序ꎬ共获得 382 426 条有效序列ꎮ 对样                       块茎 中 共 有 7 种 营 养 类 型ꎬ 包 括 病 理 营 养 型
            品序列随机抽样 5 次进行稀释曲线分析ꎬ结果显                            (8.26%) 和病理复合营养型 [ 病理 -共生营养型
            示ꎬ在此测序深度下ꎬ不同样品中真菌物种的稀释                             (23.64%)、病理-腐生营养型(5.99%)、病理 -腐
            曲线已趋于平稳( 图 2)ꎬ覆盖率均在 99.9%以上ꎬ                       生-共生营养型(15.57%)] 共占比 53.46%ꎬ以及
            说明此测序深度足以反映山药腐烂组织样品中的                              腐生营养型(37.15%)、共生营养型(0.48%)、腐
            真菌群落信息ꎮ                                            生-共生营养型(1.06%)ꎮ
                 对真菌群落结构进行进一步分析ꎬ在门水平上                              FUNGuild 生态功能分类结果显示ꎬ除未定功
            (图 3:A)ꎬ子囊菌门(Ascomycota) 是腐烂块茎中的                   能的类群外ꎬ腐烂块茎中共有 37 种功能类群ꎬ 包
            绝对 优 势 菌 门ꎬ 相 对 丰 度 为 91. 74%ꎻ 担 子 菌 门             含丰度超过 1%类群 10 个( 图 5:B)ꎮ 其中ꎬ粪腐
            (Basidiomycota)、罗兹菌门(Rozellomycota)、被孢菌            生-未命名腐生-木腐菌类群(32.59%) 对应的真
            门( Mortierellomycota)、壶菌门( Chytridiomycota) 和      菌仅有青霉属ꎻ内生-植物病原类群(23.64%) 对
            球囊菌门(Glomeromycota)含量较低ꎬ其相对丰度分                     应的真菌主要有炭疽菌属、织球壳属等ꎻ动物病
            别为 1.77%、1.36%、0.86%、0.41%和 0.02%ꎮ 在属              原-内生-真菌寄生-地衣寄生-植物病原-木腐菌
            水平上(图 3:B)ꎬ相对丰度较高的真菌为青霉属                           类群(5.48%)、动物病原-内生-地衣寄生-植物病
            (Penicilliumꎬ 32.65% )、 炭 疽 菌 属 ( Colletotrichumꎬ  原-土壤腐生-木腐菌类群(4.24%) 和动物病原-
            16.16%)、 镰 刀 菌 属 ( 8. 13%)、 织 球 壳 属 ( Plectos ̄     内生-植物病原-木腐菌类群(3.95%) 对应的真菌
            phaerellaꎬ7.30%)、棘壳孢属(Setophomaꎬ5.14%)、帚枝          主要是镰刀菌属ꎻ动物病原类群(5.70%) 对应的

            霉属(Sarocladiumꎬ4.57%)、假丝酵母属(Fusicollaꎬ             真菌主要是帚枝霉属ꎻ真菌寄生-植物病原-植物
            2.94%)、 丛 赤 壳 科 未 分 类 属 ( un        Nectriaceaeꎬ   腐生(5.69%) 对应的真菌仅有棘壳孢属ꎻ未知腐
            2.53%)、枝顶孢属(Acremoniumꎬ1.76%)、篮状菌属                 生菌类群(3.75%) 对应的真菌主要是篮状菌属ꎻ
            ( Talaromycesꎬ 1. 05%) 和 粉 红 螺 旋 聚 孢 霉             植物病原类群(2.60%) 对应的真菌主要有粉红螺

            (Clonostachysꎬ1.01%)等ꎮ                             旋聚孢霉、葡萄座腔菌属( Botryosphaeria) 和椿启
                 利用 R 包( igraph) 构建随机网络和共现网络                   介菌属( Tubakia) 等ꎻ动物病原-内生-寄生-植物
            节点度分布图ꎬ结果表明ꎬ随机网络节点分布符合                             病原-木腐菌类群(1.57%) 对应的真菌仅有枝顶

            泊松分布ꎬ共现网络节点分布服从幂律( 图 4:A)ꎬ                         孢属ꎮ 因此ꎬ病原或腐生相关的真菌生态功能类
            即少数的节点往往拥有大量的连接ꎬ共现网络构                              群在山药块茎腐烂中扮演重要的角色ꎮ
            建合理(林润辉和季泽ꎬ2024)ꎮ 篮状菌属、粉红螺                             Trait 致病特征分析结果显示ꎬ腐烂块茎真菌
            旋聚孢霉和假散囊菌属( Pseudeurotium) 等真菌的                    生态功能类群中的一些成员可引起植物软腐病ꎬ
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