Page 177 - 《广西植物》2025年第2期

２ 期 顾元钦等: 丛枝菌根真菌对穿心莲生长及有效成分的影响 ３ ７ ９

长状况和有效成分积累的影响ꎬ以及接种后不同 １.３ 实验设计
天数穿心莲相关指标动态变化规律及其作用机制 穿心莲种子经蒸馏水清洗去除杂质后ꎬ浸泡
尚未见相关报道ꎮ ２４ ｈꎬ播种前用 ７５％乙醇消毒 ３０ ｓꎬ１２％次氯酸钠
本研究采用上述 ２ 种 ＡＭＦ 侵染穿心莲植株ꎬ 消毒 ２０ ｍｉｎꎬ无菌水冲洗 ４ 次ꎬ备用ꎻ育苗栽培基
通过测定不同生长天数下穿心莲植株的生长指 质为 蛭 石、 珍 珠 岩 和 泥 炭 土 的 混 合 物 ( 体 积 比
标、丙二醛(ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅꎬＭＤＡ)含量、抗氧化酶 １ ∶ １ ∶ ３ꎬ过 ２ ｍｍ 筛)ꎬ１２１ ℃ 高压灭菌 ２ ｈꎬ晾凉
活性、根系活力、有效成分含量变化等指标ꎬ拟探 备用ꎮ
讨以下问题:(１) 接种 ＡＭＦ 对穿心莲植株生长及 将穿心莲种子播种于穴盘ꎬ每穴 ２ ~ ３ 粒ꎬ待穿
根系形态的影响ꎻ(２) 接种 ＡＭＦ 对穿心莲植株抗 心莲长至 ４ 片真叶时进行移栽接种ꎮ 盆栽实验共
氧化酶活性及根系活力的影响ꎻ(３) 接种 ＡＭＦ 对 设 ３ 个组:不接种任何 ＡＭＦ 的对照组( ＣＫ 组ꎬＣＫ
ｇｒｏｕｐ)、 接 种 摩 西 斗 管 囊 霉 组 ( Ｆｕｎｎｅｌｉｆｏｒｍｉｓ
穿心莲植株有效成分含量的影响ꎻ(４) 哪种 ＡＭＦ
与穿心莲植株共生作用较好ꎮ 本研究结果旨在阐 ｍｏｓｓｅａｅｓ ｇｒｏｕｐꎬＦＭ 组)、接 种 地 表 多 样 孢 囊 霉 组
明 ＡＭＦ 对穿心莲促生作用的机制ꎬ以期为 ＡＭＦ 运 (Ｄｉｖｅｒｓｉｓｐｏｒａ ｖｅｒｓｉｆｏｒｍｉｓ ｇｒｕｏｕｐꎬ ＤＶ 组)ꎮ 每 盆 种
植 １ 株穿心莲ꎬ每组 ９ 个重复ꎬ随机排列ꎬ共 ２７ 盆ꎬ
用于穿心莲绿色生态栽培提供试验和理论依据ꎮ
每盆接种 １０ ｇ 菌剂ꎬ对照组加入等量灭菌基质ꎮ
１ 材料与方法 采用高 １９ ｃｍ、盆口直径为 １９.５ ｃｍ、盆底直径为
１４.８ ｃｍ 的花盆ꎬ经 ７５％酒精擦拭消毒后ꎬ装入灭

１.１ 供试种子与菌剂 菌基质至顶部ꎬ用灭菌玻棒在中央挖一个 ６ ~ ７ ｃｍ
深的孔ꎮ 取长势一致的穿心莲幼苗ꎬ由上而下淋
穿心莲种子购自广西壮族自治区玉林市兴业
水使其根贴在一起ꎬ将菌剂放在纠集在一起的根
县ꎬ经广州中医药大学药用植物学教研室杜勤教
上ꎬ转移至花盆ꎬ用玻棒将孔压实ꎬ使幼苗竖直ꎮ
授 鉴 定 为 爵 床 科 植 物 穿 心 莲 ( Ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓ
植株生长期间进行正常养护管理ꎬ在接种后的 ３０、
ｐａｎｉｃｕｌａｔａ)种子ꎮ
６０、９０、１２０ ｄ 定期测定相关指标ꎮ
供 试 ＡＭＦ 为 摩 西 斗 管 囊 霉 ( Ｆｕｎｎｅｌｉｆｏｒｍｉｓ １.４ 测定指标
ｍｏｓｓｅａｅꎬ ＢＧＣＸＺ０２Ａ ) 和 地 表 多 样 孢 囊 霉
１.４.１ ＡＭＦ 侵染率测定 穿心莲根系洗净ꎬ经 ＦＡＡ
(Ｄｉｖｅｒｓｉｓｐｏｒａ ｖｅｒｓｉｆｏｒｍｉｓꎬＢＧＣＮＭ０４Ｂ)ꎬ菌种购自长
固定液固定 ２４ ｈ 后按透明、染色、制片、镜检等步
江大学根系生物学研究所ꎮ ＡＭＦ 菌剂培养条件参
骤计算菌根侵染率(王幼珊等ꎬ２０１２)ꎮ
照«中国丛枝菌根真菌资源与种质资源» ( 王幼珊ꎬ
１.４.２ 穿心莲植株生长指标测定 收获时植株分
２０１２)制备ꎬ经白三叶盆栽扩繁 ３ 个月后ꎬ由长江
成地上部分与根系部分ꎬ测定地上部分植株株高、
大学根系生物学研究所通过孢子密度测定ꎬ确定
叶片数、茎基粗、叶面积和生物量ꎻ用根系扫描仪
每克 ＡＭＦ 菌种内含 ５０ 个孢子ꎮ 及根系分析系统测量根长、根平均直径、根表面
１.２ 主要试剂与仪器
积、根体积、根尖数等根系形态指标ꎮ
主要试剂为无水乙醇、３０％过氧化氢、曲利苯 １.４.３ 穿心莲植株生理生化指标测定 根据南京
蓝、乙腈色谱纯、甲醇色谱纯、穿心莲内酯( 批号: 建成生物工程研究所试剂盒说明书测定穿心莲植
１１０７９７￣２０１６０９)标准品购于中国食品药品检定研 株叶 片 ＭＤＡ 含 量ꎬ 超 氧 化 物 歧 化 酶 ( ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ
究院ꎻ其他试剂为分析纯ꎻ栽培基质为品氏泥炭 ｄｉｓｍｕｔａｓｅꎬ ＳＯＤ) 活 性ꎬ 过 氧 化 物 酶 ( ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅꎬ
土、绿盼蛭石、德沃多珍珠岩ꎮ ＰＯＤ)活性ꎬ过氧化氢酶( ｃａｔａｌａｓｅꎬ ＣＡＴ) 活性ꎻ根
ＹＭＪ￣４ 活体叶面积测量仪( 杭州大吉光电仪 系活力采用 ＴＴＣ 法测定(李合生ꎬ２０００)ꎮ
器有限公司)ꎻＣＴ￣８８４ 全自动立式蒸汽灭菌器[ 驰 １.４.４ 穿心莲植株有效成分含量测定 采集穿心
通仪 器 ( 上 海) 有 限 公 司]ꎻ ＣＸ２３ 光 学 显 微 镜 莲植株ꎬ参照«中华人民共和国药典»方法( 国家药
(ＯＬＹＭＰＵＳ)ꎻＭＲＳ￣９６００ＴＦＵ２Ｌ 根系扫描仪( 上海 典委员会ꎬ２０２０)ꎬ采用高效液相色谱法测定其根、
中晶科技有限公司)ꎻＬＣ￣２０Ａ 高效液相色谱仪( 日 茎、叶及地上部分的穿心莲内酯、新穿心莲内酯、
本岛津公司)ꎮ １４￣去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯含量ꎮ