Page 79 - 《广西植物》2020年第5期
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５ 期 张传利等: 栽培与野生化血丹不同部位中 ２ 种化学成分含量分析 ６ ７ ５
叶按质量比 １ ∶ １ ∶ １ 制成混合样备用ꎮ １.５.３ 线性关系考察 按“１.５.１” 项下配制桃叶珊
１.２ 仪器 瑚苷 对 照 品 溶 液: ０.００３ ６、 ０. ０３６、 ０. ０７２、 ０. １０８、
安捷伦 １２００ 高效液相仪( 安捷伦科技有限公 ０.１４４、０. １８０ ｍｇ ｍＬ ꎻ 配 制 梓 醇 对 照 品 溶 液:
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司)ꎻＳＫ５２００Ｈ 型超声波清洗器( 上海科导超声仪 ０.０６１ ５、 ０.０９２ ２５、 ０.１２３、 ０.１５３ ７５、 ０.１８４ ５、
器有限公司)ꎻＣＮ６１Ｍ / ＤＺＦ 真空干燥箱( 上海奥豪 ０.５５３ ５ ｍｇｍＬ ꎻ在“１.４” 项色谱条件下进样ꎬ以
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斯贸易有限公司)ꎻＭＥ２０４Ｅ 电子分析天平( 上海 对照品浓度为横坐标(Ｘ)ꎬ峰面积为纵坐标( Ｙ) 绘
奥豪斯贸易有限公司)ꎻ纯水 / 超纯水系统( 韩国 制标准曲线ꎬ进行线性回归( 李艳玲等ꎬ ２０１５ꎻ 杨
ＨＵＭＡＮ ＰｏｗｅｒＩ)ꎮ 海玲等ꎬ ２０１８)ꎬ得桃叶珊瑚苷、梓醇回归方程分
１.３ 试剂 别为 Ｙ ＝ １６ ８９９ ４３５.８３Ｘ ＋ １ ３５７.３４( ｒ ＝ ０.９９９ ９)、
对照品:桃叶珊瑚苷( 纯度≥９８％ꎬ上海阿拉 Ｙ ＝ ７ ０９７ ４３２.３５Ｘ ＋ ３ ００１.３１ ( ｒ ＝ ０.９９９ ９)ꎮ 结 果
丁生化科技股份有限公司ꎬ批号为 Ｃ１６０３０９５)ꎻ梓 表明ꎬ分别在 ３. ６ ~ １８０. ０ μｇｍＬ 、６１. ５ ~ ５５３. ５
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醇(纯度≥９７％ꎬ上海阿拉丁生化科技股份有限公 μｇｍＬ 浓度范围内线性关系良好ꎮ 对照品及样
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司ꎬ批号为 Ｌ１２１００５２)ꎻ乙腈( 色谱纯ꎬ德国 ＭＥＲ￣ 品 ＨＰＬＣ 色谱图见图 １ꎮ
ＣＫ)、甲 醇 ( 色 谱 纯ꎬ 德 国 ＭＥＲＣＫ)、 磷 酸 ( 分 析 １.５.４ 精密度试验 精密吸取“１.５.１” 对照品溶液
纯)ꎬ均购自国药集团化学试剂有限公司ꎮ ２０ μＬꎬ分别在“ １. ４” 项色谱条件下ꎬ连续进样 ６
１.４ ＨＰＬＣ 分析条件 次ꎬ测峰面积ꎮ 得桃叶珊瑚苷、梓醇峰面积 ＲＳＤ 分
以«中华人民共和国药典» (２０１５ 年版ꎬ一部) 别为 ０.６５％、０.６９％ꎬ表明该方法具有良好精密度ꎮ
(国家药典委员会ꎬ ２０１５)、马运明等(２０１１) 的测 １.５.５ 重复性试验 取栽培与野生化血丹各部位
定生地黄中梓醇和桃叶珊瑚苷的高效液相色谱法 和混合样粉末各 ６ 份ꎬ每份约 ０.５０ ｇꎬ精密称定ꎬ在
为参照ꎬ对其提取方法和流动相条件进行优化ꎮ “１.５.２”项下配制后依次进样ꎬ在“１.４” 项下测定ꎮ
桃叶珊瑚苷、梓醇测定色谱柱分别为 Ａｇｉｌｅｎｔ ＴＣ￣ 得栽培化血丹根、茎、叶、花、混合样桃叶珊瑚苷峰
Ｃ１８ 柱(２５０ ｍｍ × ４.６ ｍｍꎬ５ μｍ)、ＳＰＨＥＲＩ￣５ＲＰ￣ 面积 ＲＳＤ 分别为 １.２６％、０.９６％、０.２４％、１.２５％、
１８ 柱(２５０ ｍｍ × ４.６ ｍｍꎬ５ μｍ)ꎻ流动相分别为乙 １.１８％ꎻ得野生化血丹根、茎、叶、花、混合样梓醇峰
晴－水(３ ∶ ９７)、甲醇￣０.１％磷酸水(１ ∶ ９９)ꎻ检测 面积 ＲＳＤ 分别为 １.２４％、０.５２％、０.４２％、１.７３％、
￣１ １.２４％ꎮ ＲＳＤ 均小于 ２％ꎬ表明所建立方法具有良
波长分别为 ２０５、２１０ ｎｍꎻ流速均为 １ ｍＬｍｉｎ ꎻ
进样量均为 ２０ μＬꎻ柱温分别为 ２５、３５ ℃ ꎻ理论塔 好重复性ꎮ
板数分别不少于 ５ ０００、９ ０００ꎮ １.５.６ 稳定性试验 取栽培与野生化血丹根供试
１.５ 测定方法 品ꎬ在“１.５.１” 项下配置 ０、２、４、８、１２、２４ ｈ 后依次
１.５.１ 对照品溶液的制备 分别取桃叶珊瑚苷、梓 进样ꎬ分别考察梓醇和桃叶珊瑚苷的稳定性ꎮ 得
醇对照品适量ꎬ精密称定ꎬ加各自流动相溶解ꎬ配 栽培化血丹桃叶珊瑚苷、梓醇峰面积 ＲＳＤ 分别为
制成 ０.１０８ ｍｇｍＬ 的桃叶珊瑚苷对照品溶液和 ０.７６％、０.４９％ꎻ得野生化血丹桃叶珊瑚苷、梓醇峰
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０.１２３ ｍｇｍＬ 梓醇对照品溶液ꎬ用 ０.４５ μｍ 微孔 面积 ＲＳＤ 分别为 ０.７５％、０.４７％ꎮ 表明在 ２４ ｈ 内
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滤膜滤过ꎬ即得ꎮ 供试品溶液稳定ꎮ
１.５.２ 供试品溶液的制备 分别精密称量栽培与 １.５.７ 加样回收率试验 精密称取 ６ 份栽培化血丹
野生化血丹根、茎、叶、花等部位样品和混合样粉 叶粉末约 ０.２５ ｇꎬ精密加入桃叶珊瑚苷对照品 ０.９０
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末 ０.５０ ｇ 置于具塞锥形瓶中ꎬ精密加入 ４０％甲醇 ５ ｍＬ(０.１０８ ｍｇｍＬ )、梓醇对照品 ２２.０ ｍＬ(０.１２３
ｍＬꎬ摇匀并称定质量ꎬ超声处理(功率 ２５０ Ｗꎬ频率 ｍｇｍＬ )ꎬ分别按“１.４”项色谱条件下测定ꎮ 得桃
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３５ ＫＨＺ)３０ ｍｉｎꎬ静置 ５ ｍｉｎꎬ用 ４０％甲醇补足减失 叶珊 瑚 苷、 梓 醇 的 平 均 回 收 率 分 别 为 ９９. ８９％、
的质量ꎬ吸取溶液ꎬ用 ０. ４５ μｍ 的微孔滤膜滤过 ９９.８６％ꎬＲＳＤ 分别为 ０. ３５％、０. ６０％ꎬ 具体 结 果 见
(崔红梅等ꎬ ２０１５)ꎬ即得ꎮ 表 １ꎮ
