Page 99 - 《广西植物》2021年第4期

࿗ 期 韦莉等᧥ 花生类受体蛋白激酶基因 ዛ၊ଧዛᣞϟ 的克隆及原核表达 ጢ ऐ ϟ

黑色下划线代表用于原核表达研究的序列ଫ 红色圈代表预测的跨膜区域ྉϟሕ ጲ ሕԡ ᑕᑕɯଫ 红色线条代表 ᓂ኏኏શఋᡸ԰ଫ 绿色框代表
୩ఋ᣽᥋ାዶ᣽ϟ᥋᤟ᔽҴᔀᤥ
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图 ϟԡজ ዶၤାዶ᣽ϟ 蛋白区域划分及原核表达蛋白序列选择
èᔽ੫঎ ϟԡজ ዶၤାዶ᣽ϟ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ ஦ᔽᔀ᤟ʛ ʛᔽ׹ᔽ༁ᔽᆍႿ ᑕႿʛ ༁ᔀ᤟ᔀዹᡷᔽᆍႿ ᆍ஦ ᡱʢᆍҴᑕʢᢃᆍᡷᔽዹ ᔀ଴ᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ ༁ᔀीࣼᔀႿዹᔀ༁

蛋白ଫ为了获得可溶性的重组蛋白以检测 ዶၤାዶ᣽ϟ
可能的激酶活性ᖔ本研究选择避开跨膜区域的疏
水氨基酸残基ᖔ构建了含有预测为激酶域序列的
重组质粒 ᡱ᥈ጶᣮᤃᡱ᥋ϟ᥋ዛ၊ଧዛᣞϟ᥋ऊ᧕ᤥ 由于重组蛋白
的原核表达主要受温度ܦ᧧۪ఋ᥈ 浓度和诱导时间的
影响ྉ李晶等ᖔ԰ԡϟᎮɯᖔ本研究结果发现在 ሕᎮ ቩ 和

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ዶၤାዶ᣽ϟ᥋ऊ᧕ 重组 蛋 白ଫ 在 ϟᤃ ቩ 条件下ᖔ 在不同
图 ϟϟজ 菌液 ۪ऊ኏ 检测电泳图
᧧۪ఋ᥈ 浓度诱导下ᖔዶၤାዶ᣽ϟ᥋ऊ᧕ 均可成功表达ᖔ说
èᔽ੫঎ ϟϟজ ʛᔀᡷᔀዹᡷᔽᆍႿ ᆍ஦ ʢᔀዹᆍቝᤦᔽႿᑕႿᡷ ᡱ᤟ᑕ༁ቝᔽʛ
ᡱ᥈ጶᣮ᥋ᤃᡱ᥋ϟ᥋ዛ၊ଧዛᣞϟ᤬ऊ᧕ 明温度是诱导表达 ዶၤାዶ᣽ϟ᥋ऊ᧕ 的关键ᤥ