Page 179 - 《广西植物》2021年第11期
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ϟϟ 期 姚绍嫦等᧥ 牛大力块根糖积累及其相关酶活性变化研究 ϟ ँ ࿗ ϟ
斛多糖含量也被证明与蔗糖转化酶及蔗糖合酶活 合并 ሕ 次上清液至 ጢԡԡ ቝᓂ 容量瓶ᖔ用 ऐԡᠮ乙醇定
性相关ྉ ۼᔀᔽ ᔀᡷ ᑕᖔ ԡԡᎮଫ王博等ᖔԡԡँɯᤥ 然而ᖔ 容ᤥ 取上清液 ϟԡ ቝᓂ 于 ϟԡԡ ቝᓂ 试管中ᖔ依次加
目前对于牛大力块根糖类物质积累与蔗糖代谢酶 入蒸馏水 ϟጢ ቝᓂ 与 ᤃጢ ቝᓂ 蒽酮试剂ᖔ混匀后放置
活性之间的相关性未见研究报道ᤥ 因此ᖔ本研究 ϟጢ ቝᔽႿᖔ在 ᤃԡ Ⴟቝ 处测定吸光度ᤥ 同时ᖔ取 ԡ ጲ
以道地产区的牛大力为材料ᖔ分析牛大力块根发 ϟԡԡ ဂ੫ 葡萄糖用相同方法测定吸光度ᖔ做成标准
育过程中的淀粉ܦ多糖ܦ可溶性糖与蔗糖等含量的 曲线ᤥ 据此计算样品中的可溶性糖含量ᤥ 计算公
动态变化ᖔ研究催化蔗糖合成ܦ代谢的相关酶在块 式如下ᤥ
根糖类物质积累中发挥的作用ᖔ并探讨它们的相 可溶性糖含量ྉᠮɯᢉ ࣷġྉႬᣰ ᐹɯᣰ ྉ۩ġϟԡ ɯġϟԡԡᤥ
ᤃ
关性ᖔ研究结果可为今后深入研究牛大力多糖类 式中᧥ ࣷ 为根据标准曲线查到 的 葡 萄 糖 量
成分积累调控机制提供理论依据ᖔ并为提高牛大 ྉဂ੫ɯଫႬ 为样品提取液体积ྉቝᓂɯଫᐹ 为显色时取样
力药材的产量与品质提供参考ᤥ 品体积ྉቝᓂɯଫ۩ 为样品重量ྉ੫ɯᤥ
ϟሕ 淀粉含量测定方法জ 参考β 植物生理学实验
ϟজ 材料与方法 指导ଭ的方法ྉ 高俊凤ᖔԡԡᤃɯᖔ稍有修改ᤥ 用蒸馏
水将上述的可溶性糖含量测定提取的残渣转移至
ϓॹϓ 材料 ጢԡԡ ቝᓂ 容量瓶中ᖔ沸水浴 ϟጢ ቝᔽႿᖔ冷却后加入 ँ
牛大力来源于广西药用植物园科研基地ᖔ经 ቝᆍኼᓂ 高氯酸 ԡ ቝᓂᖔ沸水浴 ϟጢ ቝᔽႿᖔ加蒸馏水
᥋ϟ
广西中医药研究院方鼎研究员鉴定为豆科鸡血藤 ࿗ԡ ቝᓂᖔ࿗ ԡԡԡ ʢኼቝᔽႿ 离心 ϟԡ ቝᔽႿᖔ收集上清液ᤥ
᥋ϟ
属美丽鸡血藤ྉ ࣷᐹᤀᤀᓣʗᡥᐹ ᡓᓣዞᔠᅳᐹɯᤥ 将牛大力种子 重复提取残渣两次ྉ 每次 ϟԡ ቝᔽႿɯᖔ合并 ሕ 次上清
置于光照培养箱内于ྉᤃōɯቩ 条件下进行催芽ᖔ 液于 ጢԡԡ ቝᓂ 容量瓶ᖔ用蒸馏水定容ᤥ 取上清液
待种子露白后将种子播种至温室大棚的沙床中育 ԡ ቝᓂ 稀释 ϟԡ 倍后ᖔ加入蒽酮试剂 ጢԡ ቝᓂᖔ沸水
苗ᤥ 待幼苗长至三片真叶时ᖔ将幼苗移栽至种植 浴 ϟԡ ቝᔽႿᖔ冷却后在 ᤃԡ Ⴟቝ 处测定吸光度ᖔ计算
盆中ᖔ栽培管理条件一致ᤥ 移栽后ᖔ每隔半年取样 淀粉含量ᤥ 计算公式如下ᤥ
ᤃ
ϟ 次ᖔ从 ԡϟᎮ 年 ᤃ 月 ϟጢ 日至 ԡϟँ 年 ϟ 月 ϟጢ 日ᖔ 淀粉含量ྉᠮɯᢉ ࣷġྉႬᣰ ᐹɯġԡँᣰ ྉ۩ġϟԡ ɯġϟԡԡᤥ
共取样 ᤃ 次ᖔ每次随机选取 ϟԡ 株进行取样ᤥ 取样 式中᧥ԡँ 为由葡萄糖换算为淀粉的系数ଫࣷ
时先将植株整株挖起ᖔ清洗干净根系ᖔ从中选择有 为根据标准曲线查到的葡萄糖量ྉဂ੫ɯଫႬ 为样品
代表性的根ᖔ切取中部同一部位长度为 ϟԡ ዹቝ 作为 提取液体积ྉቝᓂɯଫᐹ 为显色时取样品体积ྉቝᓂɯଫ
样品ᖔ从样品中切取长度为 ዹቝ 的根ᖔ切成约 ԡጢ ۩ 为样品重量ྉ੫ɯᤥ
ዹቝġԡጢ ዹቝ 的小块ᖔ将 ϟԡ 株植株的样品充分混合 ϟ࿗ 蔗糖含量测定方法জ 参考β 植物生理学实验
后立即放入液氮中ᖔ带回实验室ᖔ放入ͱऐԡ ቩ 超低 手册ଭ的方法ྉ 上海植物生理学会ᖔϟँऐጢɯᖔ稍有修
温冰箱保存备用ଫ剩下的样品ྉऐ ዹቝɯ 用于块根生 改ᤥ 采用蒽酮比色法进行测定ᤥ 称取 ԡ ੫ 烘干
长指标测定ᤥ 样品ᖔ研碎ᖔ加入 ऐԡᠮ乙醇溶液 ᤃԡ ቝᓂᖔ转移到离
ϓॹԣ 方法 心管中ᖔ置于 ऐԡ ቩ 水浴中 ሕԡ ቝᔽႿᖔ振荡 ሕጲጢ 次ᖔ冷
ϟϟ 牛大力的块根生长指标测定জ 利用排水法 却后ᖔ࿗ ԡԡԡ ʢኼቝᔽႿ 离心 ϟԡ ቝᔽႿᖔ收集上清液ᤥ 重
᥋ϟ
测量牛大力块根的体积ᤥ 利用电子天平称量块根 复提取残渣两次ྉ 每次 ϟԡ ቝᔽႿɯᖔ合并 ሕ 次上清液
的鲜重ᖔ之后将块根置于 ऐԡ ቩ 恒温烘箱烘干至恒 于 ጢԡ ቝᓂ 容量瓶ᖔ用 ऐԡᠮ乙醇定容ᤥ 吸取 ϟԡ ቝᓂ
重后称量其干重ᖔ计算折干率ᖔ计算公式如下ᤥ 提取液于试管中ᖔ加入 ሕԡᠮ ᨃ̀ 溶液 ԡϟ ቝᓂᖔ沸
折干率ྉᠮɯᢉ 干重 ᣰ 鲜重ġϟԡԡᤥ 水浴 ϟԡ ቝᔽႿᖔ冷却至室温ᤥ 加入蒽酮试剂 ጢԡ ቝᓂᖔ
ϟ 可溶性糖含量测定方法জ 参考β 植物生理学 混匀后 ࿗ԡ ቩ 保温 ϟ ቝᔽႿᖔ于 ᤃԡ Ⴟቝ 波长测定吸光
实验手册ଭ 的方法ྉ 上海植物生理学会ᖔϟँऐጢɯᖔ稍 度ᤥ 同时ᖔ取 ԡ ጲ ϟԡԡ ဂ੫ 蔗糖于一系列试管中ᖔ加
有修改ᤥ 采用蒽酮比色法测定ᖔ称取烘干样品 ԡ 入 ԡϟ ቝᓂ ሕԡᠮ ᨃ̀ 以相同方法显色ᖔ做成标准曲
੫ᖔ加入 ऐԡᠮ乙醇 Ꭾԡ ቝᓂ 匀浆ᖔ转移至 ϟԡԡ ቝᓂ 离 线ᤥ 据此计算样品中的蔗糖含量ᤥ
᥋ϟ ᤃ
心管中ᖔऐԡ ቩ 水浴 ሕԡ ቝᔽႿᖔ࿗ ԡԡԡ ʢኼቝᔽႿ 离心 ϟԡ 蔗糖含量ྉᠮɯᢉ ࣷġྉႬ ᣰ ᐹɯᣰ ྉ۩ġϟԡ ɯ ġϟԡԡᤥ
ቝᔽႿᖔ收集上清液ᤥ 重复提取两次ྉ 每次 ϟԡ ቝᔽႿɯᖔ 式中᧥ࣷ 为根据标准曲线查到的蔗糖量ྉဂ੫ɯଫ
