Page 126 - 《广西植物》2021年第7期

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卢昌华ᖔ 邓文静ᖔ 曾建荣ᖔ 等঎ 广藿香 Þۗۗ୒ 基因原核表达及茉莉酸甲酯对 Þۗۗ୒ 表达量的影响 ЏȮ૒঎ 广西植物ᖔ԰ԡ԰ϟᖔ
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广藿香 Þۗۗ୒ 基因原核表达及茉莉酸甲酯

对 Þۗۗ୒ 表达量的影响

卢昌华 ᕷ 邓文静 ᕷ 曾建荣 ᕷ 刘键锺 ᕷ 张宏意 ϟᕷ԰ᕷሕ ᕷ 何梦玲 ϟᕷ԰ᕷሕ ᕷ 严寒静 ϟᕷ԰ᕷሕ᥍
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ྉϟ঎ 广东药科大学 中药学院ᖔ 广州 ጢϟԡԡԡᤃଫ ԰঎ 国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室ᖔ
广州 ጢϟԡԡԡᤃଫ ሕ঎ 中药材国家现代农业产业技术体系 广州综合试验站ᖔ 广州 ጢϟԡԡԡᤃ ɯ
摘জ 要ᧅ 法尼基焦磷酸合酶ྉ஦ᑕʢႿᔀ༁ᢃ᤟ ʛᔽᡱၤᆍ༁ᡱၤᑕᡷᔀ ༁ᢃႿᡷၤᑕ༁ᔀᖔ è۪۪୩ɯ是广藿香甲羟戊酸途径中萜类物质生物合
成的关键酶ᖔ其催化异戊二烯焦磷酸ྉ᧧۪۪ɯ 和二甲基烯丙基焦磷酸ྉ᧕ᥘዶ۪۪ɯ 合成萜类物质前体法尼基焦
磷酸ᤥ 为了进一步研究广藿香萜类合成途径的分子机制ᖔ该文通过逆转录聚合酶链式反应获得 Þۗۗ୒ 基因
的 ዹ᧕શዶ 序列ᖔ利用生物信息学软件预测 Þۗۗ୒ 编码蛋白的理化性质ܦ结构和功能ᤥ 结果表明᧥ྉϟɯ 该序列
的开放阅读框全长 ϟ ԡጢԡ ᤦᡱᖔ编码 ሕ࿗ँ 个氨基酸ᖔ预测分子量为 ࿗ԡ ᣽᧕ᖔ等电点为 ጢ঎࿗ሕᖔ存在一个结构域ᖔ参
与异戊二烯化合物的合成ᖔ不存在信号肽ᖔ亚细胞定位于细胞质ଫ系统发育分析结果显示ᖔ广藿香 Þۗۗ୒ 氨
基酸序列和丹参ྉ୒ᐹᤀצᔠᐹ ቂᔠᤀᡙᔠᅳʗʗ၊ᔠऊᐹɯܦ撒尔维亚ྉ୒ॹ ᅳஏஏᔠዞᔠႥᐹᤀᔠ໧ɯ的氨基酸序列亲缘关系最近ᤥྉ԰ɯ使用无缝克
隆技术构建 ᡱጶఋ᥋ሕ԰ᤦ᥋Þۗۗ୒ 原核表达载体ᖔ并导入菌株 ାᓂ԰ϟྉ᧕ጶሕɯ 中ᖔ考察不同浓度异丙基᥋Ꮗ᥋᧕᥋硫代半乳
糖苷ྉ᧧۪ఋ᥈ɯ对诱导融合蛋白的表达量的影响ᤥ 结果发现融合表达蛋白以包涵体形式存在沉淀中ᖔ࿗ 个浓度
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的 ᧧۪ఋ᥈ 诱导蛋白表达效果差异不明显ᤥྉሕɯ采用荧光定量技术分析 ԡ঎ϟԡܦԡ঎԰ጢ ቝቝᆍ᤟ኼᓂ ᥘᔀȮዶ 对 Þۗۗ୒ 基
因表达水平的影响ᖔ发现 ԡ঎ϟԡ ቝቝᆍ᤟ኼᓂ ᥘᔀȮዶ 诱导后 Þۗۗ୒ 基因的表达量趋势是先升高后降低再升高再降
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低ଫԡ঎԰ጢ ቝቝᆍ᤟ኼᓂ ᥘᔀȮዶ 诱导后 Þۗۗ୒ 基因的表达量趋势是先降低后升高再降低ᤥ 因此ᖔ推测植物体内
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ᥘᔀȮዶ 浓度的变化能影响 Þۗۗ୒ 基因的表达ᖔ高浓度具抑制作用ᖔ低浓度具促进作用ᤥ 本研究为广藿香萜类
合成途径的研究奠定基础ᖔ以及为后续基因功能验证提供理论参考ᤥ
关键词ᧅ 广藿香ᖔ 法尼基二磷酸ᖔ 无缝克隆ᖔ 茉莉酸甲酯ᖔ 荧光定量 ۪ऊ኏
中图分类号ᧅ ͐ँ࿗ሕজ জ 文献标识码ᧅ ዶজ জ 文章编号ᧅ ϟԡԡԡ᥋ሕϟ࿗԰ྉ԰ԡ԰ϟɯԡᎮ᥋ϟϟጢጢ᥋ϟԡ

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收稿日期ᧅ ԰ԡ԰ԡͱԡϟͱԡँ
基金项目ᧅ 国家自然科学基金ྉऐϟᎮᎮሕऐ԰ँɯ Џ୩ࣼᡱᡱᆍʢᡷᔀʛ ᤦᢃ ᡷၤᔀ શᑕᡷᔽᆍႿᑕ᤟ શᑕᡷࣼʢᑕ᤟ ୩ዹᔽᔀႿዹᔀ èᆍࣼႿʛᑕᡷᔽᆍႿ ᆍ஦ ऊၤᔽႿᑕ ྉऐϟᎮᎮሕऐ԰ँɯ૒ᤥ
作者简介ᧅ 卢昌华ᖔྉϟँँ࿗ͱɯᖔ硕士研究生ᖔ主要从事生药学研究工作ᖔྉጶ᥋ቝᑕᔽ᤟ɯऐᤃ԰ँᎮऐँԡሕ݀ीी঎ዹᆍቝᤥ
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通信作者ᧅ 严寒静ᖔ博士ᖔ教授ᖔ硕士研究生导师ᖔ主要从事中药资源品质评价研究工作ᖔྉጶ᥋ቝᑕᔽ᤟ɯᢃᑕႿၤᑕႿᢼᔽႿ੫ϟ԰ϟϟ݀ϟᤃሕ঎ዹᆍቝᤥ