Page 45 - 《广西植物》2026年第6期
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9 6 0                                  广  西  植  物                                         46 卷
            为 RG170 菌剂ꎮ                                        坐标ꎬ峰面积为纵坐标ꎮ 分别对上述对照品进行
                 选取生长状况良好、长势一致的肉桂实生苗ꎬ                          线性回归ꎬ结果见表 1ꎬ色谱图见图 1ꎮ
            种植于内径 15 cmꎬ高 17.5 cm 的塑料花盆内( 用
            质量分数 0.5%的高锰酸钾溶液浸泡消毒ꎬ之后用                                     表 1  肉桂 3 种成分回归方程
            无菌水冲洗 3 次ꎬ晾干备用)ꎮ 栽培土为泥炭土和                                 Table 1  Regression equations for three
                                                                        components of Cinnamomum cassia
            蛭石(2 ∶ 1) 按体积比混合ꎬ混合后于 121 ℃ 高压
            灭菌锅中灭菌 30 minꎮ 肉桂实生苗统一管理ꎬ本                               分析物             回归方程             R 2
                                                                     Analyte      Regression equation
            试验在广西中医药大学温室大棚进行ꎮ 采用完全
                                                               肉桂醇 Cinnamyl alcohol  y = 29 424.1x  0.999 795 7
            随机试验设计ꎬ实验组为使根部与菌剂均匀接触ꎬ
                                                                肉桂酸 Cinnamic acid  y = 117 723.0x  0.999 704 6
            每盆菌剂适宜接种量为 30 gꎬ先将基质铺好ꎬ植株
                                                               肉桂醛 Cinnamaldehyde   y = 49 875.9x  0.999 843 6
            移入后将菌剂均匀铺至与根部接触ꎬ再铺一层基
            质覆盖菌剂ꎬ对照组施加等量无菌基质ꎬ每日浇灌
            等量适宜蒸馏水ꎬ90 d 后对其进行生物量以及生                               (2)样品溶液的制备
            理指标测定ꎮ                                                 取共生后叶片、茎皮干样ꎬ研磨成粉末( 过 40
            1.5 测定指标与方法                                        目筛)ꎬ精密称定 0.100 0 gꎬ加入 5 mL 甲醇ꎬ密塞
            1.5.1 盆栽苗生物量的测定  共生 90 d 后收获肉                      称重ꎬ再超声 30 minꎬ放冷后补足失重ꎬ5 000 r
                                                                   ̄1
            桂植株ꎬ每个处理随机挑选 6 株ꎬ从根基部剪下ꎬ                           min 离心 10 minꎮ 上清液过 0.22 μm 滤膜ꎬ收集
            称量叶、根鲜重ꎬ记录鲜重ꎬ之后将各部位阴干至                             滤液备用ꎮ
            恒重ꎬ记录干重ꎮ                                               液相条件主要包括: a) 色谱柱:VisionHT C18
            1.5.2 渗透调节物质及抗氧化活性的测定  可溶                          色谱柱(250 mm × 4.6 mmꎬ5 μm)ꎻ b) 流动相:A
            性糖含量采用蒽酮比色法测定ꎻ可溶性蛋白含量                              相为体积分数 0.1%磷酸水溶液ꎬC 相为乙腈ꎻ体积
            参照 Biosharp BCA 蛋白浓度测定试剂盒说明书测                      流量为 0.8 mLmin ꎻ柱温为 30 ℃ ꎻ进样量为 10
                                                                                  ̄1
            定ꎮ 超氧化物歧化酶( superoxide dismutaseꎬSOD)              μLꎬ检测波长为 265 nmꎬ液相洗脱程序见表 2ꎮ
            活性采 用 氮 蓝 四 唑 ( NBT) 法 测 定ꎻ 过 氧 化 物 酶              1.6 数据统计与分析
            (peroxidaseꎬPOD)活性采用愈创木酚法测定ꎻ过氧                         利用 Excel 进行数据整理ꎬ采用 Origin 2024 进
            化氢酶( catalaseꎬCAT) 活性采用紫外分光光度法                     行绘图ꎬ运用 SPSS 软件进行数据分析ꎮ
            测定ꎬ具 体 操 作 参 考 李 小 方 和 张 志 良 ( 2016) 的
            方法ꎮ                                                2  结果与分析
            1.5.3 总黄酮、总酚含量的测定  总黄酮含量测定
            采用 NaNO -Al( NO ) -NaOH 显色法测定ꎻ总酚                   2.1 菌株体外促生活性分析
                      2        3  3
            含量采用福林酚法测定ꎮ                                            促进植物对氮、磷、钾等营养元素的吸收是内
            1.5.4 肉桂主要活性成分含量测定  使用 HPLC 对                      生真菌促进植物生长的主要作用方式ꎮ 由图 2 可
            肉桂叶和茎皮中肉桂醇、肉桂酸和肉桂醛的含量                              知:内生真菌 RG170 在无机磷培养基上未形成透

            进行测定ꎮ                                              明圈ꎬ表明其不具有明显的无机磷溶解能力ꎻ能够
                 (1)混合对照品溶液的制备                                 在解钾培养基上产生透明圈ꎬ表明其具有一定的
                 精密 称 取 对 照 品 ( 肉 桂 醇 3. 96 mg、 肉 桂 酸          解钾作用ꎻ能够在 Ashby 培养基上正常生长ꎬ表明
            2.72 mg、肉桂醛 62.94 mg)ꎬ置 10 mL 容量瓶内ꎬ加               其具有一定的固氮作用ꎮ

            甲醇溶解ꎬ并稀释至刻度ꎬ得到各对照品储备液ꎮ                             2.2 内生真菌 RG170 对肉桂无菌苗生长的影响
            分别量取 100 μL 对照品储备液于 1 mL 量瓶内ꎬ                          菌株 RG170 接种入肉桂根部后能够显著促进
                                                   ̄1           种苗的生长发育( 图 3)ꎮ 由表 3 可知ꎬ与 CK 相
            加甲醇稀释至刻度ꎬ得到含 39.60 mgL 肉桂醇、
            27.20 mgL 肉桂酸、629.4 mgL 肉桂醛的混合                 比ꎬ处理组肉桂的株高、鲜重、侧根数、叶面积分别
                         ̄1
                                             ̄1
            对照品溶液ꎬ依次稀释 1、1.25、2.5、5、10 倍ꎬ得到                    提高了 15.4%、54.2%、40.1%、29.5%ꎬ除株高外ꎬ
            1#~5#混合对照品溶液ꎬ备用ꎮ 以对照品浓度为横                          其他均达到显著性差异ꎮ 这表明在无菌培养条件
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