Page 55 - 《广西植物》2023年第5期
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５ 期               高丹等: 半蒴苣苔属植物染色体制片优化及染色体数目和倍性研究                                            ８ ３ ５

            单座苣苔( Ｈ. ｏｖａｌｉｆｏｌｉａ)３ 种且这些研究仅限于染                   ｓｕｂｃａｐｉｔａｔａ)、弄岗半蒴苣苔( Ｈ. ｌｏｎｇｇａｎｇｅｎｓｉｓ)、龙
            色体 数 目 和 倍 性 的 报 道 ( Ｈｓｕꎬ１９６８ꎻ 鲁 元 学 等ꎬ            州 半 蒴 苣 苔 ( Ｈ. ｌｏｎｇｚｈｏｕｅｎｓｉｓ)、 江 西 半 蒴 苣 苔
            ２００２ꎻ曹丽敏等ꎬ２００３)ꎮ 然而ꎬ染色体数目和倍性                       (Ｈ. ｓｕｂａｃａｕｌｉｓ ｖａｒ. ｊｉａｎｇｘｉｅｎｓｉｓ)、 华 南 半 蒴 苣 苔
            有何进化模式ꎬ与半蒴苣苔属物种进化之间有何                              (Ｈ. ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉｓ)和永福半蒴苣苔(Ｈ. ｙｏｎｇｆｕｅｎｓｉｓ)这
            关系ꎬ该属植物核型研究困难阻碍了这些问题的                              ６ 种植物为对象ꎬ采用叶片水培生根的方法对这 ６

            进一步研究ꎮ                                             种植物进行细胞学研究ꎬ并在多种不同条件下对
                 Ｈｓｕ(１９６８) 在研究台湾半蒴苣苔时选用了植                      这 ６ 种半蒴苣苔属植物进行实验:(１) 探索该属染

            物的花芽和根尖作为实验材料且均不作预处理ꎬ                              色体制片的适宜条件ꎻ(２)基于 ６ 种半蒴苣苔的染
            仅报 道 了 染 色 体 二 价 体 数 目 ｎ ＝ １８ꎻ 鲁 元 学 等             色体计数结果ꎬ结合已报道物种数据探讨该属染
            (２００２)在研究贵州半蒴苣苔时选用了植物的根尖                           色体的变异情况ꎻ(３)结合分子系统学重建该属染

            作为实验材料ꎬ用 ０.１％的秋水仙素进行预处理 ２                          色体数目的进化历史ꎬ探讨其进化模式与物种进
            ｈꎬ用 １ ∶ １ 的 １ ｍｏｌＬ 盐酸和 ４５％冰醋酸混合液                 化的关系ꎮ 本研究将对半蒴苣苔属甚至具有类似
                                 ￣１
            在 ６０ ℃ 水浴锅内进行解离 ３０ ｓꎬ结果观察到染色                       叶片繁殖生物学特性类群的细胞学研究提供借鉴
            体不够分散ꎬ有些染色体存在相互粘连的现象ꎬ这                             意义ꎬ为进一步研究该类群的分类、系统演化和物
            可能与材料本身染色体为小型染色体以及实验过                              种形成等提供一些启示ꎮ
            程中预处理时间不够、解离时间过短有关ꎻ曹丽敏
            等(２００３)在研究单座苣苔时选用植物实生苗的根                           １  材料与方法
                                                  ￣１ 盐酸和
            尖作为实验材料ꎬ用 ２ ∶ １ 的 １ ｍｏｌＬ
            ４５％冰醋酸混合液在 ６０ ℃ 水浴锅内进行解离 ３０                        １.１ 材料
            ｓꎬ结果观察到染色体分散效果很差ꎬ染色体粘连                                 所涉及的研究材料来源如表 １ 所示ꎮ 现栽培
            现象十分明显ꎬ这可能与材料本身染色体为小型                              于南昌大学流域生态研究所系统与进化研究室温
            染色体以及解离时间过短有关ꎮ 由于半蒴苣苔属                             室内ꎮ 本研究凭证标本存放于南昌大学标本馆
            于小型染色体ꎬ本身就难以分散且不易观察( 李振                            (ＪＸＵ)中ꎮ
            宇和王印政ꎬ２００５)ꎬ解离时间过短又会使细胞壁                           １.２ 方法
            难以破开ꎬ染色体很难分散开、容易粘连在一起ꎬ                             １.２.１ 半蒴苣苔属植物染色体制片优化
            因此半蒴苣苔属植物的染色体制片仍不容易ꎮ 此                             １.２.１.１ 取材  从 ６ 种半蒴苣苔属植物上选取生长
            外ꎬ我们通过观察还发现半蒴苣苔属植物的根系                              状态良好的叶片ꎬ在室温下用清水培养 １０ ~ ２０ ｄꎬ
            十分细小且相互缠绕ꎬ很难直接得到良好的具有                              ２ ~ ３ ｄ 换 １ 次水ꎬ待叶片生根ꎬ选取生长良好的根
            分生组织的根尖ꎬ通过植株直接获取根尖材料研                              尖进 行 取 材ꎬ 在 ９: ３０—１０: ００、 １０: ００—１０: ３０、
            究染色体数目的方法比较困难ꎮ 因此ꎬ该属的染                             １０:３０—１１:００ 这 ３ 个时间段进行取样ꎮ
            色体数目研究有待于新的取材策略和制片方法的                              １.２.１.２ 预处理  将根尖浸入 ０.００２ ｍｏｌＬ           ￣１ 的

            优化ꎮ                                                ８￣羟基喹啉溶液中ꎬ以溶液浸没根尖为度ꎬ在室温
                 李振宇和王印政(２００５) 的研究发现ꎬ苦苣苔                       下预处理 ４ ~ ５ ｈꎮ
            科植物可以进行无性繁殖ꎬ只要很小的插穗就可                              １.２.１.３ 固定  先将处理后的根尖材料用纯水冲洗
            以繁殖成新的植株ꎬ而在扦插繁殖方式中又属叶                              ２ 次ꎬ再转入卡诺固定液[ Ｖ( 无水乙醇) ∶ Ｖ( 冰醋
            插最为常见ꎬ多数苦苣苔科植物都可以用叶片进                              酸)＝ ３ ∶ １]中ꎬ在 ４ ℃ 下固定 ３０ ｍｉｎꎮ
            行叶插繁殖且叶片还可以水插ꎬ只要将叶柄浸入                              １.２.１.４ 解离  先将固定后的根尖用无水乙醇洗 ２
            清水中就可逐渐生根出芽ꎮ 覃信梅等(２０２０) 在此                         次ꎬ再用纯水冲洗ꎬ之后转入 １ ｍｏｌＬ             ￣１  ＨＣｌ 中ꎬ在
            前石山苣苔属的细胞学研究中已经成功地通过叶                              ６０ ℃ 恒温金属浴锅中分别解离 ８、１０、１２ ｍｉｎꎮ
            片水培生根ꎬ我们通过实验发现半蒴苣苔属植物                              １.２.１.５ 染色  将解离后的根尖用纯水洗 ２ 次ꎬ每次
            也易通过叶片水培生根ꎮ 这为我们开展半蒴苣苔                             ５ ｍｉｎꎮ 接着ꎬ将根尖置于载玻片中间ꎬ用刀片从前
            属的细胞学研究提供了新的思路和方法ꎮ                                 端乳白色的分生区组织中切取尽可能薄的 １ 片ꎬ滴
                 本 研 究 以 半 蒴 苣 苔 属 的 半 蒴 苣 苔 ( Ｈ.              加少量改良苯酚品红染液ꎬ分别染色 １０、１５ ｍｉｎꎮ
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