Page 121 - 《广西植物》2025年第8期
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８ 期 邓诏磊等: 湿地松细胞系内源激素及生理生化特性与成胚能力相关性研究 １ ４ ８ ７
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养基(ＭＬＰ＋０.１２５ ｍｇＬ ６￣ＢＡ＋０.１２５ ｍｇＬ ＫＴ＋ 性差异(Ｐ<０.０１)ꎬ其中 Ｖ３０ 中 ＺＲ 含量(２.０９ ｎｇ
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２.００ ｍｇＬ ＮＡＡ ＋ ４５０ ｍｇＬ Ｌ￣谷氨酰胺 ＋ ５００ ｇ ＦＷ)极显著高于[除 Ｓ１６(２.００ ｎｇｇ ＦＷ)和 Ｓ７￣
ｍｇＬ 肌醇＋５００ ｍｇＬ 水解酪蛋白＋３０ ｇＬ 麦 ２(２.０９ ｎｇｇ ＦＷ) 外] 其他细胞系(图 ２:Ａ)ꎮ 与
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芽糖) 中悬浮培养 ７ ｄꎬ再抽滤后置于成熟培养基 ＺＲ 类似ꎬ吲哚乙酸(ｉｎｄｏｌｅａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄꎬ ＩＡＡ)含量在 ７
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(ＭＬＰ＋４５０ ｍｇＬ Ｌ￣谷氨酰胺＋５００ ｍｇＬ 肌醇＋ 个细胞系间具有极显著性差异(Ｐ<０.０１)ꎬ除 Ｓ７￣５
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５００ ｍｇＬ 水解酪蛋白＋３０ ｇＬ 麦芽糖＋１２０ ｇ 外ꎬＩＡＡ 含量在两两细胞系间具有极显著性差异ꎮ
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Ｌ ＰＥＧ ８０００＋１２ ｍｇＬ ＡＢＡ＋４.０ ｇＬ 结冷胶) ＩＡＡ 含量与 ＺＲ 含量在不同细胞系间表现相反ꎬＶ３０
中ꎬ每皿 １ ｇꎬ重复 ８ 次ꎬ培养温度为(２３±１)℃ꎬ暗培 (１３.９４ ｎｇｇ ＦＷ) 和 Ｓ７￣５(１４.４５ ｎｇｇ ＦＷ) 中
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养ꎮ 培养过程中使用的培养基、培养方式、培养时 ＩＡＡ 含量分别为最低和次低ꎬＳ２. １ (２５. ３６ ｎｇ ｇ ￣１
间和培养温度等均一致ꎬ保证试验中细胞系起始状 ＦＷ)则极显著高于其余细胞系(图 ２:Ｂ)ꎮ
态一致ꎮ 培养 １ 月后ꎬ统计各细胞系的成熟胚数量ꎮ ２.２.２ 不同细胞系的赤霉素( ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｃ ａｃｉｄꎬＧＡ )
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１.２.５ 数据统计分析 使用 Ｅｘｃｅｌ ２００７、ＳＰＳＳ ２６.０ 含量和脱落酸( ＡＢＡ) 含量差异分析 ＧＡ 含量在
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软件进行数据的处理和计算ꎬ通过单因素 ＡＮＯＶＡ 湿地松 ７ 个细胞系间存在显著性差异( Ｐ<０.０５)ꎬ
方差检验和 Ｄｕｎｃａｎ 多重比较的方法探究各指标 其中细胞系 Ｖ３４２(１.８７ ｎｇｇ ＦＷ)显著高于细胞
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在不同细胞系间的差异性ꎬ利用 Ｐｅａｒｓｏｎ 相关分析 系 Ｖ３０(１.７１ ｎｇｇ ＦＷ)、Ｓ１６(１.７２ ｎｇｇ ＦＷ)、
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探究细胞系各指标间的相关性ꎬ使用 Ｏｒｉｇｉｎ ２０１８ Ｓ２.１(１.６５ ｎｇｇ ＦＷ) ( 图 ３:Ａ)ꎮ ７ 个细胞系间
软件绘图ꎮ ＡＢＡ 含量呈现极显著性差异( Ｐ < ０.０１)ꎬ细胞系
Ｖ３０ 的 ＡＢＡ 含量(４５.０２ ｎｇｇ ＦＷ) 极显著高于
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２ 结果与分析 其他细胞系ꎬ其次为 Ｓ７￣５(３９.５６ ｎｇｇ ＦＷ)ꎮ 细
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胞系 Ｓ４０１(３.２５ ｎｇｇ ＦＷ)、Ｖ３４２(３.７１ ｎｇｇ
２.１ 不同细胞系形态和细胞结构差异分析 ＦＷ)、Ｓ７￣２( ２. ７８ ｎｇｇ ＦＷ)、Ｓ１６ ( ３. ２５ ｎｇ ｇ ￣１
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不同细胞系的形态和细胞聚集情况存在一定 ＦＷ)、Ｓ２.１(２.６８ ｎｇｇ ＦＷ) 的 ＡＢＡ 含量相对较
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差异ꎬ其中细胞系 Ｓ４０１( 图 １:Ｇ１、Ｇ２)、Ｖ３４２( 图 低ꎬ均低于 ４.００ ｎｇｇ ＦＷ(图 ３:Ｂ)ꎮ
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１:Ｅ１、Ｅ２)的黏性较大ꎬ与其他细胞系状态相比水 ２.３ 不同细胞系的可溶性糖含量、可溶性蛋白含量
渍化较严重ꎻ细胞系 Ｓ１６( 图 １:Ｆ１、Ｆ２) 的结构蓬 与淀粉含量差异分析
松、黏性较小ꎬ呈现丝絮状ꎻ细胞系 Ｖ３０( 图 １:Ｄ１、 对湿地松 ７ 个细胞系的可溶性糖含量、可溶性
Ｄ２)、Ｓ２.１(图 １:Ａ１、Ａ２)、Ｓ７￣５(图 １:Ｃ１、Ｃ２)、Ｓ７￣２ 蛋白含量和淀粉含量进行方差分析(表 １)ꎮ 由表 １
(图 １:Ｂ１、Ｂ２)的结构紧致细密、黏性适中ꎬ呈现出 可知ꎬ可溶性糖含量、可溶性蛋白含量与淀粉含量
白色透明银耳状ꎮ 在细胞系间存在显著性差异ꎮ 湿地松 ７ 个细胞系的
细胞染色后ꎬ体式显微镜下清晰可见原胚团 可溶性糖含量在 ０.７１％ ~ １.１１％之间ꎬ细胞系 Ｖ３０、
结构ꎬ但细胞系间胚柄细胞团结构差异较大ꎬ其中 Ｓ４０１、Ｖ３４２、Ｓ７￣５ 的可溶性糖含量较高ꎬ均在 １％以
细胞系 Ｖ３０ 的 ＥＳＭ 聚集成团明显( 图 １ 中箭头指 上ꎬ其中细胞系 Ｓ４０１ 可溶性糖含量最高ꎬ达 １.１１％ꎮ
向)ꎬＳ２.１ 其次ꎬ胚头较大、胚柄较长ꎮ Ｓ４０１、Ｓ７￣５、 细胞系 Ｓ７￣２、Ｓ１６、Ｓ２.１ 中的可溶性糖含量则相对较
Ｓ７￣２ 的原胚团胚头分布散乱ꎬ有少量聚集ꎬ胚柄为 低ꎬ均未达到 １％ꎮ 细胞系 Ｓ４０１ 可溶性蛋白含量最
细长状ꎮ 细胞系 Ｓ１６ 的原胚团胚头有一定的 聚 高ꎬ平均为 １７.５９ ｍｇｇ ꎬ而细胞系 Ｓ２.１ 的可溶性
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集ꎬ但其胚柄存在畸形ꎮ 基于图 １ 的观察ꎬ细胞系 淀粉含量最低ꎬ平均仅为 １２.２０ ｍｇｇ ꎮ 细胞系 Ｓ７￣
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胚性强弱初步判断为 Ｖ３０>Ｓ２.１>Ｓ７￣２>Ｓ７￣５>Ｓ４０１> ２ 淀粉含量最高ꎬ平均含量可达 １.０８％ꎬ其次为细胞
Ｖ３４２>Ｓ１６ꎮ 胚性强弱与体胚诱导率密切相关ꎬ一 系 Ｓ４０１ꎬ淀粉含量为 １.０４％ꎬ而细胞系 Ｖ３０ 的淀粉
般而言ꎬ细胞系胚性越强ꎬ体胚诱导率越高ꎮ 含量最低ꎬ仅为 ０.６６％ꎮ
２.２ 不同细胞系的内源激素差异分析 ２.４ 不同细胞系的 ＳＯＤ 活性、ＰＯＤ 活性和 ＣＡＴ
２.２.１ 不同细胞系的玉米素核苷含量和吲哚丁酸 活性差异分析
(ＩＡＡ)含量差异分析 湿地松 ７ 个细胞系的玉米 湿地松不同细胞系间 ＳＯＤ 活性、ＰＯＤ 活性和
素核苷(ｔｒａｎｓ￣ｚｅａｔｉｎ ｒｉｂｏｓｉｄｅꎬ ＺＲ) 含量存在极显著 ＣＡＴ 活性存在显著性差异 ( 表 ２) ꎮ 由表 ２ 可知ꎬ
