Page 14 - 《广西植物》2020年第3期
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       of 16S rRNA gene sequences. The anti ̄aging activities of the actinobacteria were analyzed by using Caenorhabditis ele ̄
       gans screening models. The results were as follows: (1) A total of 26 marine actinobacteria were isolated from 21 sam ̄
       ples of seven associated mangrove plantsꎬ belonging to nine families and fifteen genera consist of Nocardiopsisꎬ Brachy ̄
       bacteriumꎬ Curtobacteriumꎬ Demequinaꎬ Gordoniaꎬ Nocardioidesꎬ Lysinimicrobiumꎬ Microbacteriumꎬ Pseudonocardiaꎬ
       Micrococcusꎬ Promicromonosporaꎬ Amycolatopsisꎬ Yimellaꎬ Kitasatospora and Streptomycesꎬ and the dominant genus was
       Streptomyces. (2) Two kinds of actinobacteria were found to have anti ̄aging effect by Caenorhabditis elegans screening
       models. All the above results indicate that there are abundant medical actinobacteria resources in the west coast of Hain ̄
       anꎬ and the study provides research fundamental data for anti ̄aging research of marine actinobacteria.
       Key words: associated mangrove plantsꎬ species diversityꎬ endophytic actinobacteriaꎬ anti ̄aging activity

       红树林是热带亚热带海岸潮间带的木本植物                           见ꎬ抗衰老药物的研究是当前重要而紧迫的任务
   群落ꎬ其伴生植物指偶尔出现于红树林最内缘或                             (吕婷ꎬ2014)ꎮ
   边缘地带的海岸、海滨、盐生或陆生植物ꎬ被认为                                目前ꎬ国内外关于线虫延缓衰老模型的研究
   是红树林的边缘物种(陶曙红等ꎬ2016)ꎮ 近年来ꎬ                        主要集中于中药提取物和保健产品的延缓衰老研
   随着陆地生物资源的广泛研究和日渐枯竭ꎬ海洋                             究(黄正杰等ꎬ2013)ꎬ而关于利用海洋微生物发酵
   微生物资源备受科学家们的关注ꎮ 许多海洋微生                            产物对线虫衰老模型的研究报道较少ꎮ 海洋微生
   物与海洋动植物共生ꎬ以获得生存必需的营养( 李                           物拥有独特的活性次级代谢产物ꎬ其代谢产物的
   艳华和张利平ꎬ2003)ꎮ 海南西海岸分布着丰富多                         抗衰老研究值得深入探讨ꎮ 到目前为止ꎬ未见有
   样的红树林植物ꎬ为保护国家资源建立了多个红                             关于红树林伴生植物共生微生物多样性的研究报
   树林自然保护区ꎬ包括儋州新英湾红树林市级自                             道ꎮ 本研究采用秀丽隐杆线虫作为延缓衰老研究
   然保护区、临高文澜江县级自然保护区和临高彩                             的模式生物ꎬ以特殊生境的海洋伴生植物为研究
   桥红树林县级自然保护区等ꎬ为科学研究提供丰                             对象ꎬ采用纯培养技术开展其内生放线菌多样性
   富的研究材料ꎮ 与其他近海环境相比ꎬ红树林是                            及其发酵产物对线虫衰老活性的研究ꎬ为研究红
   分离放线菌的理想环境( 洪葵ꎬ2013)ꎮ 目前已发                        树林放线菌群落组成提供参考ꎬ以及期望获得强活
   现 22 000 多个微生物活性产物ꎬ其中约 70%由海                      性菌株ꎬ为开发新型抗衰老药物提供强活性菌源ꎮ
   洋放线菌产生ꎬ具有多种生理活性ꎬ包括抗菌、抗
                                                     1  材料与方法
   肿瘤、 抗 病 毒、 增 强 免 疫 等 ( Manivasagana et al.ꎬ
   2014)ꎮ 李飞娜等(2017) 从澳门红树林植物中分
   离到 192 株内生放线菌ꎬ其中获得 2 株放线菌新                        1.1 材料
   种ꎬ6 株潜在放线菌新种中 5 株具有抗菌活性ꎮ 有                            所用材料为 7 种伴生植物样品:海马齿( Sesu ̄
   研究报道ꎬ海洋放线菌 ACMA006 的发酵产物具有                        vium portulacastrum)、厚藤( Ipomoea pes ̄caprae)、鱼
   很强的抗肿瘤活性和较好的抑菌活性( 袁献温和                            藤( Derris trifoliata)、曼陀罗( Datura stramonium)、
   杨瑞丽ꎬ2009)ꎮ 有关微生物次级代谢产物的药理                         苦郎树 ( Clerodendrum inerme)、 猩 猩 草 ( Euphorbia
   活性报道很多( 李菲等ꎬ2017ꎻ袁献温和杨瑞丽ꎬ                         cyathophora)、弯枝黄檀( Dalbergia candenatensis)ꎮ
   2009)ꎬ但对于微生物抗衰老方面的研究则相对较                          材料由广西中医药大学高程海研究员鉴定ꎮ 样品
   少ꎮ 线虫是经典模式生物ꎬ具有生命周期短、易培                           于 2017 年 7 月采集于海南西海岸的红树林ꎬ经纬
   养、易观察、基因组容量小且图谱清晰等优势( 吕                           度、物种编号、植物种类及组织等信息见表 1 所
   婷ꎬ2014)ꎬ目前已广泛应用到抗衰老药物的筛选                          示ꎮ 分别采取花、茎、叶和胚轴ꎬ先用无菌水冲洗
   和研究过程中( 吕婷ꎬ2014ꎻ王艳菊等ꎬ2014)ꎮ 随                     样品表面 3 遍ꎬ立即装入密封采样袋ꎬ置于采样冰
   着社会的发展和人们生活水平的不断提高ꎬ人口                             盒中 24 h 内送回实验室ꎻ然后进行研磨、稀释涂

   老龄化已成为当前不可阻挡的趋势( 薛晓利等ꎬ                            布、培养ꎮ 野生秀丽线虫用于本研究抗衰老活性
   2017)ꎮ 2010 年全国 60 岁以上的老年人口占人口                    的初步筛选ꎬ由广西科学院汪斌博士惠赠ꎮ

   总数的 13.26%ꎬ预计到 21 世纪中叶ꎬ将达到 4.5                    1.2 方法
   亿ꎬ约占总人口的 1 / 3( 曾尔亢等ꎬ2012)ꎮ 由此可                   1.2.1 伴生植物样品的处理  去除伴生植物表面的
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