Page 160 - 《广西植物》2025年第2期
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3 6 2                                  广  西  植  物                                         45 卷
            是我国的名贵中药材ꎬ主要分布在海 拔 1 500 ~                         南农业大学杨生超教授鉴定为 3 年生三七( Panax
            1 800 m 北纬 25°的西南部特殊地区( 李满桥等ꎬ                      notoginseng)ꎮ
            2022)ꎬ云南文山是三七的道地主产区ꎮ 三七具有                          1.2 开花物候观测
            止血化瘀、活血养血的双向调节功能ꎬ 自古就有                                 2022 年和 2023 年的 7—9 月ꎬ在样区内随机

            “南国神草” 和“ 金不换” 的美称( 张丹等ꎬ2020)ꎮ                     选择现蕾期 50 株未开花的健壮三七植株并进行
            在降血脂、降血压、抗衰老、抗疲劳等方面有显著                             挂牌标记ꎬ从每株开第一朵花开始定点观测ꎬ记录

            效果(蔡琳和彭鹏ꎬ2021)ꎬ具有重要的经济价值ꎮ                          每天每株的开花量ꎬ花部形态变化ꎬ散粉时间ꎬ拍
            仅 2023 年 1—9 月ꎬ文山州以三七为主的生物医药                       照记录ꎬ参考杨秋雄等(2021) 的方法ꎬ计算其物候

            产业综合总产值达 285.28 亿元ꎮ                                期ꎮ 利用 0 ~ 200 mm 游标卡尺( DL91200) 测量不
                 长期的掠夺性采挖ꎬ导致野生资源灭绝ꎬ人工                          同开放天数下雌雄蕊的长度与花部形态特征值ꎮ

            栽培成为三七药材的唯一来源(夏鹏国等ꎬ2012)ꎮ                          1.3 花粉粒扫描电镜观测
            良种的选育和推广ꎬ对于栽培三七产量和品质提高                                 在盛花期收集三七花粉ꎬ并用卡诺固定液进
            具有重要意义ꎮ 近年来ꎬ三七的研究集中在人参皂                            行固定ꎬ将固定好的样品先用 0.1 molL 磷酸缓
                                                                                                      ̄1
            苷、三七素等药用成分的合成路径与药理机制方                              冲液 PB(pH 7.4)进行漂洗ꎬ再用 0.1 molL 磷酸
                                                                                                        ̄1
            面ꎬ关于三七开花生物学与繁育系统的研究较少ꎮ                             缓冲液 PB 漂洗ꎬ配制 1%锇酸ꎬ室温避光固定 1 ~ 2
                                                                                ̄1
            孙玉琴等(2003) 发现ꎬ三七开花高峰期集中在 7:                        h 后用 0.1 molL 磷酸缓冲液 PB 进行漂洗ꎬ之后
            00—10:00ꎬ散粉高峰期在 10:00—14:00ꎮ 温湿度                   向组织中依次加入 30% ~ 100%酒精ꎬ浓度以 10%
            对三七开花具有重要影响ꎬ开花最适宜的温度为                              等浓度依次升高ꎬ每次 15 minꎬ脱水充分后ꎬ乙酸
            20~27 ℃ꎬ湿度为 80% ~90%ꎮ 三七花开放 2 h 后花                 异戊酯处理 15 minꎮ 将样本紧贴于导电碳膜双面
            粉活力最高ꎬ在开放第 6 天开始出现柱头可授性                            胶上ꎬ放入离子溅射仪样品台上进行喷金 30 sꎮ 取
            (孙玉琴等ꎬ2009)ꎬ在低温下的花粉活力保持时间                          30 个花粉粒用 FEIQUANTA200 扫描电子显微镜
            较长(王定康等ꎬ2007)ꎬ贮藏 20 d 后才完全丧失萌                      观察拍照ꎬ对花粉粒形态、花粉大小、极轴长、赤道
            发力ꎮ 花粉的传粉距离应大于等于 4.5 mꎬ 传粉距                        轴长、花粉纹饰等孢粉学特征进行观察与测定ꎮ
            离与天气和传粉昆虫密切相关(杨莉等ꎬ2012)ꎮ                           1.4 花粉活力与柱头可授性的测定
                 三七以种子繁殖ꎬ与农作物相比ꎬ结实率低ꎬ                              采用 5 种不同花粉染色试剂进行染色实验ꎬ即
            仅在 50%左右( 王艳芳等ꎬ2013)ꎮ 繁殖率低是限                       分别用 1%碘-碘化钾(I  ̄KI)、1%二苯基四氮唑溴
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            制三七良种选育和扩繁的主要因素ꎮ 目前ꎬ三七                             盐(MTT)、1%氯化三苯基四氮唑(TTC)、醋酸洋红
            的开花生物学和繁育系统缺乏系统性研究ꎬ其有                              染色液以及过氧化物酶法染色剂进行测定比较ꎬ
            性生殖的基本特征尚不清晰ꎮ 因此ꎬ本文通过对                             筛选测定三七花粉活力的最适方法ꎬ测定三七开
            开花生物学、繁育系统特征及传粉生物学研究ꎬ拟                             花前 2 天至开花第 3 天的花粉活力及开花当天花
            解决以下问题:(1) 阐明三七有性繁育特征ꎻ(2)                          粉活力的变化ꎮ
            明确三七的繁育系统类型与繁殖保障策略ꎻ(3) 揭                           1.4.1 I  ̄KI 染色法  取 30 朵单花ꎬ将每朵单花的
                                                                     2
            示三七自然状态下结实率低的原因ꎮ                                   花药放在载玻片上ꎬ用解剖针将三七花粉外壁破
                                                               开ꎬ加 1 滴水ꎬ使花粉散开ꎬ再加 1 滴 I  ̄KI 溶液ꎬ
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            1  材料与方法                                           盖上盖玻片ꎬ置于光学显微镜下观察 5 个不同视
                                                               野并计数被染成蓝色的花粉粒ꎮ
            1.1 试验地点和材料                                        1.4.2 MTT 染色法  取 30 朵单花ꎬ将每朵单花的
                 试验于 2022 年和 2023 年的 7 月下旬至 9 月                花药放在载玻片上ꎬ用解剖针将三七花粉外壁破
            下旬进行ꎬ地点位于云南省文山壮族苗族自治州                              开ꎬ并滴入 2 滴 1%的 MTT 染色液ꎬ用镊子搅拌均
            丘北县树皮乡小新寨村ꎬ海拔 1 606 mꎬ气候属于                         匀ꎬ盖上盖玻片ꎬ片刻后在光学显微镜下观察 5 个
            亚热带季风气候ꎬ冬无严寒ꎬ夏无酷暑ꎬ年平均气                             不同视野ꎬ有活力的花粉被染成蓝色ꎮ
            温 19 ℃ ꎬ降雨充沛ꎬ年均降水量为 779 mmꎬ富含                      1.4.3 TTC 染色法  取 30 朵单花ꎬ将每朵单花的花
            有机质的腐殖土ꎬ肥水均匀ꎬ管理措施一致ꎮ 经云                            药放在载玻片上ꎬ用解剖针将三七花粉外壁破开ꎬ
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