Page 161 - 《广西植物》2025年第2期
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2 期                          李可铖等: 三七开花生物学与繁育系统研究                                           3 6 3

            滴入 2 滴 0.5%的 TTC 溶液ꎬ用镊子搅拌均匀ꎬ盖                      检测三七是否依赖虫媒传粉ꎻ去雄套纸袋ꎬ检测三
            上盖玻片ꎬ于 25 ~ 28 ℃ 下放置 15 ~ 20 minꎬ在光学               七是否存在无融合生殖现象ꎻ去雄套网袋ꎬ检测三
            显微镜下观察 5 个不同视野ꎬ被染成红色的为具                            七是否依赖风媒传粉ꎻ同株异花授粉ꎬ将三七同一

            有活力的花粉粒ꎮ                                           植株的部分单花的雄蕊保留ꎬ剩下的去掉雄蕊ꎬ当
            1.4.4 醋酸洋红染色法  取 30 朵单花ꎬ将每朵单花                      柱头开裂时ꎬ用同株保留雄蕊的花粉授于同株去
            的花药放在载玻片上ꎬ用解剖针将三七花粉外壁                              雄的单花柱头上ꎬ再套上纸袋ꎻ异株异花授粉ꎮ 授
            破开ꎬ并滴入 2 滴醋酸洋红溶液ꎬ用镊子搅拌均                            粉后 1 个月后计算各处理结实率ꎮ
            匀ꎬ盖上盖玻片ꎬ片刻后在光学显微镜下观察 5 个                           1.7 访花昆虫的观测

            不同视野ꎬ有活力的花粉被染成红色ꎮ                                      三七花的盛花期内于试验基地随机划定 3 个
            1.4.5 过氧化物酶法  配制试剂 Iꎬ即 0.5% 联苯                     3 m × 3 m 的 样 方ꎬ 选 择 晴 朗 的 天 气 于 7:00—
            胺、0.5%α ̄萘酚和 0.25%碳酸钠各 10 mL 混合均                    19:00对访花昆虫进行连续 3 d 的观察ꎬ记录样方
            匀ꎮ 取 30 朵单花ꎬ将每朵单花的花药放在载玻片                          内的访花昆虫数量、种类和访花行为ꎬ同时ꎬ捕捉
            上ꎬ用解剖针将三七花粉外壁破开ꎬ加试剂 I 和                            样方内访花昆虫ꎬ放入乙醇ꎬ进行保存( 杨润等ꎬ
            0.3%过氧化氢各 1 滴ꎬ搅匀后盖上盖玻片ꎬ将制片                         2023)ꎮ 访花昆虫种类由云南农业大学郭雨龙教
            放置于 30 ℃ 恒温箱中 10 minꎬ之后置于显微镜下                      授鉴定ꎮ
            观察 5 个不同视野ꎬ统计被染为红色的花粉数量ꎮ                           1.8 数据统计
                 采用联苯胺-过氧化氢法测定三七花的柱头                               采用 IBM SPSS Statistics 19.0 进行数据处理ꎬ
            可授性ꎬ在开花前 3 天至开花第 24 天ꎬ每天取 30                       用 Adobe Photoshop 2018 和 Graphpad Prism 8 进行
            朵单花进行试验ꎬ用镊子将柱头取下ꎬ放在凹面载                             作图ꎮ
            玻片上ꎬ滴入 2 滴联苯胺-过氧化氢溶液(1%联苯
            胺溶液 ∶ 3%过氧化氢溶液 ∶ 水 = 4 ∶ 11 ∶ 22ꎬV / V /           2  结果与分析
            V)ꎬ静置 30 sꎬ若柱头周围有气泡产生ꎬ则证明柱
            头具有活性ꎬ气泡越多ꎬ柱头可授性越强ꎬ反之不                             2.1 单花开放动态
            产生气泡ꎬ柱头无活性(段绍凤等ꎬ2021)ꎮ                                 由图 1 可知ꎬ三七单花花期持续 4 ~ 5 dꎬ经历 4
            1.5 花 粉 / 胚 珠 比 ( P / O ) 值 与 杂 交 指 数 ( out ̄       个时期ꎬ即现蕾期、始花期、盛花期、凋零期ꎮ ① 现
            crossing indexꎬ OCI)估算                             蕾期(图 1:A、B):花瓣紧紧包裹花药ꎬ花丝卷曲尚
                 参考余成华等(2021) 的方法估算三七花的                        未伸展ꎬ雌雄蕊未发育ꎮ ② 始花期( 图 1:C、D):
            P / O 值ꎬ在样区内随机选择单花ꎬ以 5 朵花为一                        始花期约 0.5 ~ 1 dꎬ花丝伸展ꎬ花瓣展开至 45°ꎬ花
            组ꎬ用 镊 子 取 出 其 全 部 花 药ꎬ 并 滴 1 ~ 2 滴 1. 0            药呈淡黄色ꎬ可见其上浅沟ꎮ ③ 盛花期( 图 1:E、
                    ̄1                                          F):盛花期需要 1 ~ 2 dꎬ花瓣完全展开ꎬ花丝进一
            molL HCl 进行软化ꎬ随后将花药全部装到 1.5
            mL 的离心管中ꎬ用蒸馏水定容ꎬ摇匀ꎬ通过血球计                           步伸长ꎬ个花药依次纵裂ꎬ开始散粉ꎬ花粉呈现白
            数板计算花粉数量ꎬ重复 3 次ꎮ 纵向解剖小花观                           色或淡黄色ꎬ花内花药明显高于柱头ꎬ存在明显的

            测胚珠数ꎮ 单花的花粉总量除以胚珠数ꎬ得到P / O                         空间分离ꎬ柱头开始伸长ꎮ ④ 凋零期(图 1:G-I):
            值ꎮ 按照 Cruden 和 Herman ̄Parker(1977) 的标准             凋零期 2 ~ 3 dꎬ花瓣和雄蕊开始松动ꎬ依次脱落ꎬ柱
            评价三七的繁育系统类型ꎬ杂交指数( OCI) 按照                          头快速伸长ꎬ开裂成“ Y” 字形ꎬ并有黏液分泌ꎬ单

            Dafni(1994)的标准进行测定ꎮ                                花的花期结束ꎮ 进入子房膨大期( 图 1:J-L)ꎬ柱
            1.6 控制性授粉实验                                        头进一步开裂成羊角状ꎬ子房膨大ꎬ颜色由浅绿色
                 参照杨润等(2022)的方法ꎬ随机选择 30 株未                     变成深绿色ꎬ色泽暗淡ꎬ随后胚珠不断发育ꎮ
            开花且长势良好的三七作为一个处理ꎬ对其进行                              2.2 花序开放动态
            疏花(去掉上部与底部不能结实的花朵)ꎬ使每株                                 由图 2 可 知ꎬ三 七 花 属 于 伞 形 花 序ꎬ单 独 顶
            花序上保持约 100 朵花ꎬ之后进行以下处理:自然                          生ꎮ 花序在 6 月下旬进入现蕾期ꎬ8 月中旬进入盛
            授粉ꎬ以疏花后自然生长的植株作为对照ꎻ套纸                              花期ꎮ 由图 3 可知ꎬ花序上单花数量为 50 ~ 300 朵
            袋ꎬ测定三七是否可以进行自发自交ꎻ去掉雄蕊ꎬ                             不等ꎬ花序花期可持续 20 ~ 25 dꎮ 由花序每天开放
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