Page 84 - 《广西植物》2020年第5期

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Ｇｕｉｈａｉａ Ｍａｙ ２０２０ꎬ ４０(５): ６８０－６８６

ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１９０３０６５
黄婧ꎬ 张敏ꎬ 林峰ꎬ 等. 基于流式细胞术的乌饭树核 ＤＮＡ 含量(２Ｃ￣值)测定 [Ｊ]. 广西植物ꎬ ２０２０ꎬ ４０(５): ６８０－６８６.
ＨＵＡＮＧ Ｊꎬ ＺＨＡＮＧ Ｍꎬ ＬＩＮ Ｆꎬ ｅｔ ａｌ. Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｕｃｌｅａｒ ＤＮＡ ｃｏｎｔｅｎｔ (２Ｃ￣ｖａｌｕｅ) ｏｆ Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｂｒａｃｔｅａｔｕｍ ｂｙ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ [Ｊ].
Ｇｕｉｈａｉａꎬ ２０２０ꎬ ４０(５): ６８０－６８６.

基于流式细胞术的乌饭树核 ＤＮＡ 含量(２Ｃ￣值) 测定

黄 婧 ꎬ 张 敏 ꎬ 林 峰 ꎬ 周 鹏 ꎬ 周 洁 １
１
１∗
１
２
( １. 江苏省林业科学研究院ꎬ 南京 ２１１１５３ꎻ ２. 南京林业大学ꎬ 南京 ２１００３７ )
摘 要: 核 ＤＮＡ 含量(２Ｃ￣值)是描述植物生物多样性的一个重要特征参数ꎮ 该研究利用流式细胞仪检测
越橘属植物乌饭树核 ＤＮＡ 含量ꎬ建立了适合乌饭树的流式细胞术测定方法:以野生乌饭树的嫩叶为材料ꎬ
￣１
以已知核 ＤＮＡ 含量的水稻品种‘日本晴’为内标ꎬ采用 ＧＰＢ 解离液ꎬ细胞核悬液加入 ５０ μＬ∙ｍＬ 碘化丙啶
染色 ５ ｍｉｎ 即可上机检测ꎮ 结果表明:(１)９ 个乌饭树单株的核 ＤＮＡ 含量平均值为(１.２２±０.０３) ｐｇꎬ最小值
为 １.１８ ｐｇꎬ最大值为 １.２７ ｐｇꎮ (２)检测结果与已知的越橘属二倍体植株的 ２Ｃ￣值含量相似ꎬ且不同地理来源
的单株 ＤＮＡ 含量没有显著差异(Ｐ>０.０５)ꎬ推测这 ９ 个单株为二倍体植株ꎮ (３)测定的乌饭树核 ＤＮＡ 含量
(２Ｃ￣值)可丰富越橘属植物的 Ｃ￣值库ꎻ基于流式细胞术建立的乌饭树核 ＤＮＡ 含量测定方法可为该属其他植
物的相关研究提供借鉴ꎮ
关键词: 乌饭树ꎬ 核 ＤＮＡ 含量ꎬ ２Ｃ￣值ꎬ 流式细胞术
中图分类号: Ｑ９４６ 文献标识码: Ａ
文章编号: １０００￣３１４２(２０２０)０５￣０６８０￣０７ 开放科学(资源服务)标识码(ＯＳＩＤ):

Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｕｃｌｅａｒ ＤＮＡ ｃｏｎｔｅｎｔ (２Ｃ￣ｖａｌｕｅ)
ｏｆ Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｂｒａｃｔｅａｔｕｍ ｂｙ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ

１ １∗ ２ １ １
ＨＵＡＮＧ Ｊｉｎｇ ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｍｉｎ ꎬ ＬＩＮ Ｆｅｎｇ ꎬ ＺＨＯＵ Ｐｅｎｇ ꎬ ＺＨＯＵ Ｊｉｅ
( １. Ｊｉａｎｇｓｕ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙꎬ Ｎａｎｊｉｎｇ ２１１１５３ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２. Ｎａｎｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００３７ꎬ Ｃｈｉｎａ )

Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｔｈｅ ｐｌａｎｔ ｎｕｃｌｅａｒ ＤＮＡ ｃｏｎｔｅｎｔ (２Ｃ￣ｖａｌｕｅ) ｉｓ ａ ｐｒｉｎｃｉｐａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｐａｒａｍｅｔｅｒ ｔｏ ｄｅｓｃｒｉｂｅ ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ
ｐｌａｎｔ ｓｐｅｃｉｅｓ. Ｆｏｒ ｂｅｔｔｅｒ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅａｒ ＤＮＡ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｉｓ ｐｌａｎｔꎬ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅａｒ ＤＮＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ

ｂｒａｃｔｅａｔｕｍ ｗｉｌｄ ｐｌａｎｔｓ ｗｅｒｅ ｅｓｔｉｍａｔｅｄ ｂｙ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ (ＦＣＭ). Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ＦＣＭ ｍｅｔｈｏｄꎬ ｙｏｕｎｇ
ｆｒｅｓｈ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ｔａｋｅｎ ａｓ ｓａｍｐｌｅｓꎬ ａｎｄ Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ ｓｕｂｓｐ. ｊａｐｏｎｉｃａ ‘Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ’ｗｉｔｈ ｋｎｏｗｎ ｎｕｃｌｅａｒ ＤＮＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ
ｓｅｔ ａｓ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ. Ｔｈｅ ｎｕｃｌｅｕｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｉｘｅｄ ｌｅａｆ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｂｙ ＧＰＢ ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｔａｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ５０
￣１
μＬ∙ｍＬ ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ ｉｏｄｉｄｅ (ＰＩ) ｗｉｔｈ ５ ｍｉｎꎬ ｔｈｅｎ ｔｈｅ ＰＩ ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅ￣

收稿日期: ２０１９－０７－０５
基金项目: 江苏省林业科学研究院青年科技基金(ＪＡＦ￣２０１６￣０７) ꎻ 中央财政林业科技推广示范资金项目(苏[２０１９] ＴＧ０２) [Ｓｕｐ￣
ｐｏｒｔｅｄ ｂｙ Ｙｏｕｔｈ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｊｉａｎｇｓｕ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ(ＪＡＦ￣２０１６￣０７)ꎻ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ
Ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｏｎ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｆｉｎａｎｃｅ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ (Ｓｕ[２０１９]ＴＧ０２)]ꎮ
作者简介: 黄婧(１９８７－)ꎬ女ꎬ江苏镇江人ꎬ博士ꎬ助理研究员ꎬ主要从事植物遗传学研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)６９４２８６３３８＠ ｑｑ.ｃｏｍꎮ
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通信作者: 张敏ꎬ博士ꎬ研究员ꎬ主要从事林木花卉生理生化和组织培养研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)２９１５７５１０＠ ｑｑ.ｃｏｍꎮ