Page 66 - 《广西植物》2024年第5期

８ ５ ４ 广 西 植 物 ４４ 卷
这个范围被视作非根际土壤ꎮ 根际是植物根系与 (１１６°０９′—１１８°１０′ Ｅ、３３°１８′—３４°３８′ Ｎ)ꎬ地处安徽
土壤的一个特殊界面ꎮ 在这个特殊的微域ꎬ植物、 北部ꎬ淮河平原腹地ꎮ ‘中山杉 １１８’ 种植基地大小
土壤、微生物三者之间的物质与能量交换最为活 为 １００ ｍ × ２００ ｍꎬ地势平坦ꎬ立地条件一致ꎬ土壤类
跃ꎬ对生态系统中的养分循环具有重要作用ꎮ 土 型为黄壤土ꎮ 供试材料‘中山杉 １１８’ (１ 年生扦插
壤细菌是土壤生态系统的重要组成部分ꎬ占土壤 苗)购于江苏靖江ꎬ现为 ４ 年生幼苗ꎮ 对‘ 中山杉
微生物总量的 ７０％ ~ ９０％ ( 李新等ꎬ２０１６ꎻ徐丽霞 １１８’在大田种植过程中采用人工除草ꎬ适时浇水、

和何永吉ꎬ２０１９ꎻ伍文宪等ꎬ２０２０)ꎮ 有研究表明ꎬ 施肥ꎬ所施肥料为尿素ꎮ ２０２０ 年 ６ 月下旬ꎬ避开园
根际促植物生长细菌( ＰＧＰＲ) 可以通过自身代谢 路ꎬ随机选取一块大小为 ５０ ｍ × ５０ ｍ 的样地ꎬ先基
活动将土壤营养物质分解、转化为植物可吸收利 于对角线选取中心样点ꎬ再在对角线上选取 ４ 个与

用的形 态ꎬ 从 而 促 进 植 物 生 长 ( Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｙｙａ ＆ 中心样点距离相等的点作为样点ꎬ即采用五点法选
Ｊｈａꎬ ２０１２ꎻ李岩等ꎬ２０１８)ꎮ 由于部分细菌分泌的 取‘中山杉 １１８’土壤样品ꎻ分别在 ５ 个采样点上挖

酶、激素等物质可提高植物的适应性ꎬ如抗干旱、 取‘中山杉 １１８’的完整根系ꎬ去除根部大块土壤ꎬ晃
盐碱以及病原体侵害等ꎬ为植物健康生长提供保 动根部落下来的松散土壤作为非根际土壤样品ꎬ分
障ꎬ因此根际微生物与植物生长和健康密切联系 别标记为 ＮＲ１、ＮＲ２、ＮＲ３、ＮＲ４ 和 ＮＲ５ꎬ使用无菌刷
(邱洁等ꎬ２０１９)ꎮ 同时ꎬ植物又可通过根系活动改 收集相对应的根部残留的土壤作为根际土壤样品ꎬ
变根际土壤的养分含量及其他理化性质ꎬ进而改 分别标记为 Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４ 和 Ｒ５ꎮ
变根际微生物群落的组成ꎬ使得根际与非根际土 １.２ 方法
壤微生物群落组成和多样性具有差异( 葛应兰和 １.２.１ 土壤理化性质测定 用玻璃电极法测定土
孙廷ꎬ２０２０ꎻ郭辉和唐卫平ꎬ２０２０)ꎮ 壤 ｐＨꎻ电极法测定电导率ꎻ重铬酸钾氧化－外加热
‘中山杉 １１８’[(Ｔａｘｏｄｉｕｍ ｄｉｓｔｉｃｈｕｍ × Ｔａｘｏｄｉｕｍ 法测定土壤有机碳及有机质含量ꎻ硫酸－加速剂消
ｍｕｃｒｏｎａｔｕｍ ) × Ｔａｘｏｄｉｕｍ ｍｕｃｒｏｎａｔｕｍ] 是 ‘ 中 山 杉 解ꎬ凯氏法测定全氮含量ꎻ采用 ＮａＯＨ 碱熔ꎬ钼锑
３０２’与其父本墨西哥落羽杉回交得到的优良品 抗分光光度法测定土壤全磷含量ꎬ原子吸收分光
种ꎬ是国家林业和草原局林木良种审定委员会认 光度法测定土壤全钾含量ꎻ碱解扩散法测定水解
定的良种( 编号:国 Ｒ￣ＳＣ￣ＴＤ￣００１￣２００６) ( 殷云龙 性氮含量ꎻ碳酸氢钠浸提ꎬ钼锑抗比色法测定土壤
等ꎬ２０１９)ꎮ ‘中山杉 １１８’具有速生、观赏价值高、 速效磷含量ꎻ乙酸铵浸提－原子吸收法测定土壤速
耐盐碱、耐水湿等优点ꎬ已经广泛应用于园林绿 效钾含量ꎻＤＴＰＡ－ＴＥＡ 浸提法ꎬＩＣＰ －ＡＥＳ 测定土壤
化、农田林 网 和 河 湖 滩 涂 等 生 态 系 统 ( 马 林 等ꎬ 有效铜锌铁锰ꎻ乙酸铵浸提－ＩＣＰ－ＡＥＳ 测定土壤速
２０１１)ꎮ 目前ꎬ关于‘中山杉 １１８’ 的研究主要集中 效钠镁钙含量(薛会英等ꎬ２０２１ꎻ张金波等ꎬ２０２２)ꎮ
在优良品种的引种应用、繁育栽培、杂交育种、杂 每个指标均重复测定 ３ 次ꎮ
交优势利用与机理分析、耐水淹胁迫机理、材质等 １.２.２ 基因组 ＤＮＡ 提取、ＰＣＲ 扩增及序列分析 采
方面ꎬ而对其与土壤生态系统的互作鲜有报道ꎮ 用 ＣＴＡＢ 法提取样本基因组 ＤＮＡꎬ并检测其纯度和
因此ꎬ本文以 ４ 年生‘中山杉 １１８’根际和非根际土 浓度ꎮ 使 用 高 效 高 保 真 酶 Ｐｈｕｓｉｏｎ ® Ｈｉｇｈ￣Ｆｉｄｅｌｉｔｙ

壤为研究对象ꎬ基于 １６Ｓ ｒＲＮＡ 高通量测序技术ꎬ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ ｗｉｔｈ ＧＣ Ｂｕｆｆｅｒꎬ基于引物 ５１５Ｆ:５′￣
揭示两者土壤细菌的群落结构、物种组成和差异 ＧＴＧＣＣＡＧＣＭＧＣＣＧＣＧＧ￣３′ꎬ８０６Ｒ:５′￣ＧＧＡＣＴＡＣＨＶＧ

及其与土壤理化因子的关系ꎬ明确‘ 中山杉 １１８’ ＧＧＴＷＴＣＴＡＡＴ￣３′扩增细菌 １６Ｓ Ｖ４ 区ꎮ 回收目标产
对土壤质量和土壤微生物的影响ꎬ以期为探究‘ 中 物后构建文库ꎬ检测合格后上机测序ꎮ 使用 ＦＬＡＳＨ
山杉 １１８’速生林学性状与土壤理化性质和微生物 ｖｅｒｓｉｏｎ １.２.７(ｈｔｔｐ:/ / ｃｃｂ.ｊｈｕ.ｅｄｕ / ｓｏｆｔｗａｒｅ / ＦＬＡＳＨ/ )

的关系提供基础数据ꎮ 和 Ｑｉｉｍｅ ｖｅｒｓｉｏｎ １.９.１(ｈｔｔｐ:/ / ｑｉｉｍｅ.ｏｒｇ/ ｓｃｒｉｐｔｓ/ ｓｐｌｉｔ＿
ｌｉｂｒａｒｉｅｓ＿ｆａｓｔｑ. ｈｔｍｌ) 对 Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＮｏｖａＳｅｑ 测序的下
１ 材料与方法 机数 据 ( Ｒａｗ ＰＥ) 进 行 拼 接 和 质 控 得 到 Ｃｌｅａｎ
Ｔａｇｓꎬ 利 用 ｖｓｅａｒｃｈ ｖｅｒｓｉｏｎ １. ３. ０ ( ｈｔｔｐｓ: / / ｇｉｔｈｕｂ.
１.１ 样品采集 ｃｏｍ / ｔｏｒｏｇｎｅｓ/ ｖｓｅａｒｃｈ / )进行嵌合体过滤ꎬ得到用于
采样地位于安徽省宿州市埇桥区宿州植物园 后 续 分 析 的 有 效 数 据 ( Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ Ｔａｇｓ)ꎮ 利 用