Page 97 - 《广西植物》2025年第2期
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２ 期 李金玲等: 壮药水龙的苯丙素和黄酮类成分及其细胞毒活性研究 ２ ９ ９
６０ ∶ ４０ꎬＶ/ Ｖ)分离ꎬ得到化合物 ６(９.０ ｍｇ)ꎮ Ｓ￣５ 经 [Ｍ＋ Ｎａ] ꎮ 分 子 式 为 Ｃ Ｈ Ｏ ꎮ Ｈ￣ＮＭＲ ( ５００
＋
１
１６ １８ ４
Ｃ 柱色谱分离ꎬ用 １０％ ~ １００％甲醇－水梯度洗脱ꎬ ＭＨｚꎬＣＤ ＯＤ) δ:７. ８４ ( １Ｈꎬｄꎬ Ｊ ＝ ９. ５ Ｈｚꎬ Ｈ￣４)ꎬ
１８ ３
得到组分 Ｓ￣５￣１ － Ｓ￣５￣１０ꎻＳ￣５￣３ 用半制备液相色谱 ７.０５(１ＨꎬｓꎬＨ￣６)ꎬ６.２８(１ＨꎬｄꎬＪ ＝ ９.５ ＨｚꎬＨ￣３)ꎬ
(甲醇－水 ＝ ５５ ∶ ４５ꎬＶ/ Ｖ) 分离ꎬ得到化合物 ２(７.３ ５.１４ ( １Ｈꎬ ｔꎬ Ｊ ＝ ７. ３ Ｈｚꎬ Ｈ￣２′)ꎬ ３. ８６ ( ３Ｈꎬ ｓꎬ ７￣
ｍｇ)ꎻＳ￣５￣５ 用半制备液相色谱(甲醇－水 ＝ ５５ ∶ ４５ꎬ ＯＣＨ )ꎬ３.８４(３Ｈꎬｓꎬ５￣ＯＣＨ )ꎬ３.４８(２ＨꎬｄꎬＪ ＝ ７.２
３ ３
Ｖ/ Ｖ)分离ꎬ得到化合物 ８(４.９ ｍｇ)ꎮ ＨｚꎬＨ￣１′)ꎬ １. ８０ ( ３Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣４′)ꎬ １. ６３ ( ３Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣
乙酸乙酯部位(１６０.０ ｇ)经硅胶柱色谱分离ꎬ用 ５′)ꎻ Ｃ￣ＮＭＲ( １２５ ＭＨｚꎬＣＤ ＯＤ) δ:１６３. ４ ( Ｃ￣２)ꎬ
１３
３
二氯甲烷－甲醇(１００ ∶ ０→０ ∶ １００ꎬＶ/ Ｖ) 梯度洗脱ꎬ １１６.２(Ｃ￣３)ꎬ１４６.０( Ｃ￣４)ꎬ１５１.５( Ｃ￣５)ꎬ１０８.９( Ｃ￣
根据 薄 层 色 谱 检 识 结 果 合 并 得 到 １１ 个 组 分 ６)ꎬ１５２.０( Ｃ￣７)ꎬ１２４.９( Ｃ￣８)ꎬ１４８.４( Ｃ￣９)ꎬ１１５.０
Ｙ￣１－Ｙ￣１１ꎮ 其中ꎬＹ￣３ 经 Ｃ 柱色谱分离ꎬ用 １０％ ~ (Ｃ￣１０)ꎬ２３.５( Ｃ￣１′)ꎬ１２２.７( Ｃ￣２′)ꎬ１３３.５( Ｃ￣３′)ꎬ
１８
１００％甲醇 － 水梯度洗脱ꎬ 得到 ２１ 个组分 Ｙ￣３￣１ － １８.１(Ｃ￣４′)ꎬ２５.９( Ｃ￣５′)ꎬ６１.５(５￣ＯＣＨ )ꎬ５６.５(７￣
３
Ｙ￣３￣２１ꎻＹ￣３￣９ 用 半 制 备 液 相 色 谱 ( 甲 醇 － 水 ＝ ＯＣＨ )ꎮ 以上数据与文献( 朱勤凤等ꎬ２０２１) 报道
３
５０ ∶ ５０ꎬＶ/ Ｖ)分离ꎬ得到化合物 ４(２６.５ ｍｇ)ꎻＹ￣３￣１１ 基 本 一 致ꎬ 故 鉴 定 该 化 合 物 为 九 里 香 内 酯
用半制备液相色谱(甲醇－水 ＝ ５８ ∶ ４２ꎬＶ/ Ｖ) 分离ꎬ (ｃｏｕｍｕｒｒａｙｉｎ)ꎮ
得到化合物 １３(７.７ ｍｇ)、化合物 １２(６.７ ｍｇ)、化合 化合物 ２ 淡 黄 色 粉 末ꎬ ＥＳＩ￣ＭＳ ( ｍ / ｚ):３１３
＋ １
物 １５(２.４ ｍｇ)ꎮ Ｙ￣５ 经 Ｃ 柱色谱分离ꎬ用 １０％ ~ [Ｍ＋ Ｎａ] ꎮ 分 子 式 为 Ｃ Ｈ Ｏ ꎮ Ｈ￣ＮＭＲ ( ５００
１８ １６ １８ ５
１００％甲醇 － 水梯度洗脱ꎬ 得到 １５ 个组分 Ｙ￣５￣１ － ＭＨｚꎬＣＤ ＯＤ) δ:８. ０４ ( １Ｈꎬｄꎬ Ｊ ＝ ９. ２ Ｈｚꎬ Ｈ￣４)ꎬ
３
Ｙ￣５￣１５ꎻ其中ꎬＹ￣５￣５ 用半制备液相色谱(甲醇－水 ＝ ６.７７(１ＨꎬｓꎬＨ￣６)ꎬ６.２５(１ＨꎬｄꎬＪ ＝ ９.６ ＨｚꎬＨ￣３)ꎬ
４８ ∶ ５２ꎬＶ/ Ｖ) 分离ꎬ得到化合物 １４(９.３ ｍｇ)ꎮ Ｙ￣８ ４.６７(２ＨꎬｓꎬＨ￣５′)ꎬ４.３６(１ＨꎬｔꎬＪ ＝ ７.０ ＨｚꎬＨ￣２′)ꎬ
经 Ｃ 柱色谱分离ꎬ用 １０％ ~ １００％甲醇－水洗脱ꎬ得 ３.９３(３Ｈꎬｓꎬ７￣ＯＣＨ )ꎬ３.９０(３Ｈꎬｓꎬ５￣ＯＣＨ )ꎬ２.９４
１８ ３ ３
到 １２ 个组分 Ｙ￣８￣１－Ｙ￣８￣１２ꎻＹ￣８￣４ 用半制备液相色 (２ＨꎬｍꎬＨ￣１′)ꎬ１. ８０ ( ３ＨꎬｓꎬＨ￣４′)ꎻ Ｃ￣ＮＭＲ( １２５
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谱(甲醇－水 ＝ ３５ ∶ ６５ꎬＶ/ Ｖ) 分离ꎬ得到化合物 １０ ＭＨｚꎬＣＤ ＯＤ) δ:１６３. ３ ( Ｃ￣２)ꎬ１１２. ７ ( Ｃ￣３)ꎬ１４１. ２
３
(１２.３ ｍｇ)ꎻＹ￣８￣５ 用半制备液相色谱( 甲醇 － 水 ＝ ( Ｃ￣４)ꎬ １５６. ３ ( Ｃ￣５)ꎬ ９６. ３ ( Ｃ￣６)ꎬ １６３. ８ ( Ｃ￣７)ꎬ
４３ ∶ ５７ꎬＶ/ Ｖ)分离ꎬ得到化合物 １１(７.６ ｍｇ)ꎮ １０８.３(Ｃ￣８)ꎬ１５７.８( Ｃ￣９)ꎬ１１９.０( Ｃ￣１０)ꎬ３１.０( Ｃ￣
１.３.２ 单体化合物细胞毒活性筛选试验 取对数 １′)ꎬ７５.９(Ｃ￣２′)ꎬ１４８.７( Ｃ￣３′)ꎬ１７.５( Ｃ￣４′)ꎬ１１１.３
生长期细胞ꎬ将它们以每孔 ３ × １０ ~ １.５ × １０ 个细 (Ｃ￣５′)ꎬ６３. ８ ( ５￣ＯＣＨ )ꎬ５６. ７ ( ７￣ＯＣＨ )ꎮ 以上数
３
４
３ ３
胞接种到 ９６ 孔板中ꎮ 设空白组、对照组、实验组ꎬ 据与文献( Ｍａｃｉａｓ ｅｔ ａｌ.ꎬ １９８９) 报道基本一致ꎬ故
每组设 ３ 个复孔ꎬ对照组加入紫杉醇和顺铂ꎬ实验 鉴定该化合物为 ｓｉｂｉｒｉｎｏｌꎮ
组加入 不 同 浓 度 的 单 体 化 合 物ꎬ初 筛 浓 度 为 ４０ 化合物 ３ 白色菱晶ꎬＥＳＩ￣ＭＳ(ｍ / ｚ):３１３ [ Ｍ＋
￣１ ＋ １
μｍｏｌＬ ꎬ复筛浓度分别为 ０.０６４、０.３２、１.６、８、４０ Ｎａ] ꎮ 分 子 式 为 Ｃ Ｈ Ｏ ꎮ Ｈ￣ＮＭＲ ( ５００ ＭＨｚꎬ
１６ １８ ５
￣１
μｍｏｌＬ ꎬ每孔终体积为 ２００ μＬꎮ 给药后培养 ４８ ＣＤ ＯＤ) δ:８. ０１ ( １Ｈꎬ ｄꎬ Ｊ ＝ ９. ６ Ｈｚꎬ Ｈ￣４)ꎬ ６. ７６
３
ｈꎬ弃孔内培养液ꎬ每孔加入 ＭＴＳ 溶液 ２０ μＬ 和新 (１ＨꎬｓꎬＨ￣８)ꎬ６.２５(１ＨꎬｄꎬＪ ＝ ９.６ ＨｚꎬＨ￣３)ꎬ３.８７
培养液 １００ μＬꎬ设 ３ 个复孔ꎬ继续孵育 ２ ~ ４ ｈꎬ最 (２ＨꎬｓꎬＨ￣１′)ꎬ３.８５(３Ｈꎬｓꎬ７￣ＯＣＨ )ꎬ３.７８(３Ｈꎬｓꎬ
３
后测其吸光值(Ｋａｕｎｄａ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２０)ꎮ ５￣ＯＣＨ )ꎬ２.８６(１ＨꎬｍꎬＨ￣３′)ꎬ１.１６(３ＨꎬｄꎬＪ ＝ ６.９
３
用酶标仪(４９２ ｎｍ) 读取各孔吸光值ꎬ并记录 ＨｚꎬＨ￣４′)ꎬ １. １６ ( ３Ｈꎬ ｄꎬ Ｊ ＝ ６. ９ Ｈｚꎬ Ｈ￣５′)ꎻ Ｃ￣
１３
结果ꎮ 根据初筛结果ꎬ将抑制率超过 ５０％ 的单体 ＮＭＲ(１２５ ＭＨｚꎬＣＤ ＯＤ) δ:１６３.１( Ｃ￣２)ꎬ１１３.０( Ｃ￣
３
化合物进行复筛ꎬ应用两点法 ( Ｒｅｅｄ ＆ Ｍｕｅｎｃｈꎬ ３)ꎬ１４０.８( Ｃ￣４)ꎬ１５７.６( Ｃ￣５)ꎬ１１６.２( Ｃ￣６)ꎬ１６３.２
１９３８)计算化合物的 ＩＣ 值ꎮ (Ｃ￣７)ꎬ９６. ４ ( Ｃ￣８)ꎬ １５６. ７ ( Ｃ￣９)ꎬ １０８. ３ ( Ｃ￣１０)ꎬ
５０
３６.６ ( Ｃ￣１′)ꎬ２１４. ５ ( Ｃ￣２′)ꎬ４０. ８ ( Ｃ￣３′)ꎬ１８. ８ ( Ｃ￣
２ 结果与分析 ４′)ꎬ１８.８( Ｃ￣５′)ꎬ６３.９(５￣ＯＣＨ )ꎬ５６.８(７￣ＯＣＨ )ꎮ
３
３
以上数据与文献(杨国红ꎬ２００９) 报道基本一致ꎬ故
２.１ 结构鉴定 鉴定该化合物为飞龙掌血酮内酯(ｔｏｄｄａｎｏｎｅ)ꎮ
化合物 １ 淡 黄 色 粉 末ꎬ ＥＳＩ￣ＭＳ ( ｍ / ｚ):２９７ 化合物 ４ 白色粉末ꎬＥＳＩ￣ＭＳ(ｍ / ｚ):３０９ [ Ｍ＋
