Page 186 - 《广西植物》2024年第5期

９ ７ ４ 广 西 植 物 ４４ 卷
因表达水平上调ꎮ 有研究指出ꎬ磷素也会影响酚 １.３ 试验设计
酸类代谢产物的合成积累ꎬ参与酚酸和类黄酮生 施肥使用分析纯的尿素、磷酸二氢钙和氯化
物合成途径的基因 ＰＡＬ、４ＣＬ 在磷胁迫下的不同表 钾ꎬ氮磷钾 ３ 种主要营养分别用低养分( 不施肥)、
达ꎬ在高磷处理下异绿原酸 Ｃ、隐绿原酸、异绿原酸 正常养分和高养分 ３ 个浓度梯度ꎬ共设置 ７ 个处理
Ｂ 等酚酸含量显著降低( Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２３)ꎮ 与 组 分 别 为 ＮＰＫ、 Ｎ ＰＫ、 Ｎ ＰＫ、 ＮＰ Ｋ、 ＮＰ Ｋ、
０ １ ０ １
氮和磷不同ꎬ钾不是有机化合物的一部分ꎬ但钾作 ＮＰＫ 、ＮＰＫ ꎬ其中氮处理为 Ｎ ＰＫ、ＮＰＫ、Ｎ ＰＫꎻ磷
１
０
１
０
为主要阳离子或各种酶的辅助因子在植物的生理 处理为 ＮＰ Ｋ、ＮＰＫ、 ＮＰ Ｋꎻ钾处理为 ＮＰＫ 、ＮＰＫ、
０ １ ０
和生化过程中起着重要作用ꎬ如酶活化、离子稳 ＮＰＫ ꎮ Ｎ 、Ｐ 和 Ｋ 为不施肥ꎬ正常养分施肥( Ｎ:
１ ０ ０ ０
￣１
￣１
￣１
态、渗透调节和蛋白质合成等( Ｘｕｅ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２２)ꎮ ０.２０ ｇｋｇ ꎬＰ:０.１５ ｇｋｇ ꎬＫ:０.１５ ｇｋｇ )ꎬ高
然而ꎬ目前尚未有任何关于施肥水平影响有柄石 养分施肥( Ｎ :０.４０ ｇｋｇ ꎬＰ :０.３０ ｇｋｇ ꎬＫ :
￣１
￣１
１ １ １
￣１
韦酚酸类活性成分合成积累的研究报道ꎮ ０.３０ ｇｋｇ )ꎮ 将有柄石韦植株移栽于栽培盆( 长
为了探讨有柄石韦对不同氮磷钾肥浓度的生 ３０ ｃｍꎬ 宽 １５ ｃｍꎬ 高 １０ ｃｍ)中ꎬ每个盆装 ２.８ ｋｇ 混
理响应及绿原酸( ＣＧＡ) 合成积累的规律ꎬ本研究 合基质ꎮ 每个处理设置 ３ 次重复ꎬ每个重复 １５ 株
测定了不同浓度氮磷钾处理下有柄石韦的抗氧化 苗ꎮ 分两次施肥ꎬ０ ｄ 施一半肥ꎬ３０ ｄ 施另一半肥ꎬ
酶 ＳＯＤ、ＣＡＴ 及渗透调节物质脯氨酸含量的变化ꎬ 处理 ６０ ｄꎬ每隔 ３ ｄ 自来水浇灌 １ 次ꎬ其他管理
以及 ＣＧＡ 合成关键酶苯丙氨酸转氨酶( ＰＡＬ)、肉 一致ꎮ
桂酸￣４￣羟 化 酶 ( Ｃ４Ｈ)、４￣香 豆 酰 辅 酶 Ａ 连 接 酶 １.４ 生理指标测定
(４ＣＬ)、莽草酸羟基肉酰转移酶( ＨＣＴ)、奎宁酸羟 超氧化物歧化酶( ＳＯＤ) 活性采用氯化硝基四
基肉桂酰转移酶( ＨＱＴ)、香豆酸￣３￣羟化酶( Ｃ３Ｈ) 氮唑蓝(ＮＢＴ)光还原法(李合生ꎬ２０００)ꎻ用万分之
的活性和 ＣＧＡ 的含量ꎬ以期阐明有柄石韦对不同 一天平称取 ０.１００ ｇ 的样品ꎬ加入 １ ｍＬ 提取液冷
￣１
浓度氮磷钾肥的生理响应及 ＣＧＡ 合成积累规律ꎬ 冻研磨ꎬ以 ８ ０００ ｒｍｉｎ 在 ４ ℃ 下离心 １０ ｍｉｎ 后
为有 柄 石 韦 的 引 种 驯 化 和 人 工 栽 培 提 供 理 论 取上清液ꎬ上清液处理后于酶标仪 ５６０ ｎｍ 下测定
依据ꎮ 样品的吸光度ꎬ当黄嘌呤氧化酶偶联反应体系中
抑制百分率为 ５０％时ꎬ反应体系中的 ＳＯＤ 酶活力
１ 材料与方法 定义为一个酶活力单位ꎮ 过氧化氢酶( ＣＡＴ) 活性
采用分光光度法测定(赵亚华ꎬ２０００)ꎬ酶提取步骤
１.１ 供试材料 同上ꎬ每克组织在反应体系中每分钟催化 １ μｍｏｌ
本试验于 ２０２２ 年 ７—９ 月在广西中医药大学 Ｈ Ｏ 定义为一个酶活单位ꎮ 脯氨酸含量测定采用
２ ２
温室大棚内进行ꎬ供试植株为 １ 年生有柄石韦组 茚三酮法测定(高俊凤ꎬ２００６)ꎮ
培苗ꎬ选取生长状态一致的有柄石韦植株ꎬ将根部 １.５ ＣＧＡ 含量测定
冲洗干净后用 １ ０００ 倍多菌灵浸泡根部 １５ ｍｉｎꎬ移 ＣＧＡ 含量的测定参照« 中国药典» ( 国家药典
栽后置于温室大棚内培养ꎮ 使用尿素( 津欧博凯 委员会ꎬ２０２０)并进行稍作改动ꎮ 将药材烘干粉碎
化工有限公司)、磷酸二氢钙( 天津市大茂化学试 后过筛ꎬ称取有柄石韦粉末 ０.２ ｇꎬ置于 ５０ ｍＬ 离心
剂厂)和氯化钾( 天津市北辰方正试剂厂) 分别对 管中ꎬ加入 ５０％的甲醇 １５ ｍＬꎬ静置 ２４ ｈ 后再加入

有柄石韦进行氮磷钾养分处理ꎮ ５０％的甲醇 １０ ｍＬ 二次提取ꎬ药渣与提取液超声处
１.２ 供试土壤 理 ４５ ｍｉｎ 后放冷至室温补足重量ꎬ１０ ０００ ｒｍｉｎ ￣１
供试土 壤 为 酸 性 红 色 土 壤ꎬ土 壤 经 灭 菌、风 常温离心 １０ ｍｉｎ 后取上清液 ０.２２ μｍ 微孔滤膜过
干、打碎、混 匀 后 用 于 盆 栽 试 验ꎮ 混 合 基 质 为 红 滤后待测ꎮ 精密称定 ＣＧＡ 标准品( 北京索莱宝科

土 ∶ 育 苗 基 质 ( 有 机 质 ＋ 腐 殖 酸) ∶ 珍 珠 岩 ＝ 技有限公司ꎬ货号:９２９ Ｎ０２２) ２.１７ ｍｇꎬ使用 ５０％
２ ∶ ２ ∶ １ꎬ混 合 基 质 理 化 性 质 为 ｐＨ ４. ９、 全 氮 甲醇配置浓度为 ０.２１７ ｍｇｍＬ 的标准品溶液ꎬ分
￣１
０.１０％、全磷 ０.１２％、全钾 ２.５０％、有机质 １６.０ ｇ 别稀释成浓度为 ０.０２１ ７、０.０４３ ４、０.０８６ ８、０.１３０
￣１ ￣１ ２、０.１７３ ６、０.２１７ ０ ｍｇｍＬ 的标准曲线ꎬ以对照
￣１
ｋｇ 、 水 解 性 氮 ７３. ０ ｍｇ ｋｇ 、 速 效 磷 ８. ８ ｍｇ
￣１ ￣１ 品浓度为横坐标 ｘꎬ峰面积为纵坐标 ｙꎬ线性回归方
ｋｇ 、速效钾 ２４７ ｍｇｋｇ ꎮ