Page 70 - 《广西植物》2025年第7期
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１ ２ ６ ２ 广 西 植 物 ４５ 卷
２０１２)ꎬＳｌＭＹＢ１０２ 在番茄中受低温、ＡＢＡ 和盐 ３ 种 逆基因的表达ꎬ进一步提高植物抵御非生物胁迫
非生物胁迫诱导ꎬ在 ３ 种胁迫诱导下ꎬＳｌＭＹＢ１０２ 的能力ꎬ但 ＢＲ 对冬小麦中 ＲＥＶＥＩＬＬＥＳ 基因表达
基因表达量均呈上升趋势( Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１３ꎻ 赵 的影响还未见报道ꎮ 本实验以冬小麦‘东农冬麦 １
爽ꎬ２０１４)ꎮ ＲＥＶＥＩＬＬＥＳ ( ＲＶＥｓ) 是一类与植物生 号’为研究对象ꎬ依托不同低温胁迫下外源油菜素
物钟 相 关 的 ＭＹＢ 类 转 录 因 子 ( Ｆｏｇｅｌｍａｒｋ ＆ 内酯处理的冬小麦转录组数据ꎬ筛选得到差异表
Ｔｒｏｅｉｎꎬ ２０１４)ꎬＲＶＥ４、ＲＶＥ６ 和 ＲＶＥ８ 基 因 是 拟 南 达基因 ＲＥＶＥＩＬＬＥ ７￣ｌｉｋｅꎬ采用基因克隆、生物信息
芥生物钟的正向调节因子( Ｈｓｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１３)ꎬ在 学和 ｑＲＴ￣ＰＣＲ 等方法ꎬ通过鉴定该基因的结构、功
红梨果皮中发现 ４ 个 ＰｂＲＥＶＥｓ 基因可以促进花青 能及在冬小麦中的表达情况ꎬ拟探讨以下问题:
素的合成( Ｌｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２０)ꎬ生物钟相关基因的作 (１)ＲＥＶＥＩＬＬＥ ７￣ｌｉｋｅ 蛋白结构及理化性质、亚细
用几乎延伸到植物生长和发育的各个方面ꎬ包括 胞定位情况ꎻ(２)冬小麦与多物种 ＲＥＶＥＩＬＬＥ ７￣ｌｉｋｅ
对非生物胁迫的反应(Ｎａｇｅｌ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１５)ꎮ 例如: 的启动子顺式作用元件特征ꎻ(３) ＲＥＶＥＩＬＬＥ ７￣ｌｉｋｅ
拟南芥中的 ＲＥＶＥＩＬＬＥ１ 突变体对低温表现出更强 在冬小麦中的抗寒功能及对 ＢＲ 激素信号的应答ꎬ
的 耐 受 性 ( Ｍｅｉｓｓｎｅｒ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１３ )ꎻ 烟 草 中 的 初步阐述 ＢＲ 处理后该基因在冬小麦应对低温胁
ＳｇＲＶＥ６ 可显著提高植株对冷害的抗性( Ｃｈｅｎ ｅｔ 迫时的功能表现ꎮ
ａｌ.ꎬ ２０２０)ꎬＲＶＥ７ 基因能够感知温度变化ꎬ并进一 东北 冬 季 平 均 气 温 为 － ２０ ℃ ꎬ ‘ 东 农 冬 麦 １
步作出响应(田莹莹ꎬ２０２２)ꎻＲＥＶＥＩＬＬＥＳ 基因在小 号’(‘Ｄｎ１’) 是首个能在黑龙江省严寒地带大面
麦、拟南芥、玉米、番茄、烟草等大多数植物中均有 积种植且返青率超过 ８５％的强抗寒冬小麦品种ꎬ
表达ꎮ 因此ꎬ推测本研究中的 ＲＥＶＥＩＬＬＥ ７￣ｌｉｋｅ 基 因此本研究对进一步提高冬小麦产量和耐寒性具
因可能参与作物适应冷环境反应的调节ꎬ并有助 有重要意义ꎬ也可为进一步揭示 ＭＹＢ 家族基因
于优越冬小麦耐寒性ꎮ ＲＥＶＥＩＬＬＥ ７￣ｌｉｋｅ 在冬小麦应对低温胁迫过程中的
油菜素内酯( ｂｒａｓｓｉｎｏｓｔｅｒｏｉｄｓꎬＢＲｓ) 在 ２０ 世纪 分子机制提供参考ꎮ
７０ 年代首次被发现ꎬ是一类具有极高生物活性的
甾醇类化合物(Ｌｏｕｓｅ ＆ Ｓａｓｓｅꎬ １９９８)ꎬ有促进种子 １ 材料与方法
萌发和幼苗生长ꎬ以及提高光合作用效率和提高
抗逆 性 等 作 用 ( 文 海 等ꎬ ２００６ꎻ 凯 荣 等ꎬ ２００８ꎻ １.１ 试验材料及处理
Ｂａｊｇｕｚꎬ ２００９)ꎮ 例如ꎬ外源施用 ＢＲ 不仅可以增强 试验材料为寒地冬小麦品种‘ 东农冬麦 １ 号’
萝卜、辣 椒、油 菜 的 抗 旱 性 ( Ｋａｇａｌｅ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００６ꎻ (‘Ｄｎ１’)ꎬ由齐齐哈尔大学生命科学与农林学院
Ｍａｈｅｓｈ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１３ꎻ Ｈｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１３)ꎬ还可以提高 植物代谢生理实验室提供ꎮ 于 ２０２２ 年 ９ 月种于试
灯笼椒、番茄和拟南芥等植物的抗寒性( Ｋａｇａｌｅ ｅｔ 验田中ꎬ用 ＢＲ 喷施处于三叶期的冬小麦叶片( 浓
￣１
ａｌ.ꎬ ２００６ꎻ Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１２ꎻ Ａｇｈｄａｍ ＆ 度为 ０.１ ｍｇＬ )ꎬ喷施标准为叶片表面全部湿
Ｍｏｈａｒｎｍａｄｋｈａｎｉꎬ ２０１４)ꎬ许多与 ＢＲ 生物合成及信 润ꎬ共喷施 ３ 次ꎬ每次间隔 ２ ｄꎬ以喷施蒸馏水作为
号转导相关的基因相继被鉴定和克隆ꎬ利用转基 对照ꎮ 在连续 １０ ｄ 田间最低温度平均值为 ４、０、
因技术转化进不同植株ꎬ可以增强植株抵御逆境 －１０、－２５ ℃ 时分别对冬小麦叶片和分蘖节进行取
的能力( 陈晨等ꎬ２０２２)ꎮ 研究表明ꎬＢＲ 可以有效 样ꎬ清洗干净、锡箔纸包裹后用分装袋收集、迅速
减轻低温对玉米的危害ꎬ保持幼苗在寒冷环境下 液氮速冻ꎬ于－８０ ℃ 冰箱储存备用ꎮ
的正常特性(Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２０)ꎬ低温胁迫下 ＢＲ 处 １.２ 试验方法
理拟南芥会诱导与低温胁迫有关基因的表达量增 １.２.１ 植物总 ＲＮＡ 的提取及反转录 取 ０.２ ｇ 小麦
加ꎬ增强植株耐寒性( Ａｇｈｄａｍ ＆ Ｍｏｈａｒｎｍａｄｋｈａｎｉꎬ 的叶片和分蘖节ꎬ采用 Ｔｒｉｚｏｌ 法提取小麦 ＲＮＡꎬ提
２０１４)ꎬＢＲ 还可以增强冬小麦的新陈代谢ꎬ提高冬 取后用琼脂糖凝胶电泳及测量 ＯＤ 的方法检
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小麦幼苗中 ＥＲＦ００３、ＷＲＫＹ２８￣ｌｉｋｅ 等相关抗寒基 测其是否符合后续试验标准ꎬ检测成功后储存备
因的表达(Ｄｉｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２３)ꎮ 尽管上述多个研究 用ꎮ 用 反 转 录 试 剂 盒 ＳｕｒｅＳｃｒｉｐｔ ＴＭ Ｆｉｒｓｔ￣Ｓｔｒａｎｄ
揭示了 ＲＥＶＥＩＬＬＥ ７￣ｌｉｋｅ 基因在多种植物非生物胁 ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｋｉｔ Ｕｓｅｒ Ｍａｎｕａｌ( 易锦生物技术有
迫响应方面的关键作用ꎬ以及 ＢＲ 可以提高相关抗 限公司ꎬ广州) 合成 ｃＤＮＡ 模板链ꎬ用 ＰＣＲ 扩增管
