Page 147 - 《广西植物》2026年第3期
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３ 期                伍春凤等: 内生拟茎点霉菌剂对两面针生长和土壤微生态的影响                                            ５ ２ ３

            ｓｐ. ＰＦ５ 促进 水 稻 生 长 及 胡 椒 碱 产 生 ( Ｃｈｉｔｈｒａ ｅｔ        技有限公司ꎮ 其他试剂均为国产分析纯ꎮ
            ａｌ.ꎬ ２０１７)ꎻＰｈｏｍｏｐｓｉｓ ｌｉｑｕｉｄａｍｂａｒｉｓ 促进水稻生长          １.３ 试验场地
            并加 速 土 壤 氮 矿 质 化 ( 陈 曼 等ꎬ２０２３ꎻ Ｅｌｓｈａｒｉｆ ｅｔ             试验地位于本校药师山松树林下两面针种植
            ａｌ.ꎬ ２０２３)ꎻＰｈｏｍｏｐｓｉｓ ｓｐ. Ｂ３ 复合菌剂促进小麦秸              基地(１０８.５０°Ｅ、２２.８０°Ｎꎬ海拔 ９４.０ ｍ)ꎬ年均气温
            秆降解ꎬ增加土壤养分(魏蔚等ꎬ２０１９)ꎮ 内生拟茎                         ２１.６ ℃ ꎬ年均降水量 １ ３８３.１ ｍｍꎬ具有低纬度、多
            点霉 Ｙ１１８ 菌剂(以下简称菌剂 Ｙ１１８) 在两面针不                      雨、温暖湿润的气候特点ꎬ适合两面针的生长ꎮ 供
            同生长阶段能促进其生长发育ꎬ提高药效成分积                              试土壤为疏松肥沃、透气性良好的砂壤土ꎮ

            累ꎬ并增强抗氧化酶活性( 谢泽碧等ꎬ２０２３ꎻＸｉｅ ｅｔ                      １.４ 方法
            ａｌ.ꎬ ２０２５)ꎬ但不同施用量的菌剂 Ｙ１１８ 对两面针                     １.４.１ 菌株 Ｙ１１８ 体外促生能力测定  参考林勇等

            生长及其土壤微生态的影响尚未明确ꎮ                                  (２０２４)的点接法ꎬ将直径为 ５ ｍｍ 的已活化真菌菌
                 本研究以两面针为研究对象ꎬ采用课题组研                           饼分别接种于阿须贝氏无氮培养基、无机磷培养

            制的菌剂 Ｙ１１８ 进行盆栽试验ꎬ拟探讨以下问题:                          基、解钾培养基和纤维素刚果红培养基中央ꎬ置于
            (１)不同施用量的菌剂 Ｙ１１８ 对两面针生长及药效                         ２８ ℃ 培养箱中培养ꎬ７ ｄ 后观察菌落形态ꎮ
            成分积累的影响ꎻ(２) 不同施用量的菌剂 Ｙ１１８ 对                        １.４.２ 固体菌剂 Ｙ１１８ 制备  按以下配方配置固体
            土壤理化性质和酶活性的影响ꎻ(３) 不同施用量的                           培养基:麸皮 ８５％、大米 １５％、麦芽糖 ２.５％、蛋白
            菌剂 Ｙ１１８ 对土壤细菌和真菌多样性的影响ꎻ(４)                         胨 １.５％、ＫＨ ＰＯ ０.２％、ＭｇＳＯ ０.１５％ꎬ调节 ｐＨ 值
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            土壤理化性质、酶活性与土壤微生物之间的相关                              至 ５.５ ~ ６.５ꎬ料水质量比为 １ ∶ １ꎮ 取 ６０ ｇ 培养基
            性ꎮ 本研究旨在为两面针的绿色栽培与科学施肥                             装入培养瓶ꎬ灭菌后冷却备用ꎮ 将直径为 １.５ ｃｍ
            提供科学依据ꎮ                                            的已活化真菌菌饼置于无菌培养瓶中央ꎬ密封ꎬ于
                                                               ２５ ℃ 下发酵 ４０ ｄꎬ即得固体菌剂 Ｙ１１８ꎬ其孢子数
            １  材料与方法                                           为 ３.３５×１０ ＣＦＵｇ ꎬ保存备用ꎮ
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            １.１ 试验材料                                           料花盆中( 内径 １５.５ ｃｍ、高 １４.０ ｃｍ)ꎬ每盆 １ 株ꎮ
                 试验苗为本校组培室生长状况一致的两面针                           设置菌剂的用量为 ０、５、１５、２５、３５ ｇｐｌａｎｔ ꎬ分别
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            组培苗ꎬ原植物经滕建北教授鉴定为芸香科花椒                              记为 ＣＫ、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４ꎮ 各组样本量参考黄媛等
            属植物两面针( Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ ｎｉｔｉｄｕｍ)ꎮ 供试菌株                 (２０２４)和潘艳艳等(２０２５) 的研究方法ꎬ每组 １０
            为前期从健康两面针叶中分离出来的拟茎点霉属                              株两面针ꎬ重复 ３ 次ꎮ 缓苗 １ 个月ꎬ除 ＣＫ 组外ꎬ其
            的内生 真 菌 Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ ｓｐ. Ｙ１１８ ( 以 下 简 称 菌 株           余组均在距植株茎基部 ５ ｃｍ 处挖浅沟ꎬ将菌剂
            Ｙ１１８)ꎬ菌株保藏号为 ＣＧＭＣＣ ４０３２６ꎬ保存于中国                     Ｙ１１８ 均匀撒入沟内ꎬ覆土后浇 １００ ｍＬ 水ꎮ 在养
            科学院微生物所ꎮ 阿须贝氏无氮培养基、无机磷                             护过程中ꎬ每天定时浇水ꎬ保持湿度在 ８０％左右ꎮ
            培养基和解钾培养基参照杨明国等(２０２４) 的方法                          １.４.４ 样品采集  施用菌剂 ６ 个月后ꎬ各组分别采
            配置ꎻ纤维素刚果红培养基参照高佩等(２０２４) 的                          集 １０ 株长势一致的两面针ꎬ用于后续生物量和有

            方法配置ꎮ                                              效成分含量测定ꎮ 参照唐雪东等(２０１２) 的方法ꎬ
            １.２ 仪器和试剂                                          采用抖根法ꎬ完整挖取两面针根系ꎬ去除其表面疏

                 Ｅｐｏｃｈ２ 全波长酶标仪ꎬ购自美国 Ｂｉｏｔｅｃｋ 公司ꎻ                松土壤后ꎬ用刷子采集附着在距离根系 ０ ~ ５ ｍｍ
            １８５４２４Ｒ 冷冻离心机ꎬ 购自德国 Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ 公 司ꎻ                 的土壤作为根际土ꎮ 为消除组内土样个体差异ꎬ
            ＨＷＳ￣２８ 电热恒温水浴锅ꎬ购自上海齐欣科学仪器                          将 ３ 株植株的根际土合并混匀后过 １０ 目筛ꎬ即得
            有限公司ꎻＥＳ２２２０Ｍ 分析天平ꎬ购自赛多利斯科学                         １ 份根际土样ꎬ每组共采集 ３ 份土样ꎮ 每份土样分
            仪器(北京)有限公司ꎻ１２６０ 高效液相色谱仪ꎬ购自                         作 ３ 部分:第 １ 部分ꎬ用于测定土壤酶活性的新鲜

            美国安捷伦公司ꎮ 白屈菜红碱对照品(生产批号:                            土样置于－２０ ℃ 冰箱中保存ꎻ第 ２ 部分ꎬ用于分析
            ＲＰ２００５１４ꎬ纯度≥９９.７７％)ꎬ购自成都麦德生科技有                     土壤微生物群落结构和多样性的新鲜土样置于
            限公司ꎻ氯化两面针碱对照品( 生产批号:ＭＵＳＴ￣                          －８０ ℃ 冰箱中保存ꎻ第 ３ 部分ꎬ用于测定土壤理化
            ２１１０１７０７ꎬ纯度≥９９.８１％)ꎬ购自成都曼思特生物科                     性质的土样经风干、研磨后于常温保存ꎮ
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