Page 153 - 《广西植物》2024年第5期
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５ 期 刘芳等: Ｐｒｅ￣ｍｉＲ１７２ 及 ｍｉＲ１７２ 调控油菜 ＡＰ２ 基因表达的规律分析 ９ ４ １
表 ３ 油菜 ＡＰ２ 基因的选择压力分析
Ｔａｂｌｅ ３ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒａｐｅ ＡＰ２
类别 基因 １ 基因 ２ 选择压力
ｋａ ｋｓ ｋａ / ｋｓ
Ｃａｔｅｇｏｒｙ Ｇｅｎｅ １ Ｇｅｎｅ ２ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｐｒｅｓｓｕｒｅ
直系同源 Ｂｒａ０１７８０９ ＸＭ＿０１３８８７０７１ ０ ０ — —
Ｏｒｔｈｏｌｏｇｏｕｓ
Ｂｒａ０１１７４１ ＸＭ＿０４８７７８０６８ ０.００２ ０ ０.００６ ６ ０.３０３ ０ 纯化选择
Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ
ＫＣ５８４０９４ ＨＱ６３７４６８ ０.０１３ ５ ０ — —
ＫＣ５８４０９４ ＸＭ＿０４８７７０４４５ ０.０２５ ０ ０.０８５ ８ ０.２９１ ３ 纯化选择
Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ
ＫＣ５８４０９４ ＸＭ＿０１３８８７０７３ ０.０２５ ０ ０.０８５ ８ ０.２９１ ３ 纯化选择
Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ
ＫＣ５８４０９４ ＸＭ＿０４８７６３４２６ ０.００６ ２ ０.０４８ ６ ０.１２７ ５ 纯化选择
Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ
旁系同源 ＨＱ６３７４６８ ＸＭ＿０４８７７０４４５ ０.０２５ ０ ０.０８５ ８ ０.２９１ ３ 纯化选择
Ｐａｒａｌｏｇｏｕｓ Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ
ＨＱ６３７４６８ ＸＭ＿０１３８８７０７３ ０.０２５ ０ ０.０８５ ８ ０.２９１ ３ 纯化选择
Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ
ＨＱ６３７４６８ ＸＭ＿０４８７６３４２６ ０.００６ ２ ０.０４８ ６ ０.１２７ ５ 纯化选择
Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ
ＸＭ＿０４８７７０４４５ ＸＭ＿０１３８８７０７３ ０ ０ — —
ＸＭ＿０４８７７０４４５ ＸＭ＿０４８７６３４２６ ０.０１８ ６ ０.０３４ ８ ０.５３４ ４ 纯化选择
Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ
ＸＭ＿０１３８８７０７３ ＸＭ＿０４８７６３４２６ ０.０１８ ６ ０.０３４ ８ ０.５３４ ４ 纯化选择
Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ
ＸＭ＿０４８７７８０６８ ＸＭ＿０１３８８７０７１.３ ０.０４２ １ ０.２２２ ９ ０.１８８ ８ 纯化选择
Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ
２.３.４ ＡＰ２ 蛋白基序分析 由图 ２ 可知ꎬ所有油菜 通过 ｑＲＴ￣ＰＣＲ 检测 ｍｉＲ１７２ 家族的表达水平ꎬ
ＡＰ２ 蛋白候选序列均存在 ３ 个 保 守 基 序 ( 图 ２: 结果如图 ３:Ｂ－Ｅ 所示ꎬｍｉＲ１７２ 家族在早熟和晚熟
Ａ)ꎬ基序 １(Ｍｏｔｉｆ １) 和基序 ２( Ｍｏｔｉｆ ２) 高度保守ꎬ 油菜的根、叶和花中均有表达ꎬ而且花中的表达水
基序 ３(Ｍｏｔｉｆ ３)有 ３ 个氨基酸位置保守性较低( 图 平普遍高于根和叶ꎬ只有 ｍｉＲ１７２ｄ 在晚熟油菜花中
２: Ｂ)ꎬ说明不同油菜 ＡＰ２ 基因功能的差异可能依 的 表 达 量 低 于 根 和 叶ꎮ ｍｉＲ１７２ａ、 ｍｉＲ１７２ｂ 和
赖于基序 ３ 来发挥ꎮ ｍｉＲ１７２ｃ 在早熟油菜不同组织中的表达规律和 ＡＰ２
２.４ ｍｉＲ１７２ 家族与 ＡＰ２ 表达水平及二者相关性分析 一致ꎬ 花 中 表 达 量 高 于 根 和 叶ꎬ 说 明 ｍｉＲ１７２ａ、
由图 ３ 可知ꎬＡＰ２ 在根和叶中的表达水平呈现 ｍｉＲ１７２ｂ 和 ｍｉＲ１７２ｃ 对于早熟油菜 ＡＰ２ 基因有促
为早熟低于晚熟ꎬ但在花中则早熟明显高于晚熟 进 表 达 的 作 用ꎮ 在 晚 熟 油 菜 中ꎬ ｍｉＲ１７２ａ 和
(图 ３:Ａ)ꎮ 对于早熟油菜ꎬ根和叶中 ＡＰ２ 表达量 ｍｉＲ１７２ｃ 在花中表达水平显著高于非花组织ꎬ但差
明显低于花的表达量ꎻ对于晚熟油菜则相反ꎬ呈现 距较小ꎬ说明 ｍｉＲ１７２ａ 和 ｍｉＲ１７２ｃ 对于 ＡＰ２ 基因虽
根和叶中 ＡＰ２ 表达量高于花的ꎮ 早熟油菜花中 表现为负调控ꎬ但作用较小ꎻｍｉＲ１７２ｂ 在花中表达量
ＡＰ２ 表达量显著高于晚熟油菜花ꎬ初步推测 ＡＰ２ 高于非花组织ꎬ与 ＡＰ２ 表达规律相反ꎬ说明在晚熟
基因的综合作用结果是促进开花ꎮ 油菜中 ｍｉＲ１７２ｂ 对于 ＡＰ２ 起到负调控的作用ꎮ 在
通过 ｍｉＲＢａｓｅ 下载得到 ４ 条成熟油菜 ｍｉＲ１７２ 早熟油菜中ꎬｍｉＲ１７２ｄ 在不同组织之间表达量差异
家族成员ꎬ分别是 ｂｎａ￣ｍｉＲ１７２ａ、ｂｎａ￣ｍｉＲ１７２ｂ、ｂｎａ￣ 不显著ꎬ在晚熟油菜中 ｍｉＲ１７２ｄ 表达规律和 ＡＰ２ 一
ｍｉＲ１７２ｃ 和 ｂｎａ￣ｍｉＲ１７２ｄꎮ 经过多重比对 ｍｉＲ１７２ 致ꎬ非花组织的表达量显著高于花的表达量ꎬ说明
家族成员和 ＡＰ２ 基因ꎬ发现 ４ 个家族成员高度保 ｍｉＲ１７２ｄ 对于晚熟油菜 ＡＰ２ 可能起正调控作用ꎬ而
守ꎬ仅存在 １ 个碱基的差异ꎬＡＰ２ 基因和 ｍｉＲ１７２ 在早熟油菜中可能不发挥功能或作用微弱ꎮ
高度同源互补ꎬ仅有 １ ~ ３ 个碱基的差异(图 ３:Ｆ)ꎬ 为进一步确定 ｍｉＲ１７２ 家族各成员与 ＡＰ２ 基
初步推测这些 ＡＰ２ 基因是 ｍｉＲ１７２ 的靶基因ꎮ 因的关系ꎬ分析 ＡＰ２ 和 ｍｉＲ１７２ 家族各成员表达规
