Page 192 - 《广西植物》2025年第11期

２ １ ３ ６ 广 西 植 物 ４５ 卷
ｂｙ ａ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ ｈｉｇｈ￣ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ: (１) Ｔｈｅｒｅ
ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｒａｔｉｏｓ ｏｆ ＥＬＦ ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ￣ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ａｎｄ
ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ. (２) Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ７０ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ １６ ｓａｍｐｌｅｓꎬ ａｎｄ ２０ ｓｐｅｃｉｅｓ￣ｌｅｖｅｌ ｔａｘａ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ
ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ａｎｄ ＩＴＳ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ. Ｔｈｅｙ ｂｅｌｏｎｇｅｄ ｔｏ １ ｐｈｙｌｕｍꎬ ２ ｃｌａｓｓｅｓꎬ ６ ｏｒｄｅｒｓꎬ ８ ｆａｍｉｌｉｅｓꎬ １２ ｇｅｎｅｒａꎬ
ａｎｄ ２０ ｓｐｅｃｉｅｓ. Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ ｗａｓ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｆｕｎｇａｌ ｃｌａｓｓꎬ ａｍｏｎｇ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｇｅｎｅｒａ ｗｅｒｅ Ｎｅｍａｎｉａ
ａｎｄ Ｘｙｌａｒｉａ. (３) Ｔｈｅ α ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｎｄｏｌｉｃｈｅｎｉｃ ｆｕｎｇｉ ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎ Ｐａｒｍｏｔｒｅｍａ ｗａｓ
ｖｅｒｙ ｒｉｃｈꎬ ａｎｄ ９ ｐｈｙｌａ ａｎｄ ７ ｃｌａｓｓｅｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄꎬ ａｎｄ ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｔｏ Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓꎬ Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ ａｎｄ
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｔｅｓ ａｌｓｏ ａｃｃｏｕｎｔｅｄ ｆｏｒ ａ ｌａｒｇｅ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ. (４) Ｔｈｅ ｆｕｎｇａｌ ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｔｗｏ ｓｐｅｃｉｅｓ
(Ｐ. ｒｅｔｉｃｕｌａｔｕｍ ａｎｄ Ｐ. ｔｉｎｃｔｏｒｕｍ) ｔｅｎｄｅｄ ｔｏ ｂｅ ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｗａｓ ｈｉｇｈ ａｎｄ ｅｖｅｎｌｙ
ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ. (５) Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｆｕｎｇａｌ ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ＦＵＮＧｕｉｌｄ ｄａｔａｂａｓｅ ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔ ｔｈｅ ｆｕｎｇａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ ｔｈｅ ｇｅｎｕｓ Ｐａｒｍｏｔｒｅｍａ ｍａｉｎｌｙ ｉｎｃｌｕｄｅｄ ｐａｔｈｏｔｒｏｐｈｓꎬ ｓｙｍｂｉｏｔｒｏｐｈｓ ａｎｄ
ｓａｐｒｏｔｒｏｐｈｓ. Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔｗｏ ｍｅｔｈｏｄｓ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｅａｃｈ ｏｔｈｅｒ ａｎｄ ｃａｎ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ
ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｄｏｌｉｃｈｅｎｉｃ ｆｕｎｇｉ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｐａｒｍｏｔｒｅｍａꎬ ｅｎｄｏｌｉｃｈｅｎｉｃ ｆｕｎｇｉꎬ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅꎬ ｈｉｇｈ￣ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇꎬ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ

地衣是真菌和绿藻或蓝细菌结合的共生体ꎬ 性ꎬ导致在培养基的选择、培养时间、物种之间相
被誉为植被演替中的“ 先锋植物” ( 彭霄鹏和温仕 互作用等方面缺乏标准(王红阳等ꎬ２０２１)ꎬ而高通
良ꎬ２０１９)ꎮ 构成地衣的共生真菌又称为地衣型真 量测序技术可以弥补传统培养的选择性局限ꎬ但
菌ꎬ而存在于地衣体内的非地衣型真菌ꎬ被称为地 单靠分子技术不能得到单克隆菌株ꎬ也不能在菌
衣内生 真 菌 ( ｅｎｄｏｌｉｃｈｅｎｉｃ ｆｕｎｇｉꎬ ＥＬＦ) ( 程 璐 等ꎬ 株水平上进行生态功能研究ꎮ 因此ꎬ只有将二者
２０２１)ꎬ与宿主共同进化ꎬ对地衣的生长发育发挥 结合起来用高通量测序技术指导分离培养的方
着积极的促进作用( Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２４)ꎮ 大叶梅 向ꎬ才是研究微生物生态的最佳办法( 许文涛等ꎬ
属( Ｐａｒｍｏｔｒｅｍａ Ａ. Ｍａｓｓａｌ.) 是梅衣科中次于黄梅 ２００９)ꎮ 高通量测序技术是自 ２００５ 年逐步发展起
属 [Ｘａｎｔｈｏｐａｒｍｅｌｉａ ( Ｖａｉｎ.) Ｈａｌｅ] 的第二大属ꎬ包 来的新兴分子生物学技术ꎬ通过结合高通量测序
括约 ３５０ 种ꎬ其中中国大陆 ４３ 种ꎬ多为大型叶状 技术和传统培养方法对环境微生物的群落结构和
地衣ꎬ主要分布在热带、亚热带区域( Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ 多样性进行深入分析的研究越来越多( 贾鑫等ꎬ
２００５ꎻ任强ꎬ２０２３)ꎮ 在福建万木林自然保护区ꎬ该 ２０２４ꎻ孟桂花等ꎬ２０２４ꎻ刘顺卿等ꎬ２０２４)ꎮ
属地衣分布广泛ꎬ易发现ꎬ便于采集ꎬ生物量大( 郭 本研究以福建万木林大叶梅属地衣内生真菌
堂丽等ꎬ２０２４)ꎮ (ＥＬＦ)群落为研究对象ꎬ依托纯培养与高通量测
福建万木林自然保护区( 以下简称福建万木 序技术相结合的方法ꎬ通过形态学观察、ＩＴＳ 测序、
林)是我国典型的常绿阔叶林山地森林生态系统ꎬ α / β 多样性指数计算及 ＦＵＮＧｕｉｌｄ 功能注释等技
地处武夷山脉东南侧的低山丘陵地带ꎬ主山脊呈南 术手段ꎬ拟探讨以下问题:(１) 高通量测序与纯培
北走向ꎬ最高峰海拔 ５５６ ｍꎮ 该保护区占地面积 养方法对 ＥＬＦ 群落分类组成解析的差异性及互补
１０６.７ ｈｍ ꎬ森林覆盖率高达 ９６.１％ꎮ 历经 ６００ 多年 性ꎻ(２)大叶梅属 ＥＬＦ 群落的物种多样性特征及其
２
封山保护和复杂的地形及丰富的水热资源造就了 优势类群的生态分布规律ꎻ(３) 不同宿主地衣( 粉
其独特的生态环境ꎬ为植物资源的繁育提供了优越 芽网纹大叶梅与大叶梅) 间真菌群落结构一致性
的自然条件(马良等ꎬ２０１３)ꎮ 往年的研究主要侧重 及功能代谢类群的适应性关联ꎮ

于群 落 生 态 学 和 生 态 系 统 生 态 学 ( 周 艳 芬 等ꎬ
２０１４)ꎬ鲜有对保护区地衣内生真菌群落生物多样 １ 材料与方法
性的研究ꎮ 因此ꎬ大叶梅属内生真菌的研究有助于
更深入地了解该保护区的地衣内生真菌物种多 １.１ 研究标本采集
样性ꎮ 本研究所用的大叶梅属样品于 ２０２３ 年 １１ 月采
传统培养分离方法具有一定的盲目性和随机 自福建万木林ꎬ共 １６ 份ꎬ２ 个物种( 粉芽网纹大叶