Page 63 - 《广西植物》2020年第4期
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Ｇｕｉｈａｉａ Ａｐｒ. ２０２０ꎬ ４０(４): ５０１－５０８
ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１８１２００２
原晓龙ꎬ 陈中华ꎬ 李云琴ꎬ 等. 蒜头果中 ＣＹＰ７１ 基因克隆与果实不同发育时期的表达分析 [Ｊ]. 广西植物ꎬ ２０２０ꎬ ４０(４): ５０１－５０８.
ＹＵＡＮ ＸＬꎬ ＣＨＥＮ ＺＨꎬ ＬＩ ＹＱꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｌｏｎｉｎｇ ｏｆ ＣＹＰ７１ ｇｅｎｅ ｉｎ Ｍａｌａｎｉａ ｏｌｅｉｆｅｒａ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ｐｅｒｉｏｄｓ
[Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ ２０２０ꎬ ４０(４): ５０１－５０８.
蒜头果中 ＣＹＰ７１ 基因克隆与果实
不同发育时期的表达分析
原晓龙ꎬ 陈中华ꎬ 李云琴ꎬ 王 毅 ∗
( 云南省林业和草原科学院ꎬ 云南省森林植物培育与开发利用重点实验室ꎬ 国家林业和草原局
云南珍稀濒特森林植物保护与繁育重点实验室ꎬ 昆明 ６５０２０１ )
摘 要: 由氨基酸衍生的氰苷是由植物细胞色素 Ｐ４５０ 单加氧酶(ＣＹＰ) 催化氨基酸生成的次生代谢产物ꎬ
与植物的防御和抗逆境胁迫相关ꎮ 该研究通过分析蒜头果转录组数据ꎬ从中分离并克隆得到 １ 条细胞色素
Ｐ４５０ 基因(命名为 ＭｏＣＹＰ７１ꎬＧｅｎＢａｎｋ 登录号为 ＭＫ１７２８５８)ꎬ对其进行生物信息学分析并检测该基因在果
实不同发育时期的表达情况ꎮ 结果表明:ＭｏＣＹＰ７１ 基因含 １ ５７２ ｂｐꎬ编码 ５２３ 个氨基酸ꎬ该基因的 ｃＤＮＡ 序
列与咖啡(Ｃｏｆｆｅａ ｅｕｇｅｎｉｏｉｄｅｓꎬＸＭ＿０２７３１９２８２)、小果咖啡(Ｃｏｆｆｅａ ａｒａｂｉｃａꎬＸＭ＿０２７２１３４５６)中的 ＣＹＰ７１ 基因的
ｍＲＮＡ 序列均有 ８８％的一致性ꎻＭｏＣＹＰ７１ 蛋白的相对分子质量为 ５８ ９７６.５４ꎬ理论等电点 ｐＩ 为 ８.１０ꎬ分子式
为 Ｃ Ｈ Ｎ Ｏ Ｓ ꎬ不稳定系数(Ⅱ)为 ４０.８４ꎬ是一种不稳定蛋白ꎻ该蛋白不存在信号肽ꎬ存在于分泌途
２６７５ ４１８４ ７０４ ７４４ ２７
径ꎬ含有两个跨膜结构ꎬ分别位于 ２０~ ３７ 和 ３１１~ ３３３ 位的氨基酸为跨膜疏水螺旋ꎬ锚定于细胞器上ꎻ该蛋白
含有 ＣＹＰ 家族的保守结构域ꎬ包括脯氨酸富集区(ＰＰＳＰＰＲＬＰ)、Ｋ 螺旋(ＫＥＴＦＲ)、Ｉ 螺旋(ＧＧＩＤＴＳ)、ＰＥＲＦ
域(ＰＥＲＦ)和识别结构域血红素结合域( ＦＧＡＧＲＲＩＣＰＧ)ꎬ与可可、榴莲、高粱等的 ＣＹＰ７１Ｅ 家族的蛋白
(ＧｅｎＢａｎｋ 登录号分别为 ＥＯＸ９２９０８.１、ＸＰ＿０２２７７３８７５.１ 和 ＡＡＣ３９３１８.１) 聚为一支ꎻ在花谢后ꎬＭｏＣＹＰ７１ 基
因表达量逐渐降低ꎬ 花谢后 １ 个月>２ 个月>３ 个月ꎬ但在花谢后 ４ 个月的表达量急剧增加ꎮ 以上结果对研
究蒜头果的对虫害的防御、组织成熟及蒜头果中有效次生代谢产物的发掘具有重要意义ꎮ
关键词: 蒜头果ꎬ ＣＹＰ７１ 基因ꎬ 氰苷ꎬ 生物信息学分析ꎬ 基因表达
中图分类号: Ｑ７８１ 文献标识码: Ａ
文章编号: １０００￣３１４２(２０２０)０４￣０５０１￣０８ 开放科学(资源服务)标识码(ＯＳＩＤ):
Ｃｌｏｎｉｎｇ ｏｆ ＣＹＰ７１ ｇｅｎｅ ｉｎ Ｍａｌａｎｉａ ｏｌｅｉｆｅｒａ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ｐｅｒｉｏｄｓ
∗
ＹＵＡＮ Ｘｉａｏｌｏｎｇꎬ ＣＨＥＮ Ｚｈｏｎｇｈｕａꎬ ＬＩ Ｙｕｎｑｉｎꎬ ＷＡＮＧ Ｙｉ
( Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏｒ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒａｒｅꎬ Ｅｎｄａｎｇｅｒ ＆ Ｅｎｄｅｍｉｃ Ｆｏｒｅｓｔ Ｐｌａｎｔｓꎬ Ｓｔａｔｅ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ ａｎｄ Ｇｒａｓｓｌａｎｄ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎꎬ Ｙｕｎｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｋｅｙ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｅｘｐｌｏｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔ Ｐｌａｎｔｓꎬ Ｙｕｎｎａｎ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ ａｎｄ Ｇｒａｓｓｌａｎｄꎬ Ｋｕｎｍｉｎｇ ６５０２０１ꎬ Ｃｈｉｎａ )
收稿日期: ２０１９－０１－３１
基金项目: 国家自然科学基金 (３１８６０１７７)ꎻ云南省应用基础研究青年项目(２０１７ＦＤ１６９ꎬ ２０１６ＦＤ１００)ꎻ云南省林业科学院创新基
金(ＱＮ２０１８－０１) [Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ(３１８６０１７７)ꎻ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂａｓｉｃ Ｒｅａｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒａｍ ｆｏｒ
Ｙｏｕｎｇ Ｓｃｈｏｌａｒｓ ｉｎ Ｙｕｎｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ(２０１７ＦＤ１６９ꎬ ２０１６ＦＤ１００)ꎻ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｉｎ Ｙｕｎｎａｎ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ(ＱＮ２０１８￣０１)]ꎮ
作者简介: 原晓龙(１９８６－)ꎬ男ꎬ陕西蒲城人ꎬ硕士ꎬ助理研究员ꎬ从事林木分子生物学研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｘｉａｏｌｏｎｙ＠ １２６.ｃｏｍꎮ
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通信作者: 王毅ꎬ博士ꎬ副研究员ꎬ主要从事植物学和分子生物学研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)２２８２５８１８＠ ｑｑ.ｃｏｍꎮ
