Page 29 - 《广西植物》2020年第5期
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5 期                           徐祥林等: 罗汉果内生真菌多样性研究                                           6 2 5


                               表 4  罗汉果各组织中内生真菌的多样性指数
     Table 4  Shannon ̄Weiner index (H′) of endophytic fungi isolated from the different tissues of Siraitia grosvenorii

                                    雌株 Pistillate plant                   雄株 Staminiferous plant
    项目 Item
                         根          茎           叶        果实           根           茎          叶
                        Root       Stem        Leaf       Fruit       Root       Stem       Leaf
    多样性指数               0.69       0.61        0.15       0.41       0.11        0.35       0.35
    Shannon ̄Weiner
    index (H′)



                                 表 5  罗汉果各组织中内生真菌的相似性
             Table 5  Similarity of endophytic fungi isolated from the different tissues of Siraitia grosvenorii


                                         雌株 Pistillate plant              雄株 Staminiferous plant
    植株                  组织
    Plant               Tissue      茎           叶        果实           根           茎          叶
                                   Stem        Leaf       Fruit       Root       Stem       Leaf
    雌株                 根 Root      0.75        0.67        0.5        0.4        0.57       0.57
    Pistillate plant
                       茎 Stem                  0.67        0.5        0.4        0.86       0.57
                       叶 Leaf                             0.67       0.67        0.8         0.8
                      果实 Fruit                                        0.4        0.57       0.57
    雄株                 根 Root                                                    0.5         0.5
    Staminiferous plant
                       茎 Stem                                                               0.67


   作用ꎬ但这种技术仍然不能取代传统的形态学方                             株菌株鉴定为 9 个属ꎬ均归属于子囊菌门( Asco ̄
   法ꎬ且必须 以 形 态 学 为 基 础ꎮ 其 主 要 原 因 如 下:               mycota)ꎬ包含座囊菌纲( Dothideomycetes) 和子囊
   (1)进行序列比对的数据库需要不断完善ꎬ据估计                           菌纲( Sordariomycetes)ꎮ 其中ꎬ座囊菌纲真菌包含
   GenBank 中有 10% ~ 20%的真菌序列存在错误鉴                    3 科 3 属ꎻ子囊菌纲真菌包含 6 科 6 属ꎮ 此外ꎬ优
   定且每年不断有新的序列提交至数据库ꎬ而过多                             势属为刺盘孢属( Colletotrichum) 和镰刀菌属( Fu ̄

   的相似序列会给鉴定工作带来困难ꎮ (2) 核酸的                          sarium)ꎮ 刺盘孢属和镰刀菌属是普遍存在于植物
   完整性和纯度都会影响测序结果ꎬ当核糖体 DNA                           中的内生真菌ꎬ且刺盘孢属和镰刀菌属在许多植
   重复序列之间的纯合度很高时ꎬ直接测序可以真                             物中 也 均 为 优 势 属 ( 齐 静 等ꎬ 2014ꎻ Lou et al.ꎬ
   实反映 ITS 区域的序列ꎻ反之ꎬ各个重复序列之间                         2013ꎻ Durán et al.ꎬ 2005)ꎮ
   的差异较大时ꎬ采用 PCR 产物直接测定序列ꎬ可能                             雌株的内生真菌为 96 株ꎬ雄株的内生真菌为
   会由于测序仪读出多峰而导致无法得到正确的单                             54 株ꎬ其内生真菌的总定殖率和分离率均高于雄
   一序列ꎮ (3)对于某些物种ꎬ其 ITS 区序列可变的                       株ꎮ 目前对于雌雄异株植物内生真菌的分离及组
   程度相对不高ꎬ不足以用来分析其属种或组群间                             成分析的报道极少ꎬ贾敏等(2014) 对浙江天目山

   的差异ꎮ 因此ꎬ需要将 ITS 序列分析结果与真菌形                        地区雌雄株银杏内生真菌多样性的研究发现ꎬ雌
   态学特征相结合ꎬ才能更好地正确鉴定丝状真菌                             雄株在菌种种类和数量上存在差异ꎬ雄株银杏内
   (李营等ꎬ2015ꎻ郑冰等ꎬ2011)ꎮ 本研究从罗汉果                      生真菌在菌种数量上具有一定优势ꎮ 雌、雄株内
   雌、雄株的不同组织中分离得到 150 株内生真菌ꎬ                         生真菌数量的差异可能与宿主植物生理功能有
   通过形态学鉴定与 ITS 序列分析结合ꎬ利用五界分                         关ꎬ后续 还 需 加 大 样 本 量 采 集 并 进 行 更 深 入 的
   类系统ꎬ根据«真菌词典»第 10 版分类系统ꎬ将 122                      研究ꎮ
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