Page 192 - 《广西植物》2025年第6期

１ １ ７ ８ 广 西 植 物 ４５ 卷
下的叶质量(Ｗ)和水势(Ψ)ꎮ 将 Ｗ 与 Ψ 绘制散点 (ｇ)ꎻＬＡ 为叶片面积(ｌｅａｆ ａｒｅａꎬ ｍ )ꎮ
２
图ꎬ当出现明显的拐点后再测 ４ ~ ５ 个点即可停止 使 用 ＳｉｇｍａＰｌｏｔ １４. ０ 中 的 Ｓｉｇｍｉｏｄ ｔｈｒｅｅ
测定ꎮ 最后将叶片利用 ＬＩ￣３０００Ｃ 叶面积仪器测定 ｐａｒａｍｅｔｅｒ 方程拟合 Ψ 与 Ｋ 之间的关系:
０ ｌｅａｆ
其面积后将叶片置于 ７０ ℃ 烘箱中烘干ꎬ７２ ｈ 后测 Ｋ ＝ ａ / [１＋ｅｘｐ( －(Ψ －Ψ ) / ｂ)]ꎮ
ｌｅａｆ ｆ ０
定其干质量ꎬ每个种进行 ３ 次重复测量ꎮ 利用对 式中:ａ、ｂ 为拟合方程中的系数ꎻ从拟合曲线
应的饱和鲜质量( Ｗ ) 和干质量( Ｗ ) 将实验过程 中计算 Ψ 为 ０ 时的 Ｋ 为叶片最大导水率 Ｋ
ｆ ｄ ｆ ｌｅａｆ ｌｅａｆ￣ｍａｘ
中称量得到的一系列鲜质量( Ｗ ) 换算成对应的 (ｍｍｏｌｍ ｓ ＭＰａ )ꎬ同时计算最大导水率
￣１
￣２
￣１
ｆꎬｉ
相对含水量( ｒｅｌａｔｉｖｅ ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔꎬＲＷＣ ꎬ％) 作为 ꎬＭＰａ) 用于表征叶片的
ｉ 丧失一半时的水势( Ｐ ５０ｌｅａｆ
横坐标ꎬ将其与对应的水势的倒数(１ / Ψ ) 作为纵 抗栓塞能力(Ｂｌａｃｋｍａｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１４)ꎮ 由于叶片气
ｉ
坐标ꎬ绘制压力－容积曲线ꎬ根据标准方法( Ｂａｒｔｌｅｔｔ 孔关闭与膨压变化有关( Ｂａｒｔｌｅｔｔ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１２)ꎬ因
ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１２) 计算当曲线截距为零时即可得到膨 此通过 π 和 Ｐ 计算的安全边际可用于评估植
ｔｌｐ ５０ｌｅａｆ
压损失点水势(π ꎬＭＰａ)ꎮ 物水力安全ꎬ气孔安全边界( ＨＳＭ ꎬＭＰａ) 反映气
ｔｌｐ ｔｌｐ
１.２.２ 叶片导水率和脆弱性曲线 叶片导水率和 孔对 叶 片 栓 塞 化 的 调 节 策 略 ( Ｂａｒｔｌｅｔｔ ｅｔ ａｌ.ꎬ
脆弱性曲线( ｖｕｌｎｅｒａｂｉｌｉｔｙ ｃｕｒｖｅ) 采用复水法进行 ２０１６)ꎬ计算公式如下:
测 定 ( Ｂｒｏｄｒｉｂｂ ＆ Ｈｏｌｂｒｏｏｋꎬ ２００３ꎻ Ｓａｃｋ ｅｔ ａｌ.ꎬ ＨＳＭ ＝ π － Ｐ ꎮ
ｔｌｐ ｔｌｐ ５０ｌｅａｆ
２００３ａ) ꎮ 从上述采集的样品中选择 ３ ~ ５ 张复叶 １.２.３ 叶片形态解剖结构测定 每个物种选取 ５ 株
( 复叶上的叶片数量不少于 ４０ 片) ꎬ将整个复叶 长势良好的植株ꎬ从不同的植株个体中取 ３ ~ ５ 张
密封遮光复水至叶片吸水饱和ꎮ 将复叶放置在 叶片ꎬ在叶片中间的部位( 避开中脉) 做徒手切片
实验室自然干燥不同时间以得到不同的叶水势 并制成临时装片ꎬ于光学显微镜下随机选择 ３ 个
梯度ꎬ将失水后的叶片分别放入黑色塑料袋中密 清晰的视野观察叶片横切结构并进行拍照ꎬ使用
封遮光至少 １ ｈꎬ随机选择 ２ 个相邻叶片测量其 ＩｍａｇｅＪ 软件( 版本 １.５４ｅꎻＣｕｒｔｉｓ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１６) 测量
水势ꎬ若差值小于 ０.１ ＭＰａꎬ则视为整个叶片已达 叶片厚度( ｌｅａｆ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓꎬＬＴꎬμｍ)、栅栏组织厚度
到水势平衡并将 ２ 个相邻叶片水势的平均值为 (ｐａｌｉｓａｄｅ ｔｉｓｓｕｅ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓꎬＰＴꎬμｍ)、副转输组织厚
初始叶片水势( Ψ ꎬＭＰａ) ꎬ将叶柄放在水中ꎬ在水
０ 度(ａｃｃｅｓｓｏｒｙ ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｉｓｓｕｅ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓꎬＣＴＴꎬμｍ)、
中剪下相邻叶并使之复水一定的时间( 复水的时 海绵 组 织 厚 度 ( ｓｐｏｎｇｙ ｔｉｓｓｕｅ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓꎬ ＳＴꎬ μｍ)ꎮ
间根据叶片初始水势而定ꎬ高水势复水时间短ꎬ 同时ꎬ从叶片中部剪取面积约为 ２ ｃｍ 的叶片并浸
２
低水势复水时间长ꎬ一般不超过 １８０ ｓ) ꎬ记录准 泡在体积分数为 ３０％过氧化氢与冰乙酸的体积比
确的复水时间( ｔꎬｓ) ꎮ 将复水后的叶片放入内置 为 １ ∶ １ 的混合离析液中ꎬ于 ７０ ℃ 水浴锅中放置
湿纸巾的自封袋平衡 １０ ~ ６０ ｍｉｎ( 叶片不与湿纸 ３ ~ ９ ｈ 左右ꎬ待叶片变白ꎬ取出材料后经过清水漂

巾直接接触) ꎬ取出测定复水后的叶片水势( Ψ ꎬ 洗后放置于载玻片上ꎬ滴加丙三醇进行封片ꎬ之后
ｆ
ＭＰａ) ꎮ 经过自然 干 燥 和 复 水 操 作ꎬ计 算 不 同 水 将放有样品的载玻片放置在光学显微镜下观察气
势( Ψ ) 下 的 Ｋ ꎬ 当 Ｋ 降 至 接 近 ０ 时 测 定 结 孔并拍照ꎬ每张叶片随机拍摄并保存 ５ 个视野ꎬ用
０ ｌｅａｆ ｌｅａｆ
束ꎮ 叶片导 水 率 ( Ｋ ꎬｍｍｏｌ ｍ ｓ ＭＰａ ) ＩｍａｇｅＪ 软 件 测 量 保 卫 细 胞 的 长 度 即 气 孔 长 度
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￣２
￣１
ｌｅａｆ
计算公式如下: ( ｓｔｏｍａｔａｌ ｇｕａｒｄ ｃｅｌｌ ｌｅｎｇｔｈꎬ ＳＬꎬ μｍ)ꎬ 气 孔 宽 度
Ｋ ＝ Ｃ × ｌｎ (Ψ / Ψ ) / ｔꎮ (ｓｔｏｍａｔａｌ ｗｉｄｔｈꎬＳＷꎬμｍ)ꎬ同时统计视野内所有的
ｌｅａｆ ０ ｆ
式中:ｔ 是复水时间( ｓ)ꎻＣ 是叶片水容ꎬ可通 气孔ꎬ再用气孔数量除以视野面积得到气孔密度
过测定叶片的压力－容积曲线(Ｐ￣Ｖ 曲线) 计算ꎬ计 (ｓｔｏｍａｔａｌ ｄｅｎｓｉｔｙꎬＳＤꎬｉｎｄ. ｍｍ )ꎬ根据测量所得
￣２
算公式如下: 的气 孔 大 小 和 气 孔 密 度 计 算 气 孔 面 积 指 数
Ｃ ＝ ΔＲＷＣ / ΔΨ × (ＤＷ / ＬＡ) ×(Ｗ / Ｗ ) / Ｍꎮ
ｌｅａｆ ｆ ｄ (ｓｔｏｍａｔａｌ ａｒｅａ ｉｎｄｅｘꎬＳＡＩꎬ％ꎻＳａｃｋ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００３ｂ)ꎬ
式中:ΔＲＷＣ / ΔΨ 表 示 相 对 含 水 量 ( ＲＷＣ )
ｌｅａｆ ｉ 计算公式如下:
与水势(Ψ ) 的斜率ꎬ即单位水势变化引起的叶片 ＳＡＩ ＝ ＳＤ × (π / ４×ＳＬ×ＳＷ×１０ )ꎮ
￣４
ｉ
相对含水量变化值ꎻＷ 为叶片饱和鲜质量( ｇ)ꎻＭ 在每个植株上选择 ３ 张完全伸展、没有病虫害
ｆ
为水的摩尔质量(１８ ｇｍｏｌ )ꎻＷ 为叶片干质量 的叶片ꎬ用剪刀剪下ꎬ在水下泡至饱和后ꎬ首先用
￣１
ｄ