Page 64 - 《广西植物》2025年第8期
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1 4 3 0                                广  西  植  物                                         45 卷
            唑蓝(methyl thiazolyl tetrazoliumꎬMTT)法测定花粉
            活力ꎮ 具体方法如下:将 MTT 溶解于蔗糖溶液中ꎬ                         2  结果与分析
            将花粉涂布于载玻片上ꎬ加 MTT 蔗糖溶液染色ꎬ盖
            上盖玻片后染色 10 minꎬ在显微镜下分别统计被                          2.1 开花物候
            染成蓝色和未染色的花粉数量ꎬ每朵花观察 3 个                                从植株水平来看ꎬ增温后蓝翠雀花第一朵花
            视野ꎬ将 3 个视野的花粉活力求平均值得到该朵                            开放的日期和最后一朵花萎蔫的日期较对照均显
            花的花粉活力ꎮ 花粉活力(%)= 染色花粉数 / ( 染                       著提前( 图 2)ꎻ单株花期由(22.16±0.97) d 缩短

            色花粉数+未染色花粉数) ×100ꎮ                                 至(17.86±0.70) dꎬ两者存在显著性差异(t = -3.59ꎬ
                                                               P<0.01)ꎮ 从单花水平来看ꎬ增温后雄性期、雌性
            1.3.6 花蜜分泌量的测定  2019 年ꎬ在每个 OTC
                                                               期和单花寿命均显著缩短( 图 3)ꎬ两性时期之间
            和 CK 样方中随机选择 4 个植株ꎬ每株随机标记 2
            朵花ꎬ分别测量雄性和雌性阶段 24 h 花蜜分泌量                          的间隔时间由(0.88±0.11) d 缩短至(0.75±0.11)
            和糖浓度ꎮ 具体方法为前一天早上 9:00 对待测                          dꎬ两者差异不显著(t = -0.82ꎬ P = 0.41)ꎮ

            花套袋ꎬ24 h 后用毛细管( Hirschmann Laborgerate
            Companyꎬ Germany)吸取蜜距内全部花蜜ꎬ再用游
            标卡尺测量毛细管中花蜜柱的长度ꎬ根据毛细管

            的内径(0.5 mm)计算花蜜体积ꎮ
            1.3.7 访花昆虫及其访花行为的观察  2018 年ꎬ每
            天 9:00—18:00ꎬ以 30 min 为一个时段ꎬ每个时段
            内随机选择 1 个 OTC 和 1 个 CKꎬ分别统计其中正
            在开放的总花数目和每朵花的性别阶段( 雄性或
            雌性)ꎬ再观察其访花昆虫ꎬ用秒表记录访花昆虫
            的单次访花时间( 从进入花冠至离开花冠)ꎬ访花
            频率用每花每小时的访问次数表示ꎬ为了避免统
                                                                CK. 对照ꎻ OTC. 开顶式生长室ꎻ ∗∗表示在 0.01 水平上
            计中过多 0 数据的影响ꎬ对数据进行平方根反正
                                                                的显著性差异ꎻ 数值为平均值±标准误ꎮ 下同ꎮ
            弦转换(square ̄root arcsine transformation)ꎮ 所有样        CK. Controlꎻ OTC. Open top chamberꎻ ∗∗ indicates significant
            方的观察时间均不少于 8 h 且所有观察保证在晴                            differences at the 0. 01 levelꎻ data are expressed as x±s x . The
                                                                same below.
            朗无风的天气进行ꎮ
                                                              图 2  对照和增 温条件下蓝翠雀花的初花日期和终花日期
            1.3.8 单次落置花粉数量的测定  对 1.3.5 中选定
                                                                 Fig. 2  First flowering date and end flowering date of
            的 40 个植株ꎬ每株上用于测定花粉活力的 2 朵花
                                                                      Delphinium caeruleum under the control
            在雄性阶段结束后套袋ꎬ待柱头张开后去掉套袋ꎬ                                           and warming conditions
            传粉者访问一次后立即重新套袋ꎬ2 h 后取下柱
            头ꎬ放入装有 FAA 的离心管ꎬ带回实验室统计柱头                          2.2 植株高度和生物量分配
            上落置的花粉数量ꎮ
                                                                   增温后蓝翠雀花的植株高度[(37.68 ±1.57)
            1.3.9 结籽率的测定  对 1.3.1 中选定的 40 个植                   cm]与对照[(29.57±1.90) cm] 相比显著增加(t =
            株ꎬ每株上用于观察开花进程的 2 朵花在花冠萎                            -3.28ꎬ P<0.01)ꎮ 与此同时ꎬ增温后茎叶干重和
            蔫后套网( 防止种子掉落)ꎬ待果实成熟后收回实                            地上生物量均有所增加ꎬ而花干重显著减少ꎬ最终
            验室ꎬ统 计 结 籽 率ꎮ 结 籽 率 (%) = 正 常 种 子 数 /              导致繁殖分配显著降低(图 4)ꎮ
            (正常种子数+败育种子数) ×100ꎮ                                2.3 花数目和花形态
            1.4 数据分析                                               增温对蓝翠雀花的单株 花 数 目 没 有 显 著 影
                 利用 Excel 2010 和 SPSS 22.0 对数据进行统              响ꎬ但顶花的直径和蜜距长度均显著减小(图 5)ꎮ
            计分析ꎬ用独立样本 t 检验(independent t test)比较               2.4 花粉 / 胚珠比例和花粉活力
            两组数据之间的差异性ꎮ                                            增温对蓝翠雀花的花粉 / 胚珠比例没有显著
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