Page 38 - 《广西植物》2020年第9期
P. 38

9 期               于玉龙等: 贯叶马兜铃叶挥发性成分的地理变化及其潜在价值分析                                          1 2 5 3

   杨庆宽(1995)研究已表明该植物的精油主要存在                          保持 5 minꎬ程序升温 5 ℃ min ꎬ至 280 ℃ ꎻ柱流
                                                                                    ̄1
   于叶片中ꎬ鉴于挥发性气味是挥发油的外在表现                             量为 1.0 mLmin ꎻ进样温度 250 ℃ ꎻ柱前压 100
                                                                       ̄1
   形式ꎬ且癸烯醛是贯叶马兜铃挥发油和叶挥发性                             kPaꎻ进样量 1.0 μLꎻ分流比 10 ∶ 1ꎻ载气为高纯氦
   气味的主成分ꎬ从而以贯叶马兜铃叶的挥发性成                             气ꎮ MS 条件:电离方式 EIꎬ电子能量 70 eVꎻ传输
   分中癸烯醛含量来表示精油的“ 质量”ꎮ 因此ꎬ我                          线温度 250 ℃ ꎻ离子源温度 230 ℃ ꎻ四级杆温度
   们对不同地理区域的贯叶马兜铃叶挥发性气味成                             150 ℃ ꎻ质量扫描范围 35 ~ 500 amuꎮ
   分进行分析ꎬ来探究贯叶马兜铃挥发性成分在不                             1.3 数据处理

   同居群间的特异性、稳定性和一致性ꎮ                                     采用 Wiley7n.1 谱库检索定性确认贯叶马兜
       本研究按照对材料处理的传统做法( 陈佳龄                          铃叶的挥发性化学成分ꎬ按照峰面积归一化法计
   等ꎬ2013ꎻ李美萍等ꎬ2019)ꎬ采用固相微萃取-气质                      算出各化学成分的峰面积相对百分含量ꎬ并用正
   联用技术ꎬ对来自香格里拉三坝乡、丽江大具、鹤
                                                     壬烷定量植物的自然释放量ꎬ同时用在 Sigma 购买
   庆黄坪、楚雄铁锁乡和禄劝则黑乡五个不同地理
                                                     的标准品比对主成分反式 ̄2 ̄癸烯醛的真实性ꎮ
   居群的贯叶马兜铃植物叶片挥发性成分进行提取
   与分析ꎬ通过对不同居群植株叶挥发性成分稳定
                                                     2  结果与分析
   性和差异性的比较ꎬ筛选出稳定、高质量贯叶马兜

   铃精油的种源ꎬ为以后的合理开发、种植ꎬ充分利
                                                         本研究从五个不同地理区域的贯叶马兜铃叶
   用其经济价值ꎬ以及为改变当地居民的传统食用
                                                     中共检出 46 个化合物ꎬ详情见表 2ꎮ 其中来自香
   方式和改善居民的健康状况提供科学依据ꎮ
                                                     格里拉三坝乡居群植株叶片共鉴定出 16 个挥发
                                                     性成分ꎬ占总挥发性成分的 97.86%ꎮ 丽江大具乡
   1  材料与方法
                                                     居群中共鉴定出 26 个挥发性成分ꎬ占总挥发性成
                                                     分的 99.13%ꎮ 楚雄铁锁乡居群中共鉴定出 22 个
   1.1 材料
                                                     挥发性成分ꎬ占总挥发性成分的 98.58%ꎮ 禄劝则
       自五个不同地理区域的 新 鲜 贯 叶 马 兜 铃 叶
                                                     黑乡居群中共鉴定出 24 个挥发性成分ꎬ占总挥发
   片ꎬ具体采集信息见表 1ꎮ 材料采集后在相同的条
                                                     性成分的 97.93%ꎮ 在来自鹤庆黄坪居群植株叶
   件下自然阴干ꎮ
                                                     片中共分离出 30 个挥发性成分ꎬ占挥发性成分总
   1.2 方法
                                                     量的 94.56%ꎬ然而其主要挥发性成分及其含量与
   1.2.1 固相微萃取( 采集挥发性成分)   分别称取
                                                     前四个居群差异明显ꎬ具体见表 3ꎮ 由此可见ꎬ除
   不同地理区域阴干的植物叶片 3 gꎬ剪碎后分别置
                                                     了来自黄坪地区的居群外ꎬ其他四个地区来源的
   于 20 mL 顶空萃取瓶里ꎬ每个萃取瓶中加入 10 μL
                                                     贯叶马兜铃叶主要挥发性成分均为反式 ̄2 ̄癸烯
   内标(二氯甲烷溶解的正壬烷 720 ng)ꎬ加磁性铁
   盖密封后进行萃取ꎮ 插入 65 μm DVB / PDMS 萃取                  醛ꎬ且 分 别 占 挥 发 性 成 分 检 出 总 量 的 63. 47%、
   头于 35 ℃ 顶空萃取 45 minꎬ于 200 ℃ 汽化室解吸                 79.31%、69.91%、79.57%ꎬ这与之前研究的结果相
   5 minꎮ 详细实验流程参考 Chen et al.(2015) 的方              似(Li et al.ꎬ 2013ꎻ陈高等ꎬ2018)ꎮ 另外ꎬ通过对
   法进行 GC ̄MS 分析ꎮ 为确定挥发性成分的稳定                         萃取过程中加入的内标( 正壬烷) 换算得出ꎬ上述

   性ꎬ分别取同一居群的不同植株叶片各进行 3 次                           五个居群中每个居群植株干叶片平均每克每小时
   重复实验ꎮ                                             释放 癸 烯 醛 的 量 分 别 为 17. 31、 21. 63、 19. 06、
   1.2.2 GC ̄MS 分析  采用美国 Agilent Technologies         21.70、1.22 ngꎮ 从以上结果可以看出ꎬ来自大具
   公司生产的 HP6890GC / 5973MS 型气相色谱 / 质谱                和禄劝两居群的植株叶挥发性成分中癸烯醛占有
   联用仪ꎮ 气相色谱条件:HP ̄5MS 石英毛细管柱                         较高含量以及相对较高的释放量ꎬ且在居群内具
   (30 m × 0.25 mm × 0.25 μm)ꎻ柱温起始为 40 ℃ ꎬ           有较好的稳定性ꎮ
   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43