Page 154 - 《广西植物》2024年第5期
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             A. AP2 基因的进化树分析ꎻ B. miR172 进化树分析ꎻ C. pre ̄miR172 进化树分析ꎮ
             A. Phylogenetic analysis of AP2 geneꎻ B. Phylogenetic analysis of miR172ꎻ C. Phylogenetic analysis of pre ̄miR172.
                                         图 1  AP2、miR172、pre ̄miR172 的进化树分析
                                    Fig. 1  Phylogenetic analysis of AP2ꎬ miR72 and pre ̄miR172


            律之间的相关系数(r 值)和差异显著性(P 值)ꎬ结                         中欧洲油菜 pre ̄miR172c 的二级结构自由能最高ꎬ
            果如表 4 所示ꎬ在早熟油菜中 miR172 家族各成员                       欧洲油菜 pre ̄miR172a 的二级结构自由能最低ꎮ 由
            与 AP2 均 呈 显 著 或 高 度 正 相 关ꎬ 在 晚 熟 油 菜 中             图 4 可知ꎬ白菜和甘蓝 pre ̄miR172a 二级结构一致ꎬ
            miR172d 与 AP2 呈高度正相关ꎬ miR172b 与 AP2                但由于 5′端缺少 CGUU 4 个碱基ꎬ3′端缺少 CGACG
            呈负相关ꎬmiR172a 和 miR172c 与 AP2 低度相关ꎬ                 5 个碱基ꎬ导致其在油菜中的二级结构缺少 1 个环
            说明在早熟油菜中 miR172 家族促进 AP2 表达ꎬ但                      区和部分茎部碱基配对ꎬ致使自由能下降 3.1 kcal
                                                                   ̄1
            在晚熟油菜中 miR172b 抑制 AP2 表达ꎬmiR172d                   mol ꎻpre ̄miR172b 在白菜和甘蓝中的二级结构一
            促进 AP2 表达ꎮ                                         致ꎬ但欧洲油菜中则由于碱基差异ꎬ导致其茎部碱
                 综上所述ꎬ油菜 AP2 基因可能促进开花ꎬ而且                       基配对数目增加ꎬ同时ꎬ虽然同为 5 个环区ꎬ但欧洲
            其功能的发挥受到 miR172 的靶向调控ꎮ 在早熟                         油菜中的环更小ꎬ因此二级结构自由能增加ꎬ稳定
            油菜中 miR172 家族促进 AP2 表达水平增加进而                       性更强ꎮ 与白菜相比ꎬ欧洲油菜 pre ̄miR172c 整体
            促进开花ꎬ但其中 miR172d 作用不明显ꎮ 在晚熟                        碱基数更多ꎬ茎部配对数目更多ꎬ导致自由能更高ꎬ
            油菜中ꎬmiR172a 和 miR172c 对于 AP2 的调控作                  二级结构更稳定ꎻ欧洲油菜 pre ̄miR172d 相较于白
            用较小ꎬmiR172b 和 miR172d 二者共同发挥作用                     菜多形成了 1 个环区ꎬ自由能降低ꎬ二级结构稳定性

            降低 AP2 的表达水平ꎬ从而抑制晚熟油菜的开花ꎮ                          更弱一些ꎮ 欧洲油菜中 pre ̄miR172a 的稳定性最
            2.5 Pre ̄miR172 的二级结构分析                             低ꎬ 然 后 依 次 是 pre ̄miR172d、 pre ̄miR172bꎬ pre ̄

                 从 miRBase 下载到 4 个欧洲油菜 pre ̄miR172              miR172c 稳定性最强ꎮ
            家族成员ꎬ4 个白菜 pre ̄miR172 家族成员ꎬ2 个甘蓝                   2.6 miR172 与 pre ̄miR172 功能的相关性分析
            pre ̄miR172 家族成员ꎮ 利用 RNAfold(3.2) 软件预                   通过 qRT ̄PCR 检测 pre ̄miR172 家族 各 成 员
            测油菜、白菜和甘蓝的 pre ̄miR172 家族基因二级结                      的表达水平ꎬ将 pre ̄miR172 家族和 miR172 家族表
            构ꎬ结果如表 5 所示ꎬpre ̄miR172 的基本二级结构均                    达量进行对比ꎬ发现在早熟油菜和晚熟油菜花中
            为茎环结构ꎬ其自由能为 40.3 ~ 67.7 kcalmol ꎬ其               pre ̄miR172a 表达量高于根和叶ꎬmiR172a 也随之
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