Page 56 - 《广西植物》2023年第5期

８ ３ ６ 广 西 植 物 ４３ 卷
表 １ 材料来源及其染色体数目
Ｔａｂｌｅ １ Ｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ａｎｄ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｎｕｍｂｅｒｓ
染色体数目
序号 种类 采集地 凭证标本 Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ
Ｎｏ. Ｓｐｅｃｉｅｓ Ｌｏｃａｌｉｔｙ Ｖｏｕｃｈｅｒ ｎｕｍｂｅｒ
(２ｎ ＝ ２ｘ)
半蒴苣苔 江西婺源
１ 向小果等 ＸＸＧ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２０８０６ ３２
Ｈｅｍｉｂｏｅａ ｓｕｂｃａｐｉｔａｔａ Ｗｕｙｕａｎꎬ Ｊｉａｎｇｘｉ
弄岗半蒴苣苔 广西大新
２ 张丽果、严华、刘玉娟 ＺＬＧꎬ ＹＨꎬ ＬＹＪꎬ ２０２１４８２ ３２
Ｈ. ｌｏｎｇｇａｎｇｅｎｓｉｓ Ｄａｘｉｎꎬ Ｇｕａｎｇｘｉ
龙州半蒴苣苔 广西大新
３ 张丽果、严华、刘玉娟 ＺＬＧꎬ ＹＨꎬ ＬＹＪꎬ ２０２１４４９ ３２
Ｈ. ｌｏｎｇｚｈｏｕｅｎｓｉｓ Ｄａｘｉｎꎬ Ｇｕａｎｇｘｉ
江西半蒴苣苔 江西井冈山
４ 向小果等 ＸＸＧ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２０２７７ ３２
Ｈ. ｓｕｂａｃａｕｌｉｓ ｖａｒ. ｊｉａｎｇｘｉｅｎｓｉｓ Ｊｉｎｇｇａｎｇｓｈａｎꎬ Ｊｉａｎｇｘｉ
华南半蒴苣苔 广西贺州
５ 张丽果、严华、刘玉娟 ＺＬＧꎬ ＹＨꎬ ＬＹＪꎬ ２０２１５９４ ３２
Ｈ. ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉｓ Ｈｅｚｈｏｕꎬ Ｇｕａｎｇｘｉ
永福半蒴苣苔 广西植物研究所
６ 张强 ＺＱꎬ ２０２１９２０ ３２
Ｈ. ｙｏｎｇｆｕｅｎｓｉｓ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｂｏｔａｎｙ

１.２.１.６ 压片 对染色过后的材料进行常规压片ꎬ 目 ｎ ＝ １８ꎬ其二倍体染色体数目尚不清楚ꎬ此处暂
压片时用带橡皮头的铅笔垂直敲打ꎬ注意不要滑 以 ２ｎ ＝ ３６ 作为其染色体数目进行分析ꎮ 对于尚未
动盖玻片ꎬ这样染色体分散效果更好ꎮ 报道染色体数目的物种在性状编码时以缺失处
１.２.１.７ 镜检及染色体计数 将制作好的玻片在 理ꎮ 在此基础上ꎬ结合本研究的 ６ 种半蒴苣苔属
Ｌｅｉｃａ ＤＭ２５００ 显微镜下进行检测ꎬ挑选染色体分 植物的染色体数据ꎬ基于上述系统发育树ꎬ通过
散效果好的有丝分裂中期分裂相细胞ꎬ在 １００ 倍 ＲＡＳＰ ｖ. ４. ２(Ｙｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２０)软件ꎬ采用 Ｂａｙｅｓｉａｎ
油镜下进行观察和拍照ꎮ 染色体计数方法参照李 Ｂｉｎａｒｙ ＭＣＭＣ (ＢＢＭ)的方法进行染色体数目的祖

懋学和陈瑞阳(１９８５)的植物核型分析标准ꎮ 先状态重建ꎬ探究其可能的进化历史ꎮ
１.２.２ 半蒴苣苔属染色体数目祖先状态重建 为
探讨半蒴苣苔属植染色体数目的进化历史ꎬ本研 ２ 结果与分析
究以半 蒴 苣 苔 属 ２８ 种 及 其 近 缘 的 吊 石 苣 苔 属
(Ｌｙｓｉｏｎｏｔｕｓ)１３ 种和大苞苣苔属(Ａｎｎａ)３ 种植物为 ２.１ 半蒴苣苔属植物染色体制片优化
内类群ꎬ以紫花苣苔属 ( Ｌｏｘｏｓｔｉｇｍａ)２ 种植物为外 ２.１.１ 取样方法优化 ６ 种半蒴苣苔属植物如图 １
类群ꎬ基于下载自 ＮＣＢＩ 的核糖体 ＩＴＳ 和 ３ 个叶绿 所示ꎮ 由图 ２ 和图 ３ 可知ꎬ半蒴苣苔、弄岗半蒴苣
体 基 因 包 括 ｒｂｃＬ、 ｍａｔＫ 和 ｔｒｎＬ￣Ｆ ( 表 ２ )ꎬ 使 用 苔、龙州半蒴苣苔、江西半蒴苣苔、华南半蒴苣苔和
ＭＡＦＦＴ ｖ７. ４０７(Ｋａｔｏｈ ＆ Ｓｔａｎｄｌｅｙꎬ ２０１３)分别进行 永福半蒴苣苔 ６ 种植物通过叶片水培生根的方法得

矩阵排列ꎬ利用 ＦＡＳｃｏｎＣＡＴ￣Ｇ ｖ１.０４(Ｋüｃｋ ＆ Ｌｏｎｇｏꎬ 到了生长状态良好的根ꎬ通过此方法得到的根比土
２０１４) 将所有基因矩阵进行串联ꎬ通过 ＲＡｘＭＬ ｖ. 生的根更粗壮、更易取材且染色体更易被压散ꎮ
８. ２. １２(Ｓｔａｍａｔａｋｉｓꎬ ２０１４)构建最大似然(ｍａｘｉｍｕｍ ２.１.２ 取样时间优化 由表 ３ 和图 ４ 可知ꎬ９:３０—
ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄꎬＭＬ)树ꎬ碱基替代模型为 ＧＴＲＧＡＭＭＡꎬ经 １０: ００ 取材ꎬ根尖细胞分裂旺盛且染色体分散效

过１ ０００次 ｂｏｏｔｓｔｒａｐｓ 重复抽样估算支持率ꎮ 果良好ꎻ１０:００—１０:３０ 取材ꎬ染色体分散效果不如
本研 究 通 过 ＷｅｂＣｙｔｅ 数 据 库 ( ｈｔｔｐ: / / ｅｌｍｅｒ. ９:３０—１０:００ꎻ１０:３０—１１:００ 取材ꎬ观察到的分裂
ｒｂｇｅ.ｏｒｇ. ｕｋ / ｗｅｂｃｙｔｅ / ｗｅｂｃｙｔｅｉｎｔｒｏ. ｐｈｐ) 和 ＣＣＤＢ 数 相不多且分裂效果不好ꎮ
据 库 ( Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ Ｃｏｕｎｔｓ Ｄａｔａｂａｓｅꎬ ｈｔｔｐ: / / ｃｃｄｂ. ２.１.３ 解离时间优化 由表 ３ 和图 ４ 可知ꎬ在解离
ｔａｕ.ａｃ.ｉｌ/ ｂｒｏｗｓｅ / ) 对半蒴苣苔属及其近缘的吊石 时间为 ８ ｍｉｎ 时ꎬ观察到的染色体不够分散ꎬ出现
苣苔属、大苞苣苔属物种的染色体数目数据进行 粘连现象ꎬ计数时困难较大ꎻ在解离时间为 １０ ｍｉｎ
收集ꎮ 其中台湾半蒴苣苔仅报道染色体二价体数 时ꎬ 染色体分散效果良好ꎬ 便于计数ꎻ 在解离时间