Page 138 - 《广西植物》2023年第1期

１ ３ ４ 广 西 植 物 ４３ 卷

图 １ 化合物 １－１４ 结构
Ｆｉｇ.１ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ １－１４

ｏ
的 ＨＴ２９ 细胞模型中ꎬ３７ Ｃ 恒温培养箱放置过夜ꎻ
Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ￣Ｇｌｏ(Ｐｒｏｍｅｇａ)试剂盒检测细胞 ＡＴＰ 水平
以确定细胞存活率ꎮ 细胞存活率高的组分说明对

ＴＳＺ 介导的细胞坏死有抑制作用ꎮ
上述洗脱部位进行细胞 程 序 性 坏 死 抑 制 实
验ꎬ筛选结果如图 ２ 所示ꎮ 由图 ２ 可知ꎬ经 ＴＳＺ 诱
导 的 ＨＴ２９ 细 胞 的 存 活 率 为 ２８％ꎬ 诱 导 成
ｎｅｃｒｏｐｔｏｓｉｓ 的 ＨＴ２９ 细胞在加入 Ｃ(５０ ％乙醇洗脱
部位)后将存活率提高到 ７５％ꎬ说明 ５０％乙醇洗脱
图中数据是使用 Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ￣Ｇｌｏ 试剂盒测定的 ＡＴＰ 水平ꎬ反 部位为活性部位之一ꎮ
映 ＨＴ２９ 细胞诱导坏死后用不同样品刺激后存活 １２ ｈ 的细
胞数量ꎮ ＤＭＳＯ. 二甲亚砜ꎻ Ｔ.肿瘤坏死因子 ＴＮＦ￣αꎻ Ｓ. 促 ３ 化学成分分离与结构鉴定
凋亡化合物 Ｓｍａｃ ｍｉｍｅｔｉｃꎻ Ｚ. Ｃａｓｐａｓｅ 抑制剂 ｚ￣ＶＡＤ. Ａ. 水
洗脱部位ꎻ Ｂ. ３０％乙醇洗脱部位ꎻ Ｃ. ５０％乙醇洗脱部位ꎻ
３.１ 化学成分分离
Ｄ. ７０％乙醇洗脱部位ꎻ Ｅ. ９０％乙醇洗脱部位ꎮ
Ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｓｕｒｖｉｖｉｎｇ ＨＴ２９ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｓｔｉｍｕｌｉ ｆｏｒ 为进一步明确其活性成分ꎬ将 ５０％ 乙醇洗脱
１２ ｈ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｎｍｉｎｅｄ ｂｙ ｍｅａｓｕｒｉｎｇ ＡＴＰ ｌｅｖｅｌｓ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｃｅｌｌ
部位 Ｃ(１２０ ｇ)以二氯甲烷 ∶ 甲醇(２００ ∶ １ ~ ０ ∶ １)
Ｔｉｔｅｒ￣Ｇｌｏ ｋｉｔ. ＤＭＳＯ. Ｄｉｍｅｔｈｙｓｕｌｆｏｘｉｄｅꎻ Ｔ. ＴＮＦ￣αꎻ Ｓ. Ｓａｍｃꎻ
梯度洗脱ꎬ经 ＴＬＣ 合并相同 Ｒ 值ꎬ得到 Ｃ－１ ~ Ｃ－１１
Ｚ. Ｚ￣ＶＡＤ. Ａ. Ｗａｔｅｒ ｅｌｕｔｅｄ ｆｒａｃｔｉｏｎꎻ Ｂ. ３０％ ｅｔｈａｎｏｌ ｅｌｕｔｅｄ ｆ
ｆｒａｃｔｉｏｎꎻ Ｃ. ５０％ ｅｔｈａｎｏｌ ｅｌｕｔｅｄ ｆｒａｃｔｉｏｎꎻ Ｄ. ７０％ ｅｔｈａｎｏｌ ｅｌｕｔｅｄ 组分ꎮ 将 Ｃ－５(１５ ｇ)以石油醚 ∶ 乙酸乙酯 ９ ∶ １ ~
ｆｒａｃｔｉｏｎꎻ Ｅ. ９０％ ｅｔｈａｎｏｌ ｅｌｕｔｅｄ ｆｒａｃｔｉｏｎ.
０ ∶ １ 进行梯度洗脱ꎬ得到 Ｃ－５－１ ~ Ｃ－５－２ 组分ꎮ
图 ２ 苍耳大孔吸附树脂各洗脱部位筛选结果 将 Ｃ－５－１(５ ｇ)以二氯甲烷 ∶ 甲醇 １５ ∶ １ ~ ０ ∶ １ 梯
Ｆｉｇ. ２ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｅｌｕｔｅｄ ｆｒａｃｔｉｏｎｓ ｂｙ ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ 度洗脱ꎬ得到 Ｃ－５－１－１ ~ Ｃ－５－１－ ７ 组分ꎮ Ｃ－ ５ －
ｒｅｓｉｎ ｏｆ Ｘａｎｔｈｉｕｍ ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ
１－１出 现 白 色 结 晶ꎬ 重 结 晶 后 得 化 合 物 １３ ( ３３
ｍｇ)ꎮ Ｃ－５－１－５(０.２ ｇ) 析出白色晶体ꎬ经甲醇重

ＶＡＤ 诱 导 过 夜 后ꎬ 产 生 Ｎｅｃｒｏｐｔｏｓｉｓꎻ 将 配 成 ２０ 结晶得到化合物 ８(９ ｍｇ)ꎮ 将其余组分运用制备
ｍｇｍＬ 的样品加到经 ＴＳＺ 处理诱导成细胞坏死 型高效液进行分离纯化ꎬ得到化合物 ６(５ ｍｇ)、１０
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