Page 172 - 《广西植物》2025年第7期

１ ３ ６ ４ 广 西 植 物 ４５ 卷
表 ２ 克隆基因及荧光定量 ＰＣＲ 分析所用引物
Ｔａｂｌｅ ２ Ｐｒｉｍｅｒｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｇｅｎｅ ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ＲＴ￣ｑＰＣＲ ａｎａｌｙｓｉｓ
引物名称 引物序列 (５′－３′) 引物名称 引物序列 (５′－３′)
Ｐｒｉｍｅｒ ｎａｍｅ Ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ (５′－３′) Ｐｒｉｍｅｒ ｎａｍｅ Ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ (５′－３′)
ＬＣＹＢ￣Ｆ ＡＡＴＣＴＴＣＣＴＴＣＡＡＣＡＧＣＴＴＣＴＣ ＬＹＣＥ￣Ｆ ＴＣＴＣＴＧＣＴＡＧＡＣＡＴＴＴＴＣＣＴＣＧＴＴ
ＬＣＹＢ￣Ｒ ＣＣＴＡＡＴＡＴＴＣＴＣＣＡＴＣＣＣＴＣＡＡＣ ＬＹＣＥ￣Ｒ ＴＣＣＣＡＧＡＡＧＣＡＧＡＡＡＡＡＡＧＴＡＧＣ
ＬＣＹＢ￣ｑ￣１Ｆ ＧＣＴＧＣＣＴＴＡＴＣＣＧＣＴＡＣＧＡＣＡＡ ＬＣＹＥ￣ｑ￣１Ｆ ＣＡＧＧＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＡＡＴＧＧＡＡ
ＬＣＹＢ￣ｑ￣１Ｒ ＴＴＣＣＧＣＴＧＣＴＴＧＡＧＴＴＣＡＧＧＡＣ ＬＣＹＥ￣ｑ￣１Ｒ ＧＡＣＣＡＣＡＣＣＣＧＡＣＡＡＣＧＡＴＣＡＡ
ＬＣＹＢ￣ｑ￣２Ｆ ＡＴＧＧＴＴＧＡＧＣＧＧＴＴＧＡＧＧＣＡＴＴ ＬＣＹＥ￣ｑ￣２Ｆ ＧＧＣＣＧＴＧＣＡＴＡＴＧＧＴＣＧＡＧＴＴＡ
ＬＣＹＢ￣ｑ￣２Ｒ ＴＣＴＧＡＧＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＧＡＧＡＧＧ ＬＣＹＥ￣ｑ￣２Ｒ ＴＧＧＣＡＡＧＣＣＴＧＣＡＡＧＧＡＡＴＣＡＴ
ＬＣＹＢ￣ｑ￣３Ｆ ＡＴＣＧＴＴＧＣＧＧＡＴＧＣＣＡＴＴＧＴＴＣ ＬＣＹＥ￣ｑ￣３Ｆ ＡＴＣＧＣＴＣＧＡＴＴＣＧＧＣＴＴＣＴＴＣＣ
ＬＣＹＢ￣ｑ￣３Ｒ ＣＧＴＣＣＡＴＧＣＣＧＡＡＧＣＡＧＡＡＧＡ ＬＣＹＥ￣ｑ￣３Ｒ ＴＴＣＣＡＴＴＧＧＣＴＴＣＣＧＣＴＣＣＴＧ
β￣ａｃｔｉｎ￣ｑ￣Ｆ ＧＴＣＡＧＧＧＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＡＡＧ ＴＵＡ￣ｑ￣Ｆ ＣＡＡＡＧＡＡＧＡＴＧＣＡＧＣＣＡＡＣＡＡＣ
β￣ａｃｔｉｎ￣ｑ￣Ｒ ＴＧＧＧＣＡＣＣＴＡＡＡＴＣＴＣＴＣＡＧＣ ＴＵＡ￣ｑ￣Ｒ ＡＡＧＡＣＣＡＧＴＧＣＡＧＴＴＧＴＣＡＧＣＴＡ
注: ＬＣＹＢ 和 ＬＣＹＥ 引物各设计了 ３ 对ꎬ以 ３ 对引物所得结果的平均值作为最终数值ꎮ
Ｎｏｔｅ: Ｔｈｒｅｅ ｐａｉｒｓ ｏｆ ｐｒｉｍｅｒｓ ａｒｅ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｆｏｒ ＬＣＹＢ ａｎｄ ＬＣＹＥꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｐａｉｒｓ ｏｆ ｐｒｉｍｅｒｓ ｉｓ
ｔａｋｅｎ ａｓ ｔｈｅ ｆｉｎａｌ ｖａｌｕｅ.

个品种共有的类胡萝卜素为 β￣胡萝卜素、花药黄
质、玉米黄质、紫黄质、新黄质及叶黄素ꎮ 紫黄质
棕榈油酸酯、紫黄质－肉豆蔻酸酯 －油酸酯、紫黄
质－肉豆蔻酸酯 － 棕 榈 酸 酯 和 β￣柠 乌 素 是 ‘ 青 苹
果’ 中所特有ꎮ
叶黄素和紫黄质是‘ 青苹果’ ‘ 金公主’ ‘ 绿色

之星’和‘ 红霞’ 中含量最高的两种类胡萝卜素ꎮ
叶黄素和玉米黄质是‘三亚阳光’ 中含量最高的两
图 ２ ＤｈＬＣＹＥ 和 ＤｈＬＣＹＢ 基因的克隆
种化合物ꎮ 总类胡萝卜素含量在‘ 金公主’ 中最
Ｆｉｇ. ２ Ｃｌｏｎｉｎｇ ｏｆ ＤｈＬＣＹＥ ａｎｄ ＤｈＬＣＹＢ ｇｅｎｅｓ
高ꎬ为 ２４５.８９ (μｇｇ ＤＷ)ꎻ其次是‘ 青苹果’ 和
￣１
‘绿色之星’ꎬ‘三亚阳光’ 和‘红霞’ 的总类胡萝卜
ＤｈＬＣＹＥ 在‘绿色之星’ Ｓ２ 表达量最高ꎻ在‘ 三 素含量都很低ꎮ ‘金公主’积累的色素主要为 α 合
亚阳光’ Ｓ３ 和‘ 红霞’ Ｓ１ 最低ꎻ在‘ 红霞’３ 个花发 成支路上的叶黄素及其衍生物ꎮ 而‘青苹果’ 积累
育中的表达逐渐上升ꎻ在‘ 绿色之星’ 先上升后下 的色素主要为 β 支路上的色素ꎬ如玉米黄质、花药
降ꎻ在‘三亚阳光’‘金公主’ 和‘青苹果’ 中的表达 黄质及紫黄质及其衍生物等( 图 ６:Ａ)ꎮ 色相 ａ ∗
趋势为先下降后上升ꎬ变化幅度也较小ꎮ 值与 １５ 种类胡萝卜素及其衍生物都具有显著负
２.５ 不同花色品种花被片中类胡萝卜素种类和含量 相关性ꎬｂ 值则为正相关(图 ６:Ｂ)ꎮ
∗
本研究从秋石斛花中共鉴定出 ４８ 种类胡萝 ２.６ ＤｈＬＣＹＢ 和 ＤｈＬＣＹＥ 的表达量与类胡萝卜素
卜素ꎮ 其中ꎬ胡萝卜素类有 ４ 种ꎬ即 β￣胡萝卜素、 种类和含量及花色的相关性
α￣胡萝卜素、八氢番茄红素及 γ￣胡萝卜素ꎮ 叶黄 将各个品种 ３ 个发育时期基因表达量与初开
素类有 ４４ 种ꎬ包括玉米黄质、β￣隐黄质、紫黄质、 期类胡萝卜素含量进行相关性分析ꎮ 在中花芽时
角黄素、叶黄素、花药黄质、新黄质、８′￣阿朴￣β￣胡 期中ꎬＤｈＬＣＹＢ 表达量与八氢番茄红素、玉米黄质
萝卜素醛、海胆烯酮、β￣柠乌素、玉 红 黄 质、辣 椒 及花药黄质 ３ 种类胡萝卜素具显著性相关( Ｐ <
玉红 素 及 其 酯 化 物ꎮ 其 中ꎬ ‘ 金 公 主’ 和 ‘ 青 苹 ０.０５)ꎻＤｈＬＣＹＥ 与 γ￣类胡萝卜素和辣椒玉红素具
果’ 的类胡萝卜素种类较多ꎬ分别为 ４４ 种和 ４３ 极显著性相关( Ｐ<０.０１)ꎬ与 α￣类胡萝卜素、叶黄
种ꎻ‘ 红霞’ ‘ 绿色之星’ 和‘ 三亚阳光’ 的类胡萝 素具显著性相关( Ｐ<０.０５) ( 图 ７:Ａ)ꎮ 在大花芽
卜素种类较 少ꎬ 分 别 是 １１ 种、１４ 种 和 １２ 种ꎮ ５ 时期中ꎬ ＤｈＬＣＹＢ 和 ＤｈＬＣＹＥ 表达量与类胡萝卜素