Page 140 - 《广西植物》2023年第10期
P. 140
１ ８ ９ ４ 广 西 植 物 ４３ 卷
确其植物基原ꎮ 由此可见ꎬ黄草乌在栽培过程中
可能存在种源混杂的情况ꎬ进而导致药材质量不 １ 材料与方法
稳定ꎮ 乌头属植物种类较多ꎬ种间界限模糊ꎬ形态
相似难以区别( 朱高倩等ꎬ２０２０)ꎬ受外部环境影 １.１ 实验材料
响ꎬ植株形态、花色花型、根的数量及根皮颜色等 黄草乌栽培品采自禄劝县干海子撒营盘、泸
在种内会有差异ꎬ仅依靠传统形态学鉴定、理化性 西县三塘乡、巧家县药山镇、宁蒗县永宁乡等栽培
质鉴定、显微特征鉴定等方法不能准确区别乌头 基地(表 １)ꎬ选择健康植株ꎬ采集新鲜嫩叶并用干
类植物(童玉懿等ꎬ１９８６ꎻ罗艳和杨亲二ꎬ２００５ꎻ肖 燥硅胶保存ꎮ
培根等ꎬ２００６ꎻ周成蕾ꎬ２０１３)ꎮ 因此ꎬ利用分子生
物学手段明确黄草乌植物基原ꎬ可从源头保障药 表 １ １０ 个栽培品采集信息
Ｔａｂｌｅ １ Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ １０ ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ
材质量ꎮ
叶绿体是多数高等植物和少部分藻类及原核 采集地 编号 经度 纬度 海拔
Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ Ｌｏｎｇｉｔｕｄｅ Ｌａｔｉｔｕｄｅ Ａｌｔｉｔｕｄｅ
生物进行光合作用和生命代谢活动的重要细胞 ｌｏｃａｔｉｏｎ Ｃｏｄｅ (Ｅ) (Ｎ) (ｍ)
器ꎬ是半自主性细胞器ꎬ拥有自己的基因组ꎬ也就 东川区汤丹镇 ＤＣ￣２￣２ １３０°０２′ ２６°０９′ ２ ８５０
Ｔａｎｇｄａｎ Ｔｏｗｎꎬ
是叶绿体基因组( ｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔ ｇｅｎｏｍｅ) ( 王仕奇等ꎬ Ｄｏｎｇｃｈｕａｎ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ
２０２２)ꎮ 叶绿体基因组对于筛选药用植物密切相 个旧市对门山 ＧＪ￣１￣３ １０３°１１′ ２３°２１′ ２ ２６０
关物种的分子标记以及破译亲缘关系较近植物类 Ｄｕｉｍｅｎ Ｍｏｕｎｔａｉｎꎬ
Ｇｅｉｊｉｕ Ｃｉｔｙ
群间的系统发育关系具有重要贡献( Ｊａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ 建水县普雄乡 ＪＳ￣１￣４ １０３°０４′ ２３°２９′ ２ ２２０
２００７ꎻ Ｗｉｃｋｅ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１１ꎻ 姜汶君等ꎬ２０２０)ꎮ 近年 Ｐｕｘｉｏｎｇ Ｔｏｗｎｓｈｉｐꎬ
Ｊｉａｎｓｈｕｉ Ｃｏｕｎｔｙ
来ꎬ新一代测序技术发展迅速ꎬ测序成本逐年降
丽江市太安乡 ＬＪ￣１￣２ １００°０５′ ２６°４７′ ３ ０００
低ꎬ已经有越来越多的叶绿体基因组成功发表ꎬ推 Ｔａｉａｎ Ｔｏｗｎｓｈｉｐꎬ
Ｌｉｊｉａｎｇ Ｃｉｔｙ
动着分子生物学研究的迅速发展( Ｓｈｉｎｏｚａｋｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ
丽江市太安乡 ＬＪ￣３￣２ １００°０６′ ２６°４８′ ２ ７２８
１９８６ꎻ Ｏｈｙａｍａ ｅｔ ａｌ.ꎬ １９８６)ꎮ 前人利用内转录间 Ｔａｉａｎ Ｔｏｗｎｓｈｉｐꎬ
Ｌｉｊｉａｎｇ Ｃｉｔｙ
隔区 ＩＴＳ(张富民等ꎬ２００３ꎻＬｕｏ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００５)、ｐｓｂＡ￣
丽江市太安乡 ＬＪ￣４￣３ １００°０５′ ２６°４４′ ２ ９１０
ｔｒｎＨ 序列( 朱高倩等ꎬ２０２０) 等构建了乌头属植物 Ｔａｉａｎ Ｔｏｗｎｓｈｉｐꎬ
的系统发育关系ꎬ在亚属水平上基本能说明其亲 Ｌｉｊｉａｎｇ Ｃｉｔｙ
禄劝 县 干 海 子 撒 ＬＱ￣１￣３ １０２°３０′ ２６°０４′ ２ ６２０
缘关系ꎮ 然而一些研究结果表明ꎬ亚属下分类群 营盘
的划分与传统划分不一致ꎻ叶绿体基因组可以作 Ｇａｎｈａｉｚｉ Ｓａｙｉｎｇｐａｎꎬ
Ｌｕｑｕａｎ Ｃｏｕｎｔｙ
为 ＤＮＡ 超级条形码对植物物种进行准确鉴别ꎮ
泸西县三塘乡 ＬＸ￣１￣３ １０３°４８′ ２４°２７′ ２ ２２０
樊东昌等(２０２２)虽然通过叶绿体全基因组序列构 Ｓａｎｔａｎｇ Ｔｏｗｎｓｈｉｐꎬ
Ｌｕｘｉ Ｃｏｕｎｔｙ
建了乌头属的系统进化树ꎬ但并未囊括乌头属的
宁蒗县永宁乡 ＮＬ￣１￣３ １００°４８′ ２７°２６′ ２ ６００
大部分物种ꎮ Ｙｏｎｇｎｉｎｇ Ｔｏｗｎｓｈｉｐꎬ
Ｎｉｎｇｌａｎｇ Ｃｏｕｎｔｙ
本研究以采集到的 １０ 个黄草乌栽培品为材
巧家县药山镇 ＱＪ￣１￣２ １０３°０７′ ２７°１０′ ２ ４４０
料ꎬ对他们的完整叶绿体基因组序列进行测序、组 Ｙａｏｓｈａｎ Ｔｏｗｎꎬ
装、注释ꎬ揭示其基本序列和结构特征ꎬ同时结合 Ｑｉａｏｊｉａ Ｃｏｕｎｔｙ
３２ 个已发表乌头属物种的叶绿体基因组序列分析
１０ 个栽培品的系统发育关系ꎮ 拟探讨以下科学问 １.２ 叶绿体 ＤＮＡ 提取与测序
题:黄草乌的种植栽培是否确实存在种源混杂的 使用 Ｂｉｏ Ｔｅｋｅ 公司的植物基因组 ＤＮＡ 提取试
客观情况ꎬ进而导致了黄草乌药材质量的不稳定ꎮ 剂盒 提 取 新 鲜 幼 嫩 叶 片 全 基 因 组 ＤＮＡꎬ 使 用
本研究将明确黄草乌的栽培种源问题ꎬ并为黄草 ＮａｎｏＤｒｏｐ ２０００ 超微量分光光度计(美国赛默飞世
乌的基原植物鉴定、规范化种植、合理开发利用等 尔科技有限公司) 检测 ＤＮＡ 纯度ꎬ采用琼脂糖凝
研究提供一定数据ꎮ 胶电泳检测 ＤＮＡ 质量ꎬ检测合格后送往上海美吉
