Page 37 - 《广西植物》2023年第7期

７ 期 田甲佳等: 云南三个地区马铃薯内生真菌多样性研究 １ ２ ０ ５

表 ２ 马铃薯不同组织部位内生真菌 ( Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ )、 青 霉 属 ( Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ )、 链 格 孢 属
的分离率和定殖率 ( Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ )、 镰 刀 菌 属 ( Ｆｕｓａｒｉｕｍ )、 木 霉 属

Ｔａｂｌｅ ２ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｎｄ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ (Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ)、须壳孢属( Ｐｓｅｕｄｏｐｙｒｅｎｏｃｈａｅｔａ)、小
ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｓｓｕｅ ｐａｒｔｓ
不 整 球 壳 属 ( Ｐｌｅｃｔｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ )、 韧 革 菌 属
ｏｆ Ｓｏｌａｎｕｍ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ
(Ｓｔｅｒｅｕｍ)、刺 盘 孢 属 ( Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ)、 脆 柄 菇 属
项目 根 茎 块茎 总计 (Ｐｓａｔｈｙｒｅｌｌａ)、附 球 菌 属 ( Ｅｐｉｃｏｃｃｕｍ) 和 尾 孢 菌 属
Ｉｔｅｍ Ｒｏｏｔ Ｓｔｅｍ Ｔｕｂｅｒ Ｔｏｔａｌ
(Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ)ꎮ 其中ꎬ镰刀菌属真菌占 １５.３％、青霉
组织块数 ６０ ６０ ６０ １８０
属占 １３.３％、曲霉属占 １２.２％ꎮ
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔｉｓｓｕｅ ｂｌｏｃｋ
２.３ 不同地区内生真菌优势种群分析
长菌块数 ４１ ３９ ４６ １２６
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｇｒｏｗｉｎｇ 从不同地区、不同组织部位中分离得到的内
ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ
生真菌在种类和数量上存在明显区别( 图 ４)ꎮ 德
内生真菌数 ４４ １４ ４０ ９８
宏芒市的马铃薯样品中ꎬ内生真菌优势属为青霉
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ
定殖率 ６８.３３ ６５.００ ７６.６７ ７０.００ 属和曲霉属ꎬ分离频率为 ３０.００％和 ２５.００％ꎮ 分离
Ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｒａｔｅ (％)
于根部的内生真菌优势属为曲霉属ꎬＩＦ 为３５.２９％ꎻ
分离率 ７３.３３ ２３.３３ ６６.６７ ５４.４４ 分离于茎部的内生真菌优势属为青霉属和链格孢
Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｒａｔｅ (％)
属ꎬＩＦ 均为 ３７.５０％ꎻ分离于块茎的内生真菌优势
属为青霉属ꎬＩＦ 为 ３３.３０％(图 ４:Ａ)ꎮ
测序序列相关性比较高的序列进行分析ꎬ表 ３ 结 大理喜洲的马铃薯样品中ꎬ内生真菌优势属
果表明ꎬ这 １４ 种内生真菌大部分属于子囊菌门和 为裸孢壳属和刺盘孢属ꎬ分离频率 为 ２９. ６３％ 和
担子菌门ꎬ涵盖 １０ 个目 １３ 个属ꎬ并且 ＩＴＳ 序列和 １８.５２％ꎮ 分离于根部的内生真菌优势属为裸孢壳
ＧｅｎＢａｎｋ 相 似 性 均 在 ９９％ 以 上ꎮ 基 于 内 生 真 菌 属ꎬＩＦ 为 ３５.７１％ꎻ分离于茎部的内生真菌优势属

ＩＴＳ ｒＤＮＡ 序列所得的 １４ 株菌株的系统进化树如 为附球菌属ꎬＩＦ 为 １００.００％ꎻ分离于块茎的内生真
图 １ 所示ꎮ 菌优势属为刺盘孢属ꎬＩＦ 为 ４５.４５％(图 ４:Ｂ)ꎮ
２.２.２ 内生真菌的形态学鉴定 通过形态学观察 临沧双江的马铃薯样品中ꎬ内生真菌优势属
(菌落观察和显微镜下菌丝体观察) (图 ２) 及分子 为韧革菌属ꎬ分离频率为 ２９.０３％ꎮ 分离于根部的
生物学技术(ＩＴＳ)鉴定ꎬ９８ 株内生真菌多为子囊菌 内生真菌优势属为韧革菌属ꎬＩＦ 为 ４６.１５％ꎻ分离
门和担子菌门ꎬ包含 １３ 属 １４ 种( 表 ４)ꎬ分别为构 于 茎 部 的 内 生 真 菌 优 势 属 为 附 球 菌 属ꎬ ＩＦ 为
巢曲 霉 ( Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓꎬ Ｍ１ )、 褶 皱 裸 孢 壳 ７５.００％ꎻ分离于块茎的内生真菌优势属为小不整
(Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａ ｒｕｇｕｌｏｓａꎬ Ｍ２)、 局 限 青 霉 ( Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ 球壳属ꎬＩＦ 为 ２８.５７％(图 ４:Ｃ)ꎮ
ｒｅｓｔｒｉｃｔｕｍꎬＭ３)、长极链格孢( Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｌｏｎｇｉｓｓｉｍａꎬ 此外ꎬ研究还发现脆柄菇属内生真菌仅能从
Ｍ４)、尖孢镰刀菌( Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍꎬＭ５)、接骨 根部分离得到ꎬ在根部的分离频率为 ６.８１％ꎮ
木镰 刀 菌 ( Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓａｍｂｕｃｉｎｕｍꎬ Ｍ６)、 哈 茨 木 霉 ２.４ 不同部位内生真菌的多样性指数分析
( Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍꎬ Ｍ７ )、 Ｐｓｅｕｄｏｐｙｒｅｎｏｃｈａｅｔａ 马铃薯不同组织部位中的内生真菌多样性指
ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ (Ｍ８)、Ｐｌｅｃｔｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ ｐｌｕｒｉｖｏｒａ (Ｍ９)、毛韧革 数( Ｈ′) 各不相同且呈现出一定规律( 表 ５)ꎮ 由
菌( Ｓｔｅｒｅｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍꎬ Ｍ１０)、 Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｂｏｎｉｎｅｎｓｅ 表 ５ 可知ꎬ德宏芒市马铃薯样品各组织中ꎬ内生真
(Ｍ１１)、Ｐｓａｔｈｙｒｅｌｌａ ｓｕｌｃａｔｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓａ(Ｍ１２)、Ｅｐｉｃｏｃｃｕｍ 菌多样性指数表现为 Ｈ′ (１.４２) > Ｈ′ 块茎 (１.２６) >
根
ｃａｔｅｎｉｓｐｏｒｕｍ (Ｍ１３)和 Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ ｍｕｓｉｇｅｎａ (Ｍ１４)ꎬ分 Ｈ′ (０.７８)ꎻ大理喜洲马铃薯样品各组织中ꎬ内生
茎
别将其命名为 Ｍ１－Ｍ１４ꎮ 真菌多 样 性 指 数 大 小 表 现 为 Ｈ′ ( １. ５１) > Ｈ′ 块茎
根
２.２.３ 内生真菌的组成分析 通过形态学观察( 菌 (１.２８) >Ｈ′ (０.２８)ꎻ临沧双江马铃薯样品中ꎬ各组
茎
落观察和显微镜下菌丝体观察) 及分子生物学技 织内生真菌多样性指数大小表现为 Ｈ′ (１.２９) >
根
术(ＩＴＳ)鉴定ꎬ９８ 株马铃薯内生真菌包含 １３ 属 １４ Ｈ′ 块茎 (１.１２) >Ｈ′ (０.４９)ꎮ 由此可见ꎬ马铃薯根部
茎
种(图 ３)ꎬ分别为曲霉属( Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ)、裸孢壳属 内生真菌的多样性指数高于茎部和块茎ꎮ