Page 55 - 《广西植物》2025年第4期

４ 期 韩伟等: 丹霞小花苣苔叶片离体培养与植株再生技术研究 ６ ６ ９

在报春苣苔属植物保育扩繁方面的研究结果陆续 片生长的影响ꎮ 每个处理接种至少 ３０ 个叶切片ꎬ重
被报道ꎮ 但不同植物的再生途径存在差 异ꎮ 例 复 ３ 次ꎮ 其中ꎬ褐化率(％)＝ 褐化外植体数/ 接种外
如ꎬＭａ 等(２０１０) 和 Ｙａｎｇ 等(２０１２) 以报春苣苔的 植体数×１００(褐化外值体以接种叶切片褐化面积等
叶片为外植体ꎬ通过诱导体胚和不定芽实现植株 于或小于 １ / ３ 的计数)ꎬ污染率(％) ＝ 污染外植体
再生ꎻ付传明等(２０１５) 以条叶唇柱苣苔的叶片为 数/ 接种外植体数×１００ꎬ外植体成活率(％)＝ 成活外
外植体ꎬ通过不定芽诱导途径获得了再生植株ꎻ闫 植体数/ 接种外植体数×１００ꎮ

海霞等(２０１７)以褐纹报春苣苔的叶片为外植体ꎬ １.２.２ 不定芽的诱导 采用 ７５％ 酒精 ３０ ｓ＋ ０.１％
通过不定芽和愈伤组织诱导两种途径建立了其组 ＨｇＣｌ ６ ｍｉｎ 对叶片消毒后ꎬ以叶切片为外植体ꎬ参
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培快繁体系ꎻ何东平等(２０２４) 通过叶片诱导不定 考欧明 烛 ( ２０２３) 的 方 法ꎬ 以 １ / ２ＭＳ 为 基 本 培 养
芽ꎬ建立了寿城报春苣苔的离体再生技术ꎬ需针对 基ꎬ设置不同植物生长调节剂组合ꎬ以下同此ꎮ 分
不同植物探索其再生条件ꎮ 截至目前ꎬ关于丹霞 别为 ６￣ＢＡ(０.５、１、２ ｍｇＬ )和 ＮＡＡ(０.１、０.２、０.５
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小花苣苔繁殖技术的研究ꎬ尚未见相关报道ꎮ ｍｇＬ )组合的 ９ 种不定芽诱导培养基ꎮ ４０ ｄ 后
本研究以野生丹霞小花苣苔的叶片为材料ꎬ 统计不定芽诱导率和每个叶片芽数ꎮ 每个处理接
比较 ＨｇＣｌ 不同消毒时间对叶片表面消毒效果的 种至少 ３０ 个叶切片ꎬ重复 ３ 次ꎮ 其中ꎬ不定芽诱导
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影响ꎻ研究不同浓度的植物生长调节剂配比对不 率(％)＝ 诱导出芽的外植体数/ 成活的外植体数×
定芽诱导和增殖的影响ꎬ筛选适宜不定芽诱导和 １００ꎬ平均每片叶片的芽数 ＝ 诱导出的芽数 / 有芽的
增殖的培养基ꎻ观察和统计不同的生根培养基及 叶片数ꎮ
不同移栽基质分别对组培苗生根和移栽驯化成活 １.２.３ 不定芽的增殖 将诱导的不定芽(３ ~ ５ 个为
的影响ꎬ以筛选最佳生根培养基和移栽驯化栽培 一丛) 接 入 ６￣ＢＡ ( ０. ５、 １、 ２、 ３ ｍｇ Ｌ ) 与 ＮＡＡ
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基质ꎮ 旨在建立其组培快繁技术体系ꎬ实现其种 (０.０５、０.１、０.２ ｍｇＬ ) 组合的 １２ 种芽增殖培养
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质资源的保护、种群扩大及开发利用ꎬ为其他报春 基上(基本培养基为 １ / ２ＭＳ)ꎬ４０ ｄ 后统计不定芽
苣苔属植物的繁殖提供技术参考ꎮ 的增殖情况ꎬ计算增殖系数ꎮ 每个处理接种至少
３０ 丛芽ꎬ重复 ３ 次ꎮ 其中ꎬ芽增殖系数 ＝ 增殖后的
１ 材料与方法 总芽数 / 接种的芽数ꎮ

１.２.４ 生根培养 将增殖的不定芽切分成单芽后
１.１ 材料 分别转入 １ / ２ＭＳ 含有 ＮＡＡ(０.１、０.３、０.５ ｍｇＬ )
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经丹霞山管理委员会批准ꎬ在原生地韶关仁 的 ３ 种培养基中ꎮ ３０ ｄ 后观察芽的生根情况ꎬ统
化 丹 霞 山 ( 海 拔 ９５ ｍꎬ １１３° ４４′ ０９. １７″ Ｅ、 计生根率和平均根数ꎮ 每个处理接种至少 ３０ 个
２５°０１′３６.８５″ Ｎ) 采 集 丹 霞 小 花 苣 苔 ( Ｐｒｉｍｕｌｉｎａ 芽苗ꎬ重复 ３ 次ꎮ 其中ꎬ苗成活率(％)＝ 成活的苗 /
ｄａｎｘｉａｅｎｓｉｓ)野生植株( 图 １:Ａ)ꎬ后种植于韶关学 接种的苗×１００ꎬ生根率(％) ＝ 有根的苗 / 成活的苗
院药用植物资源圃中( 图 １:Ｂ)ꎮ 待植株生长一段 ×１００ꎬ平均根数 ＝ 生根总条数 / 成活的苗ꎮ

时间后ꎬ进行后续研究ꎮ １.２.５ 炼苗和移栽 将生根的组培苗移到正常室
１.２ 方法 温下经过 ７ ｄ 炼苗ꎬ后移栽到 ３ 种不同的基质上ꎬ
１.２.１ 材料的表面消毒 从韶关学院药用植物资源 分别是喀斯特地貌的腐叶土＋珍珠岩＋蛭石( 体积
圃中剪取丹霞小花苣苔的叶片带回实验室ꎬ先将剪 比１ ∶ １ ∶ １ )ꎬ 泥 炭 土 ＋ 珍 珠 岩 ＋ 蛭 石 ( 体 积 比
取的叶片用洗衣粉浸泡 １０ ｍｉｎꎬ再用清水轻轻洗涤 １ ∶ １ ∶ １)ꎬ珍珠岩＋蛭石( 体积比 １ ∶ １)ꎮ 统计移
干净ꎬ最后进行表面消毒ꎮ 消毒过程为先用 ７５％酒 栽成活率和新叶长出率ꎬ比较不同的基质对组培
精消毒 ３０ ｓꎬ无菌水洗 ３ 次ꎬ再用 ０.１％ ＨｇＣｌ 分别浸 苗移栽成活的影响ꎮ 其中ꎬ移栽成活率(％) ＝ 成
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泡消毒 ６、８、１０ ｍｉｎꎬ无菌水洗 ４ 次ꎮ 将消毒后的叶 活的植株 / 移栽的植株×１００ꎬ新叶长出率(％) ＝ 长
片切成长×宽约为 ０.８ ｃｍ × ０.８ ｃｍ 的小块( 图 １: 出新叶的植株 / 成活的植株×１００ꎮ
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Ｃ)ꎮ 接入 １ / ２ＭＳ＋６￣ＢＡ ０.５ ｍｇＬ ＋ＮＡＡ ０.１ ｍｇ １.２.６ 培养基的制备和培养条件
Ｌ 培养基中ꎬ１５ ｄ 后统计叶切片外植体褐化率、污 １.２.６.１ 培养基的制备 使用分析纯化学试剂配制
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染率和成活率ꎬ比较 ０.１％ ＨｇＣｌ 不同消毒时间对叶 ＭＳ 培养基母液后再配制培养基ꎮ 培养基中蔗糖
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