Page 144 - 《广西植物》2026年第6期

６ 期 张欣然等: 高山极端环境下的繁殖策略:刺芒龙胆的可塑性花寿命及蝇类传粉 １ ０ ５ ９

盛花期ꎬ每天 ９:００ 随机选取 ５ 个间距大于 １０ ｍ 的 个周期ꎬ每个周期内随机选择 ５ 个间距大于 １０ ｍ
植株ꎬ每个植株上选择 １ 朵初开的花朵套袋ꎬ以隔 的植株并统计每株的花数量ꎬ累计观察时长为 ３０
离传粉昆虫来防止花粉损失ꎬ连续操作 ６ ｄꎬ第 ６ ｈ(共 ６０ 个周期)ꎬ共记录 ３００ 个植株(每周期记录
天集中取各处理花的花药置入含 １０％蔗糖溶液的 ５ 株)ꎬ记录指标包括传粉昆虫种类、个体数、访花
离心管ꎬ室温(１５ ~ ２０ ℃ )培养 ２４ ｈ 后转入 ４ ℃ 冰 时间及被访花朵ꎮ 结束后用捕虫网采集传粉昆虫
箱终止萌发ꎬ于光学显微镜下计数ꎬ以花粉管长度 样本ꎬ置于变色硅胶中干燥保存以便鉴定ꎮ
达到 ２ ｍｍ 作为判断其是否萌发的标准ꎬ并计算花 １.３.６ 数据分析 数据分析采用 ＳＰＳＳ ２７.０ 统计软

粉萌发率ꎬ以此表征花粉活力ꎮ 件进行ꎮ 所有数据均以平均值±标准误表示ꎬｎ 代表
柱头可授性:于刺芒龙胆盛花期ꎬ连续 ６ ｄ 于 样本量ꎮ 正态性检验(Ｓｈａｐｉｒｏ￣Ｗｉｌｋ) 结果表明所有

每天 ９:００ 随机选取 １５ 个间距大于 １０ ｍ 的植株ꎬ 数据均不服从正态分布ꎬ对于花期数据ꎬ采用非参
每个植株选择 １ 朵柱头刚张开的花ꎬ去雄后套袋 数检验中的 Ｍａｎｎ￣Ｗｈｉｔｎｅｙ Ｕ 检验进行两组差异显
隔离昆虫ꎬ于第 ６ 天下午ꎬ对每天选取的 １５ 朵花 著性分析ꎻ对于花粉活力、柱头可授性和繁育系统
均采用距离大于 １０ ｍ 刚开放花朵的花粉进行人 结籽率数据采用非参数检验中 Ｋ 个独立样本的
工异交授粉ꎬ待果实成熟未裂时收取ꎬ统计每个果 Ｋｒｕｓｋａｌ￣Ｗａｌｌｉｓ 检验进行多组差异显著性分析ꎻ对于
实的成熟与败育种子数ꎬ以结籽率表征柱头可授 坐果率数据ꎬ采用卡方检验(Ｐｅａｒｓｏｎ χ ２ )进行多组差
性ꎬ结籽率(％)＝ 发育种子数 / (发育种子数 ＋ 败 异显著性分析ꎬ事后两两比较结果采用 Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ
育种子数) ×１００ꎮ 校正(１５ 次比较ꎬα ＝ ０.０５ / １５ ≈ ０.００３ ３)ꎮ
１.３.３ 花粉 / 胚珠比(Ｐ / Ｏ) 随机选取 ２１ 个位于不
同植株上的花蕾ꎬ用 ＦＡＡ 固定液( 福尔马林 ∶ 乙 ２ 结果与分析
酸 ∶ ９５％ 乙 醇 ＝ ５ ∶ ５ ∶ ９０ꎬ Ｖ / Ｖ / Ｖ) 保 存ꎮ 依 据
Ｄａｆｎｉ(１９９２)的方法ꎬ通过预试验发现单花 ５ 枚花 ２.１ 开花动态
药的花粉数量没有显著性差异ꎬ因此每朵花中取 １ 刺芒龙胆开花后ꎬ５ 枚花药占据花中心位置并
枚雄蕊置于离心管中ꎬ加入少量洗涤剂和 ９５％乙 包围雌蕊ꎬ柱头位于花药下方ꎮ 单花完全开放后
醇定容至 ２ ｍＬꎬ充分捣碎并混匀ꎬ吸取 １０ μＬ 悬液 即进入花药散粉期( 图 ２:Ａ)ꎬ伴随散粉过程花药
于载玻片上ꎬ在光学显微镜下重复计数 １０ 次取均 逐渐向四周散开并最终贴合于花冠壁上ꎬ自然传
值ꎬ单花花粉总量按“ 单枚雄蕊平均花粉数×２００× 粉下散粉持续时间大约为 ４ ｄꎮ 花开放后ꎬ花柱逐
５”计算ꎮ 随后在体视显微镜下解剖子房统计胚珠 渐伸长ꎬ大约 ２ ｄ 后柱头张开( 图 ２:Ｂ)ꎬ直至花永
数ꎬ计算花粉 / 胚珠比(Ｐ / Ｏ)ꎮ 久闭合ꎮ 以上结果表明ꎬ刺芒龙胆具有雌雄异熟
１.３.４ 繁育系统检测 随机选择 １８０ 个位于不同植 和雌雄异位的花特征ꎬ但雌雄异熟并不完全ꎮ 在
株的 花 蕾ꎬ 进 行 以 下 ６ 组 处 理 ( 每 种 处 理 各 ３０ 隔离昆虫条件下ꎬ刺芒龙胆的柱头展开期和总花
朵)ꎮ (１) 自 然 传 粉: 不 做 任 何 处 理 作 为 对 照ꎮ 期均显著长于自然传粉(表 １)ꎮ
(２)去雄后自然传粉:花蕾期去雄ꎮ (３) 不去雄套 花粉活力检测结果显示ꎬ刺芒龙胆的花粉萌
袋:花蕾期套袋ꎮ (４) 去雄套袋:花蕾期先去雄后 发率在单花完全开放后的前 ３ ｄ 均维持较高水平
套袋ꎮ (５)人工自交:花蕾期先去雄后套袋ꎬ待柱 ( >５５％)ꎬ每日间差异不显著ꎬ至第 ２ 天出现峰值
头完全张开(进入雌性期) 后用同株花粉进行人工 (７１.１２±３.３１)％ꎬ随后第 ５ 天和第 ６ 天的花粉萌发
授粉后重新套袋ꎮ (６)人工去雄异交:花蕾期先去 率显著下降( <２０％)ꎬ据此判断有效花粉活力可以
雄后套袋ꎬ待柱头完全张开( 进入雌性期) 后用距 维持 ４ ｄ 左右(图 ３)ꎮ

离> １０ ｍ 的异株花粉进行人工授粉后重新套袋ꎮ 柱头可授性检测结果显示ꎬ刺芒龙胆的结籽
所有套袋一直到花冠永久闭合为止去除ꎬ１ 个月左 率在柱头完全张开(进入雌性期) 后的前 ４ ｄ 之间
右收集 成 熟 但 未 裂 开 的 果 实ꎬ 统 计 坐 果 率 和 结 不存在显著性差异且维持在比较高的水平ꎬ峰值
籽率ꎮ 出现在第 ２ 天(７１.１１±７.９１)％ꎬ到第 ５ 天和第 ６ 天
１.３.５ 传粉昆虫观察 于盛花期晴朗无风的天气 结籽率明显降低( <２０％)ꎬ表明柱头可授期约为 ４
进行ꎮ 在 ９:００—１８:００ 进行观察ꎬ以 ３０ ｍｉｎ 为 １ ｄ(图 ４)ꎮ