Page 52 - 《广西植物》2020年第12期

ϟ԰ 期 张 花 等 ᧥ 盐穗木病程相关蛋白 ̀ዹ۪኏ϟԡ 抗血清的制备及鉴定 ϟ Ꭾ ሕ Ꭾ

ዛ঎ ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ 的原核诱导表达检测জ ᤹঎ 蛋白 ᥘᑕʢҴᔀʢଫ ϓܦᇺܦጇܦ᎒঎ϟͱ࿗ 号菌液的诱导前总蛋白ଫ ԣܦ྽ܦᣤܦࣽ঎ϟͱ࿗ 号菌液
的诱导后总蛋白ᤥ ଧ঎ ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ 原核诱导表达的可溶性检测জ ᤹঎ 蛋白 ᥘᑕʢҴᔀʢଫ ϓ঎ 诱导前总蛋白ଫ ԣ঎ 诱导后总蛋白ଫ
ᇺ঎ 诱导后总蛋白上清ଫ ྽঎ 诱导后总蛋白沉淀ᤥ
ዛ঎ ۪ʢᆍҴᑕʢᢃᆍᡷᔽዹ ᔀ଴ᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᆍ஦ ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡজ ᤹঎۪ʢᆍᡷᔀᔽႿ ቝᑕʢҴᔀʢଫ ϓᖔ ᇺᖔ ጇᖔ ᎒঎ ఋᆍᡷᑕ᤟ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ ᆍ஦ ᤦᑕዹᡷᔀʢᔽᑕ ༁ᆍ᤟ࣼᡷᔽᆍႿ ϟ ᡷᆍ ࿗ ᤦᔀ஦ᆍʢᔀ ᧧۪ఋ᥈
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᤹঎ ۪ʢᆍᡷᔀᔽႿ ቝᑕʢҴᔀʢଫ ϓ঎ ఋᆍᡷᑕ᤟ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ ᤦᔀ஦ᆍʢᔀ ᧧۪ఋ᥈ ᔽႿʛࣼዹᡷᔽᆍႿଫ ԣ঎ ఋᆍᡷᑕ᤟ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ ᑕ஦ᡷᔀʢ ᧧۪ఋ᥈ ᔽႿʛࣼዹᡷᔽᆍႿଫ ᇺ঎ ఋᆍᡷᑕ᤟ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ ༁ࣼᡱᔀʢႿᑕᡷᑕႿᡷ ᑕ஦ᡷᔀʢ ᧧۪ఋ᥈
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图 ԰জ ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ 的原核诱导表达及重组蛋白 ̀ᔽ༁᥋̀ዹ۪኏ϟԡ 的可溶性检测
èᔽ੫঎ ԰জ ۪ʢᆍҴᑕʢᢃᆍᡷᔽዹ ᔀ଴ᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᆍ஦ ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ ᑕႿʛ ༁ᆍ᤟ࣼᤦ᤟ᔀ ᑕ༁༁ᑕᢃ ஦ᆍʢ ʢᔀዹᆍቝᤦᔽႿᑕႿᡷ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ ̀ᔽ༁᥋̀ዹ۪኏ϟԡ

不同字母表示显著性差异ྉۗጐԡ঎ԡጢɯᤥ
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图 ሕজ 不同诱导条件对 ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ
᤹঎ 蛋白 ᥘᑕʢҴᔀʢଫ ϓ঎ ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ 诱导前ଫ ԣ঎ାᓂ԰ϟ᥋
可溶性融合蛋白表达量的影响
ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ 诱导 后ଫ ᇺ঎ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ 诱导后
èᔽ੫঎ ሕজ ጶ஦஦ᔀዹᡷ༁ ᆍ஦ ʛᔽ஦஦ᔀʢᔀႿᡷ ᔽႿʛࣼዹᡷᔽᆍႿ ዹᆍႿʛᔽᡷᔽᆍႿ༁ ᆍႿ ᡷၤᔀ
上清ଫ ྽঎ ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ 诱导后沉淀ଫ ጇ঎ 纯化的 ̀ᔽ༁᥋
ᔀ଴ᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᆍ஦ ༁ᆍ᤟ࣼᤦ᤟ᔀ ஦ࣼ༁ᔽᆍႿ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ ᔽႿ ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ
̀ዹ۪኏ϟԡᤥ
᤹঎ ۪ʢᆍᡷᔀᔽႿ ቝᑕʢҴᔀʢଫ ϓ঎ ାᔀ஦ᆍʢᔀ ᔽႿʛࣼዹᡷᔽᆍႿ ᆍ஦ ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ
化ᤥ 本试验将构建成功的盐穗木重组表达载体 ᤦᢃ ᧧۪ఋ᥈ଫ ԣ঎ ዶ஦ᡷᔀʢ ᔽႿʛࣼዹᡷᔽᆍႿ ᆍ஦ ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ ᤦᢃ ᧧۪ఋ᥈ଫ
ᇺ঎ ୩ࣼᡱᔀʢႿᑕᡷᑕႿᡷᆍ஦ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ ᑕ஦ᡷᔀʢ ᧧۪ఋ᥈ ᔽႿʛࣼዹᡷᔽᆍႿଫ
ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ 导入大肠杆菌 ାᓂ԰ϟ 中诱导表达ᖔ ྽঎ ۪ʢᔀዹᔽᡱᔽᡷᑕᡷᔽᆍႿ ᆍ஦ ାᓂ԰ϟ᥋ᡱጶఋ԰ऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡ ᑕ஦ᡷᔀʢ ᧧۪ఋ᥈ ᔽႿʛࣼዹᡷᔽᆍႿଫ
诱导后的蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在ᖔ ጇ঎ ۪ࣼʢᔽ஦ᔽᔀʛ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ ̀ᔽ༁᥋̀ዹ۪኏ϟԡ঎

影响了蛋白的大量获得及后续纯化工作的开展ᤥ 图 ࿗জ ̀ᔽ༁᥋̀ዹ۪኏ϟԡ 重组蛋白的大量诱导表达及纯化
诱导温度ܦ᧧۪ఋ᥈ 浓度ܦ诱导时间和诱导转速是影响 èᔽ੫঎ ࿗জ ᥘᑕ༁༁ᔽ׹ᔀ ᔀ଴ᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᑕႿʛ ᡱࣼʢᔽ஦ᔽዹᑕᡷᔽᆍႿ ᆍ஦
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原核表达及蛋白可溶性的主要因素ᖔ正交试验设