Page 157 - 《广西植物》2024年第5期
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5 期 刘芳等: Pre ̄miR172 及 miR172 调控油菜 AP2 基因表达的规律分析 9 4 5
图 4 油菜、白菜、甘蓝中 pre ̄miR172 家族二级结构预测图
Fig. 4 Prediction of the secondary structure of pre ̄miR172s in rapeꎬ Chinese cabbageꎬ and cabbage
著高于对照组( 图 6: C)ꎬ晚熟油菜子叶中过表达 致检测结果不同ꎻ第二ꎬ本研究选择所有候选 AP2
pre ̄miR172b 时 AP2 表 达 量 低 于 对 照 组ꎬ 过 表 达 序列的保守区设计的通用引物ꎬ并未分别检测每
pre ̄miR172d 时 AP2 表 达 量 高 于 对 照 组ꎬ 过 表 达 个家族成员的表达水平ꎬ其中发挥正向和负向调
pre ̄miR172a 和 pre ̄miR172c 时 AP2 表达水平略低 控作用的成员综合作用后呈现了正向调控的效
于对照组ꎬ但差 异 不 显 著 ( 图 6: D)ꎮ 过 表 达 后 果ꎬ这也可能是与前人结果不同的原因ꎮ
AP2 的表达规律与正常油菜中的表达规律一致ꎬ 3.2 miR172 对 AP2 的调控
再次证明 miR172 靶向调控 AP2 基因ꎮ 基因表达受到不同水平的调控ꎬ包括染色体
水平、转录水平、转录后水平和翻译水平等ꎮ 转录
3 讨论 因子在转录水平中发挥重要作用ꎬ转录因子主要
通过与靶基因启动子区的 DNA 结合位点结合ꎬ激
3.1 AP2 参与油菜花发育 活或抑制下游基因的转录水平ꎬ进而起到调控基
在拟南芥中ꎬAP2 除了在花发育过程中表达ꎬ 因表达的作用( Vaqueizas et al.ꎬ 2009)ꎮ Saito 等
在非花组织茎和叶中也有表达ꎬ但在非花组织的 (2009)研究发现ꎬ转录因子可以与 miRNA 的启动
表达水平较低ꎬ在花序分生组织和幼嫩花蕾中表 子区结合ꎬ从而调节 miRNA 表达ꎬmiRNA 通过与
达增强(赵奇等ꎬ2005)ꎮ 本研究发现ꎬAP2 在油菜 靶基因的 3′UTR 区特异性结合ꎬ进而在转录后水
根、叶和花中均有表达ꎬ在早熟油菜的花中 AP2 表 平抑制靶基因表达或者降解靶 mRNAꎮ 转录因子
达量最高ꎬ与之规律一致ꎻ在晚熟油菜的根中 AP2 和 miRNA 的有机结合增加了基因表达调控网络的
表达量较高ꎬ而花中却较低ꎬ初步推测获得的油菜 复杂性(熊莉丽等ꎬ2014)ꎮ
AP2 序列综合作用后可以正向调控开花的进行ꎮ AP2 亚家族作为转录因子 AP2 / ERF 基因家
Wang 等(2019) 认为其发现的 euAP2 家族成员中 族成员之一ꎬ包含 ANT 和 euAP2 两种类型ꎬ 其中
部分序列发挥负调控作用ꎬ其他成员在其所选样 euAP2 家族成员均含有 miR172 的结合位点ꎮ 本
本中表达水平无明显差异ꎮ 这与本研究结果不 研究获得的油菜 AP2 序列ꎬ与 miR172 比对后呈现
同ꎬ第一ꎬ筛选的候选 AP2 序列存在差异ꎬ可能导 1 ~ 3 个碱基的错配ꎬ均含有 miR172 的结合位点ꎬ