Page 165 - 《广西植物》2025年第6期

６ 期 刘威等: 间作林木对茶园土壤真菌群落结构及功能的影响 １ １ ５ １

艳宾等ꎬ２０２０ꎻ张亮等ꎬ２０２１)ꎬ间作植物根系可以分 除表面腐殖层ꎬ分别采集 ０ ~ ２０ ｃｍ 土壤ꎬ４ 个土壤
泌一些物质对一些微生物具有促进作用ꎬ而对另一 样混合为一个样品ꎬ约 １ ｋｇꎬ每个间作林木 ３ 次重
些微生物具有抑制作用ꎬ从而影响了其群落结构和 复ꎮ 将采集的土壤样品去除石块、枯叶和根系等
功能(王慧等ꎬ２０１０ꎻ孙晓红等ꎬ２０１８)ꎮ 茶园间作对 杂物后ꎬ分为 ２ 份ꎬ一份新鲜土壤装入无菌 １０ ｍＬ
微生物的影响也有一些研究ꎮ 例如ꎬ茶园间作板栗 的离心管ꎬ保存于－８０ ℃ 冰箱中ꎬ用于土壤微生物
有利于增加土壤细菌的丰富度ꎬ改善土壤肥力(李 多样性分析ꎮ 另一份土壤阴凉风干后ꎬ用于土壤
孟等ꎬ２０２２)ꎻ茶园间作大豆能改善土壤微生物群落 化学含量的测定ꎮ
多样性ꎬ提高土壤中脲酶、酸性磷酸酶和过氧化氢 １.２ 土壤理化性质测定
酶活性(韦持章等ꎬ２０１８)ꎮ 此外ꎬ茶园间作桂花、含 土壤 ｐＨ、铵态氮、硝态氮、碱解氮、速效磷测
笑、山苍子等均能显著影响茶园土壤微生物的群落
定参 考 « 土 壤 农 业 化 学 分 析 方 法 » ( 鲁 如 坤ꎬ
结构(Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２１ꎻ郝海平等ꎬ２０２１)ꎮ 豫南茶 ２０００)ꎮ 土壤 ｐＨ 值采用水浸电位法测定ꎬ铵态氮
区以信阳为主ꎬ位于我国南北交界处ꎬ属于江北茶 ＋
(ａｍｍｏｎｉｕｍ ｎｉｔｒｏｇｅｎꎬＮＨ ) 采用纳氏试剂比色法ꎬ
４
区ꎬ气候偏冷ꎬ茶园常见间作木本植物有板栗、茅
硝态氮( ｎｉｔｒａｔｅ ｎｉｔｒｏｇｅｎꎬＮＯ ) 采用紫外分光光度
－
栗、杉木、核桃和桂树等ꎮ 土壤微生物对茶叶产量 ３
法ꎬ速效磷( ａｖａｉｌａｂｌｅ ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓꎬＡＰ) 含量采用钼
和品质有重要影响ꎬ而关于豫南茶区间作不同林木
锑抗比色法测定ꎬ土壤有机质( ｏｒｇａｎｉｃ ｍａｔｔｅｒꎬＯＭ)
对土壤微生物群落结构及功能多样性的影响研究
含量采用重铬酸钾容量法测定(鲍士旦ꎬ２０１０)ꎮ
较为鲜见ꎮ
１.３ 土壤微生物总 ＤＮＡ 提取、ＰＣＲ 扩增及高通量测序
本研究以豫南信阳毛尖茶的核心茶区信阳市
土壤基因组 ＤＮＡ 的提取采用试剂盒进行ꎬ纯
浉河港龙潭村为研究区域ꎬ以间作板栗、茅栗和杉
化后的 ＤＮＡ 分装并保存在－８０ ℃ 中备用ꎮ 分别使
木的茶园土壤为研究对象ꎬ采用高通量测序技术
用 真 菌 ＩＴＳ ｒＤＮＡ 通 用 引 物 ＩＴＳ１ Ｆ ( ５′￣
及土壤化学分析技术ꎬ拟探讨以下问题:(１) 信阳
ＣＴＴＧＧＴＣＡＴＴＴＡＧＡＧＧＡＡＧＴＡＡ￣３′) 和 ＩＴＳ２ Ｒ( ５′￣
茶区间作板栗、茅栗及杉木的茶园土壤理化性质
ＧＣＴＧＣＧＴＴＣＴＴＣＡＴＣＧＡＴＧＣ￣３′) 对 供 试 样 品 进 行
特点ꎻ(２)信阳地区不同间作林木茶园土壤真菌群
ＰＣＲ 扩增( Ｊｉｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２２ꎻ刘威等ꎬ２０２３)ꎮ ＰＣＲ
落结构及多样性特点ꎻ(３) 不同间作林木茶园土壤
真菌营养类型特点ꎮ 本研究结果可为豫南茶区生 扩增程序如下:９５ ℃ 预变性 ５ ｍｉｎꎬ９５ ℃ 变性 ３０
ｓꎬ５０ ℃ 退火 ３０ ｓꎬ７２ ℃ 延伸 ４０ ｓꎬ共循环 ２５ 次ꎬ最
态茶园建设与土壤管理提供理论依据和指导ꎮ
后在 ７２ ℃ 下延伸 ７ ｍｉｎꎮ 扩增后 ＰＣＲ 产物经回收
１ 材料与方法 纯化后利用 Ｉｌｌｕｍｉｎａ ｎｏｖａｓｅｑ ６０００ 高通量测序平台
进行测序ꎮ

１.１ 试验区概况 １.４ 数据统计与分析
信阳市位于中国华中地区ꎬ河南省南部ꎬ地处 采用 Ｔｒｉｍｍｏｍａｔｉｃ Ｖ０.３３ 软件对测序结果进行
１１３°４５′—１１５°５５′ Ｅ、３０°２３′—３２°２７′ Ｎꎮ 信阳为信 过滤ꎻ使用 ＵＣＨＩＭＥ Ｖ４.２ 软件鉴定并去除样品嵌
合体序列ꎬ得到最终有效数据ꎻ利用 ＱＩＩＭＥ 软件绘
阳毛尖茶的主产区之一ꎬ供试茶山海拔 ２００ ｍ 左右ꎮ
供试区域属亚热带向暖温带过渡地区ꎬ年平均气温 制群落结构图及丰度表ꎻ用 Ｃａｎｏｃｏ ５.０ 软件进行环

１５.３~１５.８ ℃ꎬ年均降水量 ９９３~１ ２９４ ｍｍꎮ 境 因 子 与 微 生 物 群 落 冗 余 分 析 ( ｒｅｄｕｎｄａｎｃｙ
ａｎａｌｙｓｉｓꎬＲＤＡ)ꎻ使用 ＱＩＩＭＥ２ 软件对样品 α 多样性
取样点位于信阳市浉河区浉河港乡龙潭村ꎬ
为地形山地茶园ꎬ茶园坡度 ３０° ~ ４５°ꎬ茶树树龄约 指数进行评估ꎻ使用 ＱＩＩＭＥ２ 软件进行 β 多样性分
２５ 年ꎬ供试茶园 ５ 年以上未曾施肥ꎬ间作林木板 析ꎻ 通 过 韦 恩 图 非 度 量 多 维 尺 度 ( ｎｏｎ￣ｍｅｔｒｉｃ
栗、茅栗和杉木树龄均为 ２５ 年ꎬ样品编号分别为 ｍｕｌｔｉｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ｓｃａｌｉｎｇꎬＮＭＤＳ)分析方法分析土壤
ＸＹＢＬ、ＸＹＭＬ 和 ＸＹＳＳꎮ 采样时间为 ２０２３ 年 １１ 月 微生 物 群 落 结 构 的 差 异ꎻ 使 用 ＦＵＮＧｕｉｌｄ ( Ｆｕｎｇｉ
２６ 日ꎬ采样时选择的间作林木均位于山体中坡阳 Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｇｕｉｌｄ)开展真菌群落功能预测ꎮ 数据录
坡位置ꎬ在间作树木 １.５ ｍ 范围处ꎬ分东南西北 ４ 入及方差分析基于 ＳＰＳＳ ２２.０ 和 Ｅｘｃｅｌ ２０１０ 软件
个方位分别于茶树根际处采集土壤ꎬ采样时先清 进行ꎮ