Page 180 - 《广西植物》2025年第3期
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5 6 0                                  广  西  植  物                                         45 卷
            最终 获 得 长 44 025 bp 的 序 列ꎮ 12 个 物 种 共               2.2.2 遗传多样性  10 个微卫星位点在 12 个物种
            44 025 bp 长度的序列上只有 48 个变异位点( 占                     中共检测到 179 个等位基因ꎬ平均每位点等位基
            总序列长度的 0.11%)ꎬ其中单变异位点为 26 个                        因数为 7.8ꎬ建润楠种群最少(平均为 5.0)ꎬ红楠种
            (占总序列长度的 0.06%)、简约信息位点为 22 个                       群最多(10.4)ꎮ 物种的独有等位基因数都很少ꎬ

            (占 0.05%)ꎮ 在 72 个叶绿体 DNA 序列片段中ꎬ                    其中红楠种群的独有等位基因最多( 平均为每位
            只有 13 个片段具多态性ꎮ 因此ꎬ后续使用这 13 个                       点 0.7 个)ꎬ基脉润楠和建润楠中没有独有等位
            叶绿体 DNA 序列片段组成长度为 10 756 bp 的序                     基因ꎮ
            列矩阵进行系统进化分析ꎮ 对 12 个润楠属物种                               12 个物种中观察杂合度和期望杂合度中等ꎬ
            13 个序列的异质性检验表明ꎬ序列间替换型式异                            期望杂合度为 0.501( 粗壮润楠) ~ 0.838 ( 琼桂润
            质性在多数物种对间不显著ꎬ不会影响系统进化                              楠)ꎬ观察杂合度为 0.442 (粗壮润楠) ~ 0.718 ( 红
            分析ꎮ 对已测序的红楠、刨花润楠、锈毛润楠和滇                            楠) (表 1)ꎮ 近交系数都为正值ꎬ最大的为 0.277
            润楠的叶绿体基因组比较发现ꎬ叶绿体基因组之                              (刨花润楠)ꎬ最小的为 0.103( 薄叶润楠)ꎬ表明这
            间序列的相似度为 99.9%ꎬ远高于其他属内物种                           些物种存在较高的近交(表 1)ꎮ
            间叶绿体基因组的相似度ꎮ                                           所有物种总的遗传分化系数 F 为 0.156ꎮ 两
                                                                                               ST
            2.1.2 润楠属系统进化关系  由于物种间很小的                          两间的遗传分化系数范围为 0.006 ~ 0.304ꎬ其中华
            序列差异ꎬ因此基于多态叶绿体 DNA 片段采用不                           润楠和琼桂润楠间最小ꎬ粗壮润楠和短序润楠间
            同的构建进化树方法未得到具一致拓扑结构的系                              最大ꎮ
            统进化树(图 2)ꎮ UPGMA 树显示红楠、建润楠和                        2.3 不同分子标记的物种进化关系及其比较
            狭叶润楠聚为一支( 支持率为 0.99)ꎬ其他的润楠                             通过叶绿体基因组序列分析发现ꎬ在这 14 个
            属物种聚为一支( 支持率为 0.97)ꎬ除这两大支以                         润楠属物种组成的突变网络图中ꎬ共有 5 个推断
            外ꎬ其他支系的自展支持率都很低ꎮ ML 树表明建                           的共同祖先节点ꎬ在图中分别为 V1、V2、V3、V4 和
            润楠、红楠和狭叶润楠聚为一支ꎬ剩下的物种聚为                             V5 (图 3:A)ꎮ 锈毛润楠和短序润楠具有共同祖
            一支ꎬ但自展支持率都很低ꎮ NJ 树表明狭叶润楠、                          先 V1ꎬ黄绒润楠和基脉润楠具有共同祖先 V2ꎬ滇
            建润楠和红楠单独成为一支( 支持率为 1.00)ꎬ其                         润楠、黔桂润楠、薄叶润楠、粗壮润楠和琼桂润楠
            他的 9 个物种聚为一支且无明显的进化关系ꎬ支                            具有共同祖先 V3ꎬ刨花润楠和华润楠具有共同祖
            持率很低ꎮ 这两种基于距离矩阵方法给出的结果                             先 V4ꎬ建润楠、红楠和狭叶润楠具有共同祖先 V5ꎮ
            基本一致ꎬ红楠、建润楠和狭叶润楠聚为一支的支                             从 V1 到 V2 经过 2 步突变ꎬ从 V2 到 V3 以及从 V3
            持率都很高ꎬ其他物种没有明显进化关系( 图 2)ꎮ                          到 V4 都只经历了 1 步突变ꎬ而从 V2 到 V5 经历了
            MP 树显示建润楠、红楠和狭叶润楠聚为一支ꎬ剩                            14 步突变ꎮ
            下的其他物种聚为一支ꎮ                                            贝叶斯系统树显示短序润楠单独成为一支ꎬ
            2.2 微卫星位点分析                                        红楠、建润楠和狭叶润楠聚为一支ꎬ黄绒润楠和基
            2.2.1 中性位点及哑等位基因分析  使用 10 个微卫                      脉润楠聚为一支ꎬ华润楠和刨花润楠聚为一支ꎬ剩
            星位点对 234 个个体进行 PCR 扩增ꎬ均获得清晰的                       下的 5 个物种聚为一支ꎬ但这些系统树节点的后
            产物ꎮ 对异常位点的检测发现ꎬ有 4 个位点分布于                          验概率值都不高ꎮ 基于樟科系统进化树确定的润
            中性区间(95%置信区间) 之外ꎮ 这些位点的遗传                          楠属和楠属分化时间为 2 300 万年前(23 Ma)ꎬ润
            分化系数 F 大于中性标记模拟的 F 值的 0.975 分                      楠属的树冠时间( crown age) 为 10.75 Ma( 图 3:
                       ST                    ST
            位数ꎬ表明这些位点可能受到歧化选择的作用ꎮ                              B)ꎮ 根据这 2 个估计时间对润楠属系统树定年ꎬ
                10 个位点两两之间均不存在显著的连锁关                           结果表明 V1 形成时间大约为 7.69 MaꎬV2 形成的
            系ꎬ表明它们为独立遗传的ꎮ 对哑等位基因的检                             时间大约为 4.65 Maꎬ V3 形成的时间大约为 3.99
            测表明ꎬ10 个微卫星位点中有 3 个可能存在哑等                          Maꎬ V4 形成的时间大约为 1.61 MaꎬV5 的形成时
            位基因ꎬ对这 3 个可能存在哑等位基因的位点的                            间大约为 2.58 Maꎮ
            等位 基 因 频 率 校 正 后 用 于 后 续 遗 传 多 样 性 的                   使用 10 个中性微卫星位点对 12 个润楠属物
            计算ꎮ                                                种的个体进行聚类ꎬ 最佳 K 值为 2、5 和 8 (ΔK 值
   175   176   177   178   179   180   181   182   183   184   185