Page 27 - 《广西植物》2020年第4期
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4 期            刘成等: 基于 SRAP 标记的紫溪山华山松种子园无性系遗传多样性分析                                         4 6 5


                                         表 2  SRAP 引物序列
                                     Table 2  SRAP primer sequences

          序号                 正向引物(5′-3′)                  序号                  反向引物(5′-3′)
       Order number         Forward primer(5′-3′)      Order number         Reverse primer(5′-3′)
          ME1              TGAGTCCAAACCGGATA              EM1              GACTGCGTACGAATTTGA

          ME2              TGAGTCCAAACCGGAGC              EM2              GACTGCGTACGAATTCTG
          ME3              TGAGTCCAAACCGGACC              EM3              GACACCGTACGAATTGAC
          ME4              TGAGTCCAAACCGGTAA              EM4              GACTGCGTACGAATTTGC
          ME5              TGAGTCCAAACCGGAAT              EM5              GACTGAGTACGAATTAAC
          ME6              TGAGTCCAAACCGGAAG              EM6              GACTGCGTACGAATTAAT
          ME7              TGAGTGGAAACCGGTCC              EM7              GACTGCGTACGAATTCAA
          ME8              TGAGTCCAAACCGGTGC              EM8              GACTGCGTACGAATTGAC
           F7              GTAGCACAAGCCGGAGC              EM9              GACTGCGTACGAATTCCA
          FME6             TGAGTCCTTTCCGGTAA              EM10             GACTGCGTACGAATTGCA



                              表 3  华山松 15 对多态性 SRAP 引物序列信息
            Table 3  SRAP sequence information of the 15 pairs of polymorphic primers for Pinus armandii

        引物组合                正向引物(5′-3′)                 反向引物(5′-3′)                  退火温度
     Primer combination   Forward primer(5′-3′)        Reverse primer(5′-3′)   Annealing temperature (℃ )
        ME1 ̄EM5           TGAGTCCAAACCGGATA           GACTGAGTACGAATTAAC               53

        ME1 ̄EM8           TGAGTCCAAACCGGATA           GACTGCGTACGAATTGAC               53
        ME2 ̄EM4           TGAGTCCAAACCGGAGC           GACTGCGTACGAATTTGC               53
        ME2 ̄EM7           TGAGTCCAAACCGGAGC           GACTGCGTACGAATTCAA               53
        ME2 ̄EM9           TGAGTCCAAACCGGAGC           GACTGCGTACGAATTCCA               53
        ME3 ̄EM1           TGAGTCCAAACCGGACC           GACTGCGTACGAATTTGA               53
        ME3 ̄EM10          TGAGTCCAAACCGGACC           GACTGCGTACGAATTGCA               53
        ME3 ̄EM3           TGAGTCCAAACCGGACC           GACACCGTACGAATTGAC               53
        ME3 ̄EM5           TGAGTCCAAACCGGACC           GACTGAGTACGAATTAAC               53
        ME3 ̄EM8           TGAGTCCAAACCGGACC           GACTGCGTACGAATTGAC               53

        ME4 ̄EM1           TGAGTCCAAACCGGTAA           GACTGCGTACGAATTTGA               53
        ME4 ̄EM2           TGAGTCCAAACCGGTAA           GACTGCGTACGAATTCTG               53
        ME4 ̄EM3           TGAGTCCAAACCGGTAA           GACACCGTACGAATTGAC               53
        ME4 ̄EM7           TGAGTCCAAACCGGTAA           GACTGCGTACGAATTCAA               53
        ME4 ̄EM9           TGAGTCCAAACCGGTAA           GACTGCGTACGAATTCCA               53



   考带型ꎬ根据实验得到的聚丙烯凝胶电泳图ꎬ同一                                利用 Excel 表对 60 株华山 松 进 行 多 态 位 点
   位点清晰的条带ꎬ记“1”ꎻ无带或者弱带记“0”ꎬ模                         数、多 态 性 百 分 比 统 计 计 算ꎻ 通 过 POPGENE
   糊不清的不予计数ꎬ从而构成(0ꎬ1) 矩阵ꎬ调整格                         version 1. 32 分析软件进行遗传多样性分析[ 观测
   式以符合软件分析要求ꎮ                                       等位基因( Na)、有效等位基因数( Ne)、基因多样
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