Page 157 - 《广西植物》2024年第5期
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5 期               刘芳等: Pre ̄miR172 及 miR172 调控油菜 AP2 基因表达的规律分析                               9 4 5


































                                  图 4  油菜、白菜、甘蓝中 pre ̄miR172 家族二级结构预测图
                     Fig. 4  Prediction of the secondary structure of pre ̄miR172s in rapeꎬ Chinese cabbageꎬ and cabbage


            著高于对照组( 图 6: C)ꎬ晚熟油菜子叶中过表达                         致检测结果不同ꎻ第二ꎬ本研究选择所有候选 AP2
            pre ̄miR172b 时 AP2 表 达 量 低 于 对 照 组ꎬ 过 表 达           序列的保守区设计的通用引物ꎬ并未分别检测每
            pre ̄miR172d 时 AP2 表 达 量 高 于 对 照 组ꎬ 过 表 达           个家族成员的表达水平ꎬ其中发挥正向和负向调
            pre ̄miR172a 和 pre ̄miR172c 时 AP2 表达水平略低             控作用的成员综合作用后呈现了正向调控的效
            于对照组ꎬ但差 异 不 显 著 ( 图 6: D)ꎮ 过 表 达 后                 果ꎬ这也可能是与前人结果不同的原因ꎮ
            AP2 的表达规律与正常油菜中的表达规律一致ꎬ                            3.2 miR172 对 AP2 的调控
            再次证明 miR172 靶向调控 AP2 基因ꎮ                               基因表达受到不同水平的调控ꎬ包括染色体
                                                               水平、转录水平、转录后水平和翻译水平等ꎮ 转录
            3  讨论                                              因子在转录水平中发挥重要作用ꎬ转录因子主要
                                                               通过与靶基因启动子区的 DNA 结合位点结合ꎬ激
            3.1 AP2 参与油菜花发育                                    活或抑制下游基因的转录水平ꎬ进而起到调控基

                 在拟南芥中ꎬAP2 除了在花发育过程中表达ꎬ                        因表达的作用( Vaqueizas et al.ꎬ 2009)ꎮ Saito 等
            在非花组织茎和叶中也有表达ꎬ但在非花组织的                              (2009)研究发现ꎬ转录因子可以与 miRNA 的启动
            表达水平较低ꎬ在花序分生组织和幼嫩花蕾中表                              子区结合ꎬ从而调节 miRNA 表达ꎬmiRNA 通过与
            达增强(赵奇等ꎬ2005)ꎮ 本研究发现ꎬAP2 在油菜                       靶基因的 3′UTR 区特异性结合ꎬ进而在转录后水
            根、叶和花中均有表达ꎬ在早熟油菜的花中 AP2 表                          平抑制靶基因表达或者降解靶 mRNAꎮ 转录因子

            达量最高ꎬ与之规律一致ꎻ在晚熟油菜的根中 AP2                           和 miRNA 的有机结合增加了基因表达调控网络的
            表达量较高ꎬ而花中却较低ꎬ初步推测获得的油菜                             复杂性(熊莉丽等ꎬ2014)ꎮ

            AP2 序列综合作用后可以正向调控开花的进行ꎮ                                AP2 亚家族作为转录因子 AP2 / ERF 基因家
            Wang 等(2019) 认为其发现的 euAP2 家族成员中                    族成员之一ꎬ包含 ANT 和 euAP2 两种类型ꎬ 其中
            部分序列发挥负调控作用ꎬ其他成员在其所选样                              euAP2 家族成员均含有 miR172 的结合位点ꎮ 本
            本中表达水平无明显差异ꎮ 这与本研究结果不                              研究获得的油菜 AP2 序列ꎬ与 miR172 比对后呈现
            同ꎬ第一ꎬ筛选的候选 AP2 序列存在差异ꎬ可能导                          1 ~ 3 个碱基的错配ꎬ均含有 miR172 的结合位点ꎬ
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