Page 168 - 《广西植物》2023年第9期
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1 7 1 6                                广  西  植  物                                         43 卷
                                                               序列的非模式植物(潘敏等ꎬ2020ꎻ邹智等ꎬ2021)ꎮ
                                                               本研究应用 SMRT 测序技术ꎬ在 PacBio RS II 平台
                                                               上对枫 香 叶 片 变 色 期 进 行 了 研 究ꎬ 总 共 产 生 了
                                                               41.04 Gb 的测序数据ꎬ从中共提取到 731 849 条全
                                                               长序列ꎬ全长非嵌合序列占 76.95%ꎬ测序质量较
                                                               好ꎬ能够满足后续挖掘基因信息的需要ꎮ SMRT 测
                                                               序技术获得的转录本的长度比下一代高通量测序

                                                               技术获得的转录本的长度要长( Jia et al.ꎬ 2020)ꎮ
                                                               本研究中ꎬ枫香叶片变色期转录本的平均长度为
                                                               1 610 bpꎬ远高于 Wen 等(2014)利用 Illumina 测序

                                                               技术 得 到 的 枫 香 绿 叶 和 红 叶 转 录 本 长 度 ( 165
                                                               bp)ꎬ这说明 PacBio SMRT 测序技术是获取转录本
                                                               序列ꎬ特别是获取长转录本序列的有效方法ꎮ
                                                                   lncRNA 是 一 类 转 录 本 长 度 大 于 200 nt 的
                                                               RNA 分子ꎬ参与调节植物的发育和生长、次生代
                                                               谢和植物的逆境反应( Liu et al.ꎬ 2019) ꎮ 本研究
                                                               中ꎬ我们用 4 种方法在枫香变色期全长转录组中
                                                               获得 2 035 条 lncRNAsꎬ这 些 lncRNAs 将 为 进 一
              A. RNA 加工与修饰: 108(0.66%)ꎻ B. 染色体结构和活力:
              104(0.64%)ꎻ C. 能量生成和转换: 849(5.18%)ꎻ D. 细胞周期      步研究枫香叶色变化分子机制奠定基础ꎮ SMRT
              控制、蛋白质折叠和分子伴侣: 152(0.93%)ꎻ E. 氨基酸运输
              和代谢: 915(5.59%)ꎻ F. 核苷酸运输和代谢: 131(0.80%)ꎻ        测序获得的转录本开发 SSR 标记是一种有效可
              G. 碳水化合物运输和代谢: 949(5.80%)ꎻ H. 辅酶运输和代
              谢: 321(1.96%)ꎻ I. 脂质运输和代谢: 490(2.99%)ꎻ J. 翻译、    行的方法( 夏丽飞等ꎬ2020) ꎮ 本研究分析枫香叶
              核糖体结构和生物合成: 1 114(6.80%)ꎻ K. 转录: 1 530           片变色 期 全 长 转 录 组ꎬ共 检 测 到 14 892 个 SSR
              (9.34%)ꎻ L. 重复、重组和修饰: 1 357(8.29%)ꎻ M. 细胞壁膜
              生物合成: 334(2.04%)ꎻ N. 细胞运动: 14(0.09%)ꎻ O. 翻译      位点ꎬ单碱基 SSR 数量最多ꎮ 枫香分布范围广ꎬ
              后修饰、蛋白质折叠和分子伴侣: 1 265(7.72%)ꎻ P. 矿脂运输            抗逆性强ꎬ叶片呈色特异ꎮ 因此ꎬ上述 SSR 位点
              和代谢: 651(3.98%)ꎻ Q. 次生代谢物合成、运输和代谢: 553
              (3.38%)ꎻ R. 一般功能预测: 3 293(20.11%)ꎻ S. 功能未知:      为枫香遗传多样性研究、比较基因组学研究、基
              332(2.03%)ꎻ T. 信号传导机制: 1 442(8.81%)ꎻ U. 细胞内转
              运、分泌 和 小 泡 运 输: 212 ( 1. 29%)ꎻ V. 防 卫 机 制: 153   因作图研究、种群遗传学研究和其他类型的遗传
              (0.93%)ꎻ W. 胞外结构: 0(0.00%)ꎻ Y. 核结构: 0(0.00%)ꎻ
                                                               研究提 供 有 价 值 的 遗 传 工 具 ( 李 文 燕 等ꎬ2020ꎻ
              Z. 细胞构架: 107(0.65%)ꎮ
              A. RNA  processing  and  modification: 108 ( 0. 66%)ꎻ  Wu et al.ꎬ 2020) ꎮ
              B. Chromatin structure and dynamics: 104 (0.64%)ꎻ C. Energy
              production and conversion: 849 (5.18%)ꎻ D. Cell cycle controlꎬ  在 8 个数据库中ꎬ有 24 857 个枫香叶片变色
              cell divisionꎬ chromosome partitioning: 152 (0.93%)ꎻ E. Amio  期转录本通过序列比对进行了注释ꎬ注释转录本
              acid transport and metabolism: 915 ( 5. 59%)ꎻ F. Nucleotide
              transport and metabolism: 131 ( 0. 80%)ꎻ G. Carbohydrate  比例为 91.15%ꎬ远高于 Wend 等(2014) 利用二代
              transport and metabolism: 949 (5.80%)ꎻ H. Coenzyme transport  测序技术注释的转录本比例(56%)ꎮ 这表明本研
              and metabolism: 321 ( 1. 96%)ꎻ I. Lipid transport and
              metabolism: 490 (2.99%)ꎻ J. Translationꎬ ribosomal structure
                                                               究鉴定到大量枫香叶片中的基因ꎮ 剩下的 2 412
              and biogenesis: 1 114 ( 6. 80%)ꎻ K. Transcription: 1 530
              (9.34% )ꎻ L. Replicationꎬ recombination and repair: 1 357  个转录本没有 BLAST 匹配ꎬ可能代表了枫香叶片
              (8.29% )ꎻ M. Cell wall/ membrane/ envelope biogenesis: 334  特异的基因或未知基因ꎮ NR 注释结果表明ꎬ枫香
              (2.04%)ꎻ N. Cell motility: 14 (0.09%)ꎻ O. Posttranslational
              modificationꎬ protein turnoverꎬ chaperones: 1 265 ( 7. 72%)ꎻ  叶 片 全 长 转 录 组 序 列 信 息 与 葡 萄 最 相 似
              P. Inorganic ion transport and metabolism: 651 ( 3. 98%)ꎻ
              Q. Secondary metabolites biosynthesisꎬ transport and catabolism:  (36.39%)ꎬ与 Wend 等( 2014) 的研究结果一致ꎮ
              553 ( 3. 38%)ꎻ R. General function prediction only: 3 293  GO、COG 和 KEGG 分类结果表明ꎬ大量转录本参
              (20. 11%)ꎻ S. Function unknown: 332 ( 2. 03%)ꎻ T. Signal
              transduction mechanisms: 1 442 ( 8. 81%)ꎻ U. Intracellular  与转录、复制、重组和修复ꎬ并具有催化活性ꎬ具有
              traffickingꎬ secretionꎬ and vesicular transport: 212 ( 1. 29%)ꎻ
              V. Defense mechanisms: 153 ( 0. 93%)ꎻ W. Extracellular  不同的分子功能ꎬ有 10 666 份转录本被分配到特
                                                               定的途径ꎬ参与多种生物学途径ꎮ 因此ꎬ我们的研
              structures: 0 ( 0. 00%)ꎻ Y. Nuclear structure: 0 ( 0. 00%)ꎻ
              Z. Cytoskeleton: 107 (0.65%).
                                                               究结果为进一步开展枫香叶色变化的分子研究提
                          图 6  COG 注释分类
                    Fig. 6  Classification of COG annotation   供了丰富的遗传信息ꎮ
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