Page 123 - 《广西植物》2024年第12期
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１２ 期 沈颖等: 血叶兰化学成分及其生物活性研究 ２ ２ ８ １
１.０ ｍＬｍｉｎ ꎻ进样量 １.０ μＬꎬ采用的进样方式为
￣１
１ 材料与方法 不分流进样ꎬ溶剂延迟时间 ４ ｍｉｎꎮ
质谱条件:电子轰击离子源(ＥＩ)ꎬ能量 ７０ ｅＶꎬ
１.１ 材料 接口温度 ２８０ ℃ ꎬＥＩ 温度 ２３０ ℃ ꎬ四极杆的温度
血叶兰成年植株样品于 ２０２２ 年 ６ 月购自福建 １５０ ℃ ꎬ调谐方式为标准调谐ꎬ电子倍增电压１ ７１８
省热带作物科学研究所ꎬ人工栽培种ꎮ 经福建省 ｋＶꎬ质 量 扫 描 范 围 ｍ / ｚ ２０ ~ ８００ ( 刘 欣 怡 等ꎬ
热带作物科学研究所郑涛研究员鉴定其为兰科血 ２０２２)ꎮ
叶 兰 属 血 叶 兰 ( Ｌｕｄｉｓｉａ ｄｉｓｃｏｌｏｒ )ꎮ 凭 证 标 本 １.５ 化合物的分离
(ＸＹＬ２０２２０６)存放于海南大学热带农林学院ꎮ 将乙酸乙酯萃取物(４０.１ ｇ) 经硅胶减压柱色
１.２ 仪器与试剂 谱ꎬ以石油醚 ∶ 乙酸乙酯 [１００ ∶ １→１ ∶ １ꎬＶ / Ｖ( 下
Ｈｅｉｄｏｌｐｈ Ｌａｂｏｒｔａ ２０ 大 型 旋 转 蒸 发 仪 ( 德 国 同)]和氯仿 ∶ 甲醇(１００ ∶ １→１ ∶ １) 混合溶剂依
Ｈｅｉｄｏｌｐｈ 公司)ꎻ安捷伦 １２６０ 分析型高效液相色 次进行梯度洗脱ꎬ经薄层层析色谱( ＴＬＣ) 检测ꎬ合
谱仪(美国安捷伦科技公司)ꎻ安捷伦 １２６０ 半制备 并后得到 ２３ 个组分(Ｆｒ.１－Ｆｒ.２３)ꎮ
型高效液相色谱仪( 美国安捷伦科技公司)ꎻ半制 Ｆｒ.８ (２５２.６ ｍｇ) 经 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 色谱柱以
备 色 谱 柱 Ｃ ( ４. ６ ｍｍ ＩＤ × ２５０ ｍｍꎬ 日 本 氯仿 ∶ 甲醇(１ ∶ １) 洗脱后得到 ３ 个组分( Ｆｒ.８.１－
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ＣＯＳＭＯＳＩＬ 公司)ꎻ７８２０￣５９７７ 气相色谱－质谱联用 Ｆｒ.８.３)ꎮ Ｆｒ.８.１ (３３.１ ｍｇ) 经硅胶柱色谱以石油
仪(美国安捷伦科技公司)ꎻＥＹＥＬＡ Ｎ￣１３００ 旋转蒸 醚 ∶ 乙酸乙酯(４０ ∶ １)为洗脱剂ꎬ分离得到化合物
发仪(上海爱朗仪器有限公司)ꎻＢＤ￣１００Ａ 自动接 １３ (８.２ ｍｇ)ꎻＦｒ.８.２ (４９.０ ｍｇ)经硅胶柱色谱以石
样器(上海青浦沪西仪器厂)ꎻＢｒｕｋｅｒ ＡＶ￣５００ 型超 油醚 ∶ 氯仿 ∶ 异丙醇( １００ ∶ １００ ∶ ０. ０１) 为洗脱
导核磁仪( 德国 Ｂｒｕｋｅｒ 公司)ꎻＢＰ２２１Ｓ 万分之一 剂ꎬ分离得到化合物 １４ (５.９ ｍｇ)ꎻＦｒ.８.３ (１７０.５
分析天平(北京赛多利斯天平有限公司)ꎻＥＬＸ￣８００ ｍｇ) 经反复正向硅胶柱色谱、Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 色谱
酶标仪(美国伯腾仪器有限公司)ꎻ薄层层析硅胶 柱(甲醇)ꎬ分离得到化合物 １２ (２.９ ｍｇ) 和化合
板和层析柱硅胶 Ｇ(６０ ~ ８０ 目ꎬ２００ ~ ３００ 目ꎬ青岛 物 １５ (３８.６ ｍｇ)ꎻ剩余组分(４０.５ ｍｇ) 经半制备高
海洋化工集团公司)ꎻＭＣＩ 柱色谱小孔树脂( 日本 效液相色谱( Ｃ 柱ꎬ甲醇 ∶ 水 ＝ ２３ ∶ ７７ 恒梯度洗
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东京三菱化学公司)ꎻ凝胶 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０( 德国 脱ꎻ流速 ４ ｍＬｍｉｎ ꎻ检测波长 ２１０ ｎｍ)ꎬ得到化
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Ｍｅｒｃｋ 公 司)ꎻ 维 生 素 Ｃ ( 德 国 Ｓｉｇｍａ￣Ａｌｄｒｉｃｈ 公 合物 １１ (２３.０ ｍｇꎬｔ ＝ １６.２ ｍｉｎ)和化合物 １０ (３.４
Ｒ
司)ꎻＴｒｏｌｏｘ(美国 ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ 公司)ꎻＫ Ｓ Ｏ 、 ｍｇꎬｔ ＝ ７. ０ ｍｉｎ)ꎮ Ｆｒ. １０ ( １３５. ５ ｍｇ ) 依 次 经
２ ２ ８ Ｒ
ＤＰＰＨ(上海麦克林生化科技有限公司)ꎻＡＢＴＳ( 北 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ (氯仿－甲醇 １ ∶ １)、正向硅胶柱色
京索莱宝科技有限公司)ꎻ实验室所用常规试剂均 谱(石油醚－乙酸乙酯 ６０ ∶ １) 分离纯化ꎬ得到化合
为分析纯ꎮ 物 ９ (１２.４ ｍｇ)ꎻ剩余组分(８.０ ｍｇ) 经半制备高效
１.３ 样品的提取 液相色谱(Ｃ 柱ꎬ甲醇 ∶ 水 ＝ ４０ ∶ ６０ 恒梯度洗脱ꎻ
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血叶兰样品(鲜重 ３０.０ ｋｇ) 切成约 １ ｃｍ 的小 流速 ４ ｍＬｍｉｎ ꎻ检测波长 ２８０ ｎｍ)ꎬ分离得到化
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段后用 ９５％乙醇室温下浸提 ４ 次ꎬ得到 ４６５.５ ｇ 提 合物 ７ (０.５ ｍｇꎬｔ ＝ ３５.０ ｍｉｎ)ꎮ Ｆｒ.１１ (１１３.０ ｍｇ)
Ｒ
取物ꎬ加入适量纯水制成悬浊液ꎬ依次用石油醚、 依次经 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０(氯仿－甲醇 １ ∶ １)、半制备
乙酸乙酯、正丁醇进行萃取ꎬ分别得到石油醚萃取 高效液相色谱( Ｃ 柱ꎬ甲醇 ∶ 水 ＝ ３０ ∶ ７０ 恒梯度
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物 ３９.８ ｇ、乙酸乙酯萃取物 ４０.１ ｇ、正丁醇萃取物 洗脱ꎻ流速 ４ ｍＬｍｉｎ ꎻ检测波长 ２８０ ｎｍ)ꎬ分离
￣１
２５４.５ ｇꎮ 得到化 合 物 ８ ( ０. ５ ｍｇꎬ ｔ ＝ １６. ０ ｍｉｎ)ꎮ Ｆｒ. １３
Ｒ
１.４ ＧＣ￣ＭＳ 分析条件 (１５３.０ ｍｇ) 依次经 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ ( 甲醇)、正向
气 相 色 谱 条 件: 采 用 ＨＰ￣５ＭＳ ５％ Ｐｈｅｎｙｌ 硅胶色谱柱( 氯仿) 分离纯化ꎬ得到化合物 ６ (３.０
Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｉｌｏｘａｎｅ (３０ ｍ × ０.２５ ｍｍ × ０.２５ μｍ)弹性 ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.１６ (４.２ ｇ) 经小孔吸附树脂柱( ＭＣＩ) 以
石英毛细管柱ꎻ柱子的初始温度 ５０ ℃ ꎬ以 ５ ℃ 甲醇 ∶ 水(１ ∶ ９→１ ∶ ０) 梯度洗脱得到 １１ 个组分
ｍｉｎ 的速度升温到 ３１０ ℃ ꎬ保持 １０ ｍｉｎꎻ汽化室温 (Ｆｒ.１６.１－Ｆｒ.１６.１１)ꎮ Ｆｒ.１６.２ (３４.０ ｍｇ) 经硅胶柱
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度 ２５０ ℃ ꎻ载气为高纯度的氦气 (９９.９９９％)ꎬ流速 色谱以氯仿 为 洗 脱 剂ꎬ得 到 组 分 Ｆｒ. １６. ２. １ ( ９. ８
