Page 137 - 《广西植物》2023年第1期

１ 期 盛天露等: 江西地产苍耳草抑制坏死性凋亡(ｎｅｃｒｏｐｔｏｓｉｓ)活性部位化学成分研究(Ⅰ) １ ３ ３

ｈｙｄｒｏｘｙｄｉｈｙｄｒｏｂｏｖｏｌｉｄｅ ( １ )ꎬ ｒａｓｐｂｅｒｒｙ ｋｅｔｏｎｅ ( ２ )ꎬ ｓａｌｉｃｙｌ ａｌｃｏｈｏｌ ( ３ )ꎬ ４￣ｈｙｄｒｏｘｙｌ￣ａｃｅｔｏｐｈｅｎｏｎｅ ( ４ )ꎬ ４￣
ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚａｌｄｅｈｙｄｅ(５)ꎬ ｅｔｈｙｌ ｃａｆｆｅａｔｅ(６)ꎬ ｆｅｒｕｌａｌｄｅｈｙｄｅ(７)ꎬ ｉｓｏｓｃｏｐｌｅｔｉｎ(８)ꎬ ３ꎬ３′￣ｂｉｓ(３ꎬ４￣ｄｉｈｙｄｒｏ￣４￣ｈｙｄｒｏｘｙ￣６￣
ｍｅｔｈｏｘｙ￣２Ｈ￣１￣ｂｅｎｚｏｐｙｒａｎ)(９)ꎬ ａｘｉｌｌａｒｉｎ (１０)ꎬ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ (１１)ꎬ (＋) ｐｉｎｏｒｅｓｉｎｏｌ(１２)ꎬ β￣ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ(１３) ａｎｄ ｐａｌｍａｔｉｃ
ａｃｉｄ(１４). Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ １－４ꎬ ７－１０ ｗｅｒｅ ａｌｌ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｘａｎｔｈｉｕｍ ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｔｉｍｅ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｘａｎｔｈｉｕｍ ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍꎬ ｎｅｃｒｏｐｔｏｓｉｓꎬ ａｃｔｉｖｅ ｆｒａｃｔｉｏｎꎬ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓꎬ Ｊｉａｎｇｘｉ

Ｎｅｃｒｏｐｔｏｓｉｓ 又被称为程序性细胞坏死或细胞 色 谱 仪 和 １５２５ 型 制 备 高 效 液 相 色 谱 仪
坏死性凋亡ꎬ是近年来新发现的一种既受死亡信 [Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ Ｃ１８ 制备液相色谱柱( ３０ ｍｍ × ２５０

号调控、又出现坏死样结构特点的细胞死亡类型ꎮ ｍｍꎬ１０ μｍ)] ( 美国 Ｗａｔｅｒｓ 公司)ꎬＩｎｏｖａ￣６００ 型超
许多研究表明 Ｎｅｃｒｏｐｔｏｓｉｓ 与肿瘤细胞转移及对化 导核磁共振波谱仪( 美国 Ｖａｒｉａｎ 公司)ꎬＡＢ Ｔｒｉｐｌｅ
疗产生耐药、药物诱导的肝损伤、神经退行性病症 ＱＵＡＤ ４５００ 质谱仪(美国 ＡＢ ＳＣＩＥＸ 公司)ꎬＷＦＨ￣
以及心肌梗死、中风、胰腺炎、肠炎和皮肤炎等许 ２０３(ＺＦ￣１)型三用紫外分析仪( 上海精科实业有限
多疾病的病理性和器质性等损伤有关 ( Ａｎｄｒｅｓｓ ｅｔ 公司)ꎬＡＥ１００ 型电子分析天平(瑞士梅特勒－托利
ａｌ.ꎬ ２０１４)ꎮ 对 Ｎｅｃｒｏｐｔｏｓｉｓ 进行干预可能在临床上 多 公 司)ꎮ ＬＨ￣２０ 羟 丙 基 葡 聚 糖 凝 胶 ( Ｓｅｐｈａｄｅｘ
减少这些疾病带来的损伤(Ｇａｌｌｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ２０１２)ꎮ ＬＨ￣２０ꎬ瑞典 ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒ 公司)ꎬ柱色谱及薄层色
中药有数千年治疗炎症和免疫疾病的历史ꎮ 谱用硅胶(２００ 目ꎬ青岛海洋化工厂产品)ꎮ 提取
苍耳(Ｘａｎｔｈｉｕｍ ｓｔｒｕｍａｒｉｕｍ)为菊科(Ｃｏｍｐｏｓｉｔａｅ) 苍 分离用试剂均为分析纯ꎬ半制备 ＨＰＬＣ 用甲醇为
耳属(Ｘａｎｔｈｉｕｍ Ｌ.)一年生草本植物ꎮ 作为民间传 色谱纯(西陇化工股份有限公司)ꎬ水为超纯水ꎮ
统药用植物ꎬ世界各地民间常用苍耳治疗鼻炎、风 活 性 筛 选 用 的 细 胞 系 为 人 直 肠 癌 细 胞 系
湿性关节炎、发烧、白癜风、淋巴结核、疱疹和癌症 ＨＴ２９ꎬ培养基为 ＤＭＥＭ Ｍｅｄｉｕｍ 加 １０％ ＦＢＳ 和 １％
(Ｍａ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００９ꎻ Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１１ꎻ Ｎｉｂｒｅｔ ｅｔ Ｐ / Ｓꎮ Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ￣Ｇｌｏ 细 胞 活 性 检 测 试 剂 盒 购 于
ａｌ.ꎬ ２０１１)ꎮ «中华本草»记载苍耳性寒ꎬ味苦、辛ꎬ Ｐｒｏｍｅｇａ 公司ꎬ肿瘤坏死因子 ＴＮＦ￣α 通过大肠杆菌
有小毒ꎬ具有驱风散寒、解毒杀虫的功效( 中药大 表达系 统 表 达 并 纯 化 得 到ꎻ促 凋 亡 化 合 物 Ｓｍａｃ
词典ꎬ１９８５)ꎮ 现代药理研究表明ꎬ苍耳具有抗炎、 ｍｉｍｅｔｉｃ 和 Ｃａｓｐａｓｅ 抑制剂 ｚ￣ＶＡＤ.ｆｍｋ 由北京生命
抗肿瘤、抗菌、抗氧化等药理作用( 中华人民共和 科学研究所化学中心合成ꎮ
国药典ꎬ２０２０)ꎮ 江西省境内该属植物主要为蒙古
苍耳(Ｘ. ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ) (付小梅等ꎬ２０１７)ꎮ 本课题 ２ 研究方法
组前期在美国得州大学西南医学中心对自建的江
西 １００ 种中草药提取物组分库样品进行活性筛选 ２.１ 提取和分离
时发现ꎬ蒙古苍耳乙醇提物经大孔树脂乙醇洗脱 自然阴干的 １０ ｋｇ 药材粉碎后过筛ꎬ９５ ％乙醇
部位具有抑制程序性细胞坏死的生理活性ꎮ 为明 冷浸提取ꎬ每次 ７ ｄꎬ提取 ３ 次ꎬ合并提取液ꎬ减压
确蒙古苍耳抑制程序性细胞坏死的活性成分ꎬ逐 回收溶剂后得到提取物总浸膏 ８００ ｇꎮ 总浸膏以
展开对其活性成分的系统化学成分分离ꎮ 本研究 适量乙醇溶解ꎬ拌样ꎬ装入已处理好的大孔树脂柱
从大孔树脂 ５０％乙醇洗脱部位分离得到的 １４ 个 中ꎬ依次以不同浓度乙醇梯度洗脱ꎬ得到水洗脱部
化合物(图 １)ꎮ 其中ꎬ化合物 １－４、７－１０ 为首次从 位(标记为 Ａ 部位) (２００ ｇ)、３０ ％乙醇洗脱部位
蒙古苍耳中分离得到ꎮ (标记为 Ｂ 部位) (８０ ｇ)、５０ ％乙醇洗脱部位( 标
记为 Ｃ 部位)(１２０ ｇ)、７０％乙醇洗脱部位( 标记为
１ 材料与仪器 Ｄ 部位)(６０ ｇ)、９０ ％乙醇洗脱部位( 标记为 Ｅ 部

位)(１５０ ｇ)ꎮ 分别取各组分浸膏 ２０ ｍｇ 用 ＤＭＳＯ
药材于 ２０１７ 年 ７ 月采于江西南昌ꎬ由江西中 配制成 ２０ ｍｇｍＬ 储存液ꎬ编号ꎬ于－２０ ℃ 保存ꎬ
￣１
医药大学刘贤旺教授鉴定为菊科苍耳属植物蒙古 备筛选用ꎮ
苍耳( Ｘ. ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ) 的地上部分ꎬ凭证标本保存 ２.２ 活性部位筛选

于江西中医药大学标本室( ＺＹ￣２０１７０７０１)ꎮ ＨＴ２９(人直肠癌)细胞模型ꎬ经 ＴＳＺ(终浓度分
２６９５ Ａｌｌｉａｎｃｅ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ Ｍｏｄｕｌｅ 型高效液相 别为 ２０ ｎｇｍＬ ＴＮＦ￣αꎬ１００ ｎＭ Ｓｍａｃ 和 ２０ ｎＭ ｚ￣
￣１