Page 22 - 《广西植物》2022年第11期

ϟ ऐ ϟ ࿗ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗԰ 卷
ሕࣕᖔ 反 向 引物为 ጢࣕ᥋ዶ᥈᥈ऊऊఋఋऊఋ᥈᥈ఋఋ᥈ఋዶ᥈ዶऊ᥈᥋ 表 ϓই 水稻成蛋白家族 फቴ௴᤬ۗࣷቴ 引物设计
ሕࣕᤥ 扩增 的总反应体系为 ϟԡ ဂᓂᖔ 其中含有 ԰ ġ ఋᑕᤦ᤟ᔀ ϟজ ी኏ఋ᥋۪ऊ኏ ᡱʢᔽቝᔀʢ ʛᔀ༁ᔽ੫Ⴟ ᆍ஦ ᨃ༁è̀༁ ᔽႿ ʢᔽዹᔀ
᥋ϟ
୩ɟା኏ ᥈ʢᔀᔀႿ ጢ ဂᓂܦ԰঎ጢ ဂቝᆍ᤟ኼᓂ 正向引物 ϟဂᓂܦ 基因名称 引物方向
基因 ᧧᧕ 引物序列
᥈ᔀႿᔀ ۪ʢᔽቝᔀʢ
԰঎ጢ ဂቝᆍ᤟ኼᓂ 反向引物 ϟဂᓂܦ模板 ዹ᧕શዶ ሕ ဂᓂᖔ设 Ⴟᑕቝᔀ ᥈ᔀႿᔀ ᧧᧕ ʛᔽʢᔀዹᡷᔽᆍႿ ۪ʢᔽቝᔀʢ ༁ᔀीࣼᔀႿዹᔀ
᥋ϟ
ሕ 次重复ᤥ 扩增基因的反应循环数为 ࿗ԡ 个ᖔ۪ऊ኏ ᧣໧Þ̵ϟ ᧣໧ԡϟ੖ԡऐँᎮᎮԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ऊऊऊዶዶఋ᥈ዶఋ᥈ऊऊዶऊዶ᥈ఋఋ᥈
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条件᧥ँጢ ቩ 下预变性 ԰ቝᔽႿᖔँጢቩ 下变性 ϟጢ ༁ᖔጢጢ
᧣໧Þ̵԰ ᧣໧ԡ࿗੖ԡ࿗ᤃϟऐԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ऊ᥈ऊዶऊऊ᥈ዶዶዶऊዶ᥈ऊዶ᥈ዶ᥈ऊዶ᥈
ቩ 下退火 ϟጢ ༁ᖔᎮ԰ ቩ 下延伸 ԰ԡ ༁ᤥ 通过 ी۪ऊ኏ ༁ᆍ஦ᡷ
۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ఋऊ᥈ዶఋऊዶఋऊఋఋऊఋऊ᥈ఋऊऊዶ᥈ऊऊ
࿗঎ԡ 软件对数据进行分析ᤥ ᧣໧Þ̵ሕ ᧣໧ϟԡ੖ԡϟϟँሕԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ఋऊऊዶዶዶऊఋ᥈ዶ᥈ዶ᥈ఋ᥈ఋఋఋ᥈ऊ
۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ऊఋఋ᥈ఋఋ᥈ఋఋఋऊఋዶ᥈ऊఋऊ᥈ዶ᥈
԰জ 结果与分析 ᧣໧Þ̵࿗ ᧣໧ϟԡ੖ԡሕ࿗Ꭾऐԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ᥈ዶऊऊఋఋዶ᥈ఋዶዶዶ᥈ዶఋ᥈᥈ऊఋऊ
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᧣໧Þ̵ጢ ᧣໧ԡᎮ੖ԡጢँᤃሕԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ऊ᥈ऊఋऊఋఋऊऊ᥈ऊዶዶዶఋఋऊఋఋऊऊ
ԣॹϓ 水稻 ᅳ໧ஏ၊ϓ 突变体表型
۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ዶ᥈ఋዶዶఋऊऊऊఋ᥈ఋዶऊఋऊዶఋऊऊఋऊ
以水稻 ᅳ໧ஏ၊ϟ 突变体以及野生型植株进行固培 ᧣໧Þ̵ᤃ ᧣໧ԡऐ੖ԡ԰ऐԡ԰ԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ఋऊఋ᥈ఋऊዶዶዶ᥈ఋఋఋऊዶዶ᥈ఋ᥈ऊऊ᥈
和液培处理观察水稻主根根毛表型发现ᖔᅳ໧ஏ၊ϟ 突变 ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ᥈᥈᥈ዶఋ᥈᥈ዶዶዶఋ᥈ዶఋ᥈ዶዶዶ᥈᥈ఋऊ
体地上部分长度比野生型短ᖔ并且在固体培养处理 ᧣໧Þ̵Ꭾ ᧣໧ԡ԰੖ԡᎮँ࿗ँԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ఋऊዶዶ᥈ዶዶዶऊऊ᥈ऊऊऊ᥈ዶఋ᥈᥈
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后野生型和突变体都有一定伸长 ྉ 图 ϟ᧥ ዶ ͱ ାɯᤥ
᧣໧Þ̵ऐ ᧣໧ԡሕ੖ԡ԰ԡ࿗ϟԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ऊዶዶऊዶዶऊ᥈᥈᥈ዶ᥈ऊዶऊ᥈ఋऊዶዶఋ᥈ऊ᥈
ᅳ໧ஏ၊ϟ 突变体主根较野生型长ᖔ且在固体培养处理后 ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ఋ᥈᥈ऊ᥈ዶఋ᥈ఋఋऊఋ᥈ऊ᥈ऊऊఋఋऊఋఋ᥈᥈
野生型和 ᅳ໧ஏ၊ϟ 突变体主根根长都有一定增加ྉ图 ᧣໧Þ̵ँ ᧣໧ԡऐ੖ԡ࿗ሕϟ԰ԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ᥈ऊዶఋఋऊऊऊዶዶ᥈᥈ዶఋ᥈᥈ዶ᥈᥈ఋ
ϟ᧥ऊͱ᧕ɯᤥ ᅳ໧ஏ၊ϟ 突变体主根在 ϟᣰ ԰ ᥘ୩ 液体培养条 ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ऊఋఋऊዶዶఋఋऊዶ᥈ఋ᥈ऊዶዶ᥈ऊఋऊऊ
᧣໧Þ̵ϟԡ ᧣໧ԡ԰੖ԡϟᤃϟϟԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ऊ᥈ऊऊዶఋऊఋఋఋऊఋఋऊఋ᥈᥈ዶऊऊዶ᥈
件下无根毛ᖔ当突变体在 ϟᣰ ԰ ᥘ୩ 固体培养基上生长
۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ఋఋऊऊ᥈ఋ᥈᥈ዶዶఋ᥈ዶऊఋऊ᥈ዶఋዶዶऊ
时ᖔ主根根毛表型得到一定恢复且差异显著ྉ图 ϟ᧥ ᧣໧Þ̵ϟϟ ᧣໧ԡᎮ੖ԡጢ࿗ጢጢԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ᥈ऊऊఋऊዶఋऊఋऊఋ᥈ఋ᥈ऊዶ᥈ऊఋऊ
ጶͱèɯᤥ 这表明 ᧣໧Þ̵ϟ 基因参与水稻生长发育的调 ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ऊऊዶዶఋऊऊዶऊዶऊఋఋ᥈ዶऊऊऊዶఋ᥈
控ᖔ在主根根毛的生长发育中具有关键作用ᖔ并且 ᧣໧Þ̵ϟ԰ ᧣໧ԡ࿗੖ԡ԰࿗ጢԡԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ऊఋ᥈᥈ఋఋఋऊዶ᥈᥈ऊఋఋ᥈ఋఋऊఋऊऊऊ
۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ᥈ऊऊዶዶऊऊ᥈ऊऊఋఋఋऊఋऊዶऊዶዶఋ᥈
ᅳ໧ஏ၊ϟ 突变体在不同环境下表型发生改变表明环境
᧣໧Þ̵ϟሕ ᧣໧ԡᎮ੖ԡጢऐऐ԰ԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ఋఋ᥈ऊऊఋఋऊ᥈ዶ᥈ዶ᥈ዶ᥈ఋ᥈᥈ዶఋ᥈
因素通过与 ᧣໧Þ̵ϟ 基因的突变共同作用改变水稻 ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ఋऊ᥈᥈ዶఋ᥈ዶఋऊఋऊఋఋఋዶዶऊऊዶऊ᥈
主根根毛表型ᤥ 此外ᖔ液培处理下的 ᅳ໧ஏ၊ϟ 侧根数量 ᧣໧Þ̵ϟ࿗ ᧣໧ԡጢ੖ԡϟԡ࿗ԡԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ዶ᥈᥈᥈ዶ᥈᥈ఋ᥈ఋ᥈ऊఋఋዶऊఋ᥈᥈

和长度均有增加ᤥ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ఋዶዶ᥈ऊఋऊఋఋऊऊఋऊዶఋఋ᥈᥈ఋ᥈
ԣॹԣ फቴ௴᤬ۗࣷቴ 分析不同环境下野生型和 ᅳ໧ஏ၊ϓ 突 ᧣໧Þ̵ϟጢ ᧣໧ԡँ੖ԡጢϟᎮᤃԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ఋ᥈ऊዶዶऊऊዶ᥈᥈ዶ᥈ዶዶऊዶዶ᥈᥈ఋ᥈
۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ऊ᥈ऊዶዶዶఋ᥈᥈ఋዶఋऊ᥈ऊዶዶ᥈ऊዶऊ
变体成蛋白家族基因成员表达量变化
᧣໧Þ̵ϟᤃ ᧣໧ԡ԰੖ԡᎮሕँϟԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ᥈ऊዶ᥈᥈ऊዶዶఋऊ᥈᥈ዶఋ᥈ዶዶఋ᥈ऊ
研究认为ᖔ结构高度相似的蛋白可能行使类 ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ዶఋ᥈᥈ዶऊऊऊఋ᥈ዶऊఋఋ᥈ఋ᥈᥈ዶ᥈
似的功能ᖔ而同一家族成员结构功能往往类似ྉ 苏 ᧣໧Þ̵ϟᎮ ᧣໧ԡ࿗੖ԡϟԡԡሕԡԡ ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋è ऊ᥈ऊऊዶఋఋऊዶዶ᥈ዶዶ᥈ఋऊ᥈ऊऊ
宇ᖔ ԰ԡϟऐଫશᔽቝዹၤࣼҴ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟጢɯᤥ 因此ᖔ成蛋白家 ۪ʢᔽቝᔀʢ᥋኏ ఋఋఋ᥈᥈ዶఋఋ᥈᥈ऊዶ᥈ఋዶዶऊఋఋఋ᥈ఋ
族其他成员很可能在不同环境因素处理下 ᅳ໧ஏ၊ϟ
调ᖔ并且与野生型中 ᧣໧Þ̵ϟᤃ 和 ᧣໧Þ̵ϟᎮ 的表达趋
根毛表型恢复的过程中行使一定功能ᤥ 鉴于此ᖔ
本研究使用 ी኏ఋͱ۪ऊ኏ 技术对固培液培处理下的 势相反ᖔ因此 ᧣໧Þ̵ϟᤃ ܦ᧣໧Þ̵ϟᎮ 极有可能参与环境
野生型以及 ᅳ໧ஏ၊ϟ 突变体根部的成蛋白家族成员 表明其可能受到 ᧣໧Þ̵ϟ 的调控ଫ而 ᧣໧Þ̵ϟᎮ 大幅度
基因表达进行分析ᤥ 上与 ᅳ໧ஏ၊ϟ 突变体互作改变根毛表型这一过程ᤥ
从图 ԰ 可以看出ᖔ当培养条件由液培到固培中 通过比较固培环境与液培环境处理下 ᅳ໧ஏ၊ϟ
和野生型根部的 ᧣໧Þ̵໧ 表达量ᖔ进一步分析了不
时ᖔ ᅳ໧ஏ၊ϟ 突变体中 的 ᧣໧Þ̵ሕܦ ᧣໧Þ̵ጢܦ ᧣໧Þ̵ऐܦ
同环境处理下 ᧣໧Þ̵໧ 表达趋势ᖔ结果见图 ሕᤥ 从图
᧣໧Þ̵ϟԡܦ᧣໧Þ̵ϟϟܦ ᧣໧Þ̵ϟሕܦ ᧣໧Þ̵ϟᎮ 表达量上调ᖔ
ሕ 可以看出ᖔ从水培到固培中野生型以及 ᅳ໧ஏ၊ϟ 体
᧣໧Þ̵ϟܦ ᧣໧Þ̵԰ܦ ᧣໧Þ̵࿗ܦ ᧣໧Þ̵ϟ԰ܦ ᧣໧Þ̵ϟ࿗ܦ ᧣໧Þ̵ϟᤃ
表达量下调ᖔ而 ᧣໧Þ̵ᤃܦ᧣໧Þ̵Ꭾܦ᧣໧Þ̵ँ 表达量无变 内 ᧣໧Þ̵ሕܦ ᧣໧Þ̵ጢܦ ᧣໧Þ̵Ꭾܦ ᧣໧Þ̵ϟԡܦ ᧣໧Þ̵ϟϟܦ
化ᤥ 其中ᖔ᧣໧Þ̵ϟᤃ 在突变体中表达量大幅度下调ᖔ ᧣໧Þ̵ϟሕܦ᧣໧Þ̵ϟጢ 表达趋势一致都呈上升趋势ᖔ