Page 144 - 《广西植物》2025年第12期
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伤害)(吴萍等ꎬ２０１７)ꎮ 因此ꎬ开展兴安白芷与川白 自治区包头市包头医学院植物园) 经成都中医药
芷低温胁迫分子机制及其相关基因的研究具有重 大学高继海副教授鉴定ꎬ确定其品种为川白芷和
大意义ꎬ不但有助于明晰白芷种子萌发机制ꎬ为优 兴安白芷ꎮ 参照朱兴龙等 (２０２２) 制定的白芷种
化白芷种子的萌发和休眠调控提供理论依据ꎬ而且 子质量评价标准ꎬ选取川白芷种子和兴安白芷种
可为农业生产和种子保存提供参考与应用价值ꎮ 子各 ３００ 粒ꎬ随机分 ６ 组ꎮ 置于人工气候箱ꎬ分两
本研究以探究低温胁迫下兴安白芷与川白芷 个阶段进行萌发培养:第一阶段光照处理 １２ ｈꎬ常
种子萌发的关键影响因素ꎮ 对川白芷和兴安白芷 温 １５ / ２５ ℃ ꎬ湿度 ７５％ＲＨꎻ第二阶段黑暗处理 １２
低温胁迫下萌发的种子进行活力评价与转录分 ｈꎬ低温 ５ / １０ ℃ ꎬ湿度 ７５％ ＲＨꎮ 观察不同温度下
析ꎬ并对 ＡＢＡ 与 ＧＡ 相关差异表达基因进行筛选 种子萌发情况ꎮ 选取根长≥ ２ ｍｍ 且除去棱与翅
与 ｑＲＴ￣ＰＣＲ 验证ꎬ拟探讨如下问题:(１) 不同温度 的种子ꎬ按处理方法分组( Ｘ 为兴安白芷 ２５ / １０ ℃
对兴安白芷与川白芷种子活力影响ꎻ(２) 低温胁迫 处理组ꎻＸＬ 为兴安白芷 １５ / ５ ℃ 处理组ꎻＣ 为川白
下ꎬ转录水平研究兴安白芷和川白芷种子的转录 芷 ２５ / １０ ℃ 处 理 组ꎻ ＣＬ 为 川 白 芷 １５ / ５ ℃ 处 理
组特征基因与激素相关差异基因表达对其萌发的 组)ꎬ每个样本设置 ３ 次生物学重复ꎬ并进行转录
调控作用ꎮ 以期为实际生产中兴安白芷与川白芷 组测序ꎮ
的栽培和育种提供数据支持ꎬ为白芷种子越冬与 １.２ 实验方法
提高抗寒能力研究提供新的思路与参考ꎮ １.２.１ 总 ＲＮＡ 的提取与文库构建 分别采集兴安白
芷和川白芷的常温萌发种子和低温萌发种子ꎬ共 ２
１ 材料与方法 个测序组别(表 １)ꎬ每组设置 ３ 个生物学重复ꎮ 委
托北京百迈客生物科技有限公司采用分子生物学
１.１ 实验材料 方法检测提取 Ｔｏｔａｌ ＲＮＡꎻ后反转录成 ｃＤＮＡꎬ构建
实验所用川白芷种子( 采自四川省遂宁市船 ｃＤＮＡ 测序文库ꎮ 测序数据已上传至国家基因组科
山区白芷种植基地)与兴安白芷种子(采自内蒙古 学数据中心(ＢｉｏＰｒｏｊｅｃｔ:ＰＲＪＣＡ０３１８５４)ꎮ
表 １ 转录组测序组别分类
Ｔａｂｌｅ １ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｇｒｏｕｐｓ
测序组名 处理方式 ＮＧＤＣ 样品登录号
Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｇｒｏｕｐ ｎａｍｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ ＮＧＤＣ ａｃｃｅｓｓｉｏｎ
Ｘ１ 常温(２５ / １０ ℃ )萌发的兴安白芷种子 ＳＡＭＣ４２９８５２６
Ｓｅｅｄｓ ｏｆ Ａ. ｄａｈｕｒｉｃａ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｎｇ ａｔ ｎｏｒｍａｌ￣ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ (２５ / １０ ℃ )
Ｘ２ ＳＡＭＣ４２９８５２７
Ｘ３ ＳＡＭＣ４２９８５２８
ＸＬ１ 低温(１５ / ５ ℃ )萌发的兴安白芷种子 ＳＡＭＣ４２９８５２９
Ｓｅｅｄｓ ｏｆ Ａ. ｄａｈｕｒｉｃａ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｎｇ ｕｎｄｅｒ ｌｏｗ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ (１５ / ５ ℃ )
ＸＬ２ ＳＡＭＣ４２９８５３０
ＸＬ３ ＳＡＭＣ４２９８５３１
Ｃ１ 常温(２５ / １０ ℃ )萌发的川白芷种子 ＳＡＭＣ４２９８５３５
Ｓｅｅｄｓ ｏｆ Ａ. ｄａｈｕｒｉｃａ ｃｖ. ‘Ｈａｎｇｂａｉｚｈｉ’ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｎｇ ａｔ ｎｏｒｍａｌ￣ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ (２５ / １０ ℃ )
Ｃ２ ＳＡＭＣ４２９８５３６
Ｃ３ ＳＡＭＣ４２９８５３７
ＣＬ１ 低温(１５ / ５ ℃ )萌发的川白芷种子 ＳＡＭＣ４２９８５３８
Ｓｅｅｄｓ ｏｆ Ａ. ｄａｈｕｒｉｃａ ｃｖ. ‘Ｈａｎｇｂａｉｚｈｉ’ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｎｇ ｕｎｄｅｒ ｌｏｗ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ (１５ / ５ ℃ )
ＣＬ２ ＳＡＭＣ４２９８５３９
ＣＬ３ ＳＡＭＣ４２９８５４０
１.２.２ 转录组测序、组装、功能注释及基因表达与 平台 ＢＭＫＣｌｏｕｄ( ｗｗｗ.ｂｉｏｃｌｏｕｄ.ｎｅｔ) 提供的生物信
差异富集分析 使用 Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＮｏｖａＳｅｑ ６０００ 测序 息学分析平台构建 ２ 个白芷品种的 Ｕｎｉｇｅｎｅ 库ꎬ并
平台进行 ＰＥ１５０ 模式测序ꎮ 下机数据经百迈客云 将其进行 ＮＲ、Ｓｗｉｓｓ￣Ｐｒｏｔ、ＣＯＧ、ＫＯＧ、ｅｇｇＮＯＧ４. ５、
